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YAC 克隆的分析實驗 實驗庫 參考來源：2021/12/24
材料與儀器酵母菌AHCYPD甘油培養(yǎng)箱冷凍管步驟1.用接種棒將含重組載體pYAC的AB1380菌株劃線接種在AHC平板上，倒扣平板于30℃培養(yǎng)，直至長出1~3mm大小的紅色菌落為止。2.短期保存：用P...
熒光原位雜交技術(shù)2021/12/24
原理用已知的標記單鏈核酸為探針，按照堿基互補的原則，與待檢材料中未知的單鏈核酸進行異性結(jié)合，形成可被檢測的雜交雙鏈核酸。由于DNA分子在染色體上是沿著染色體縱軸呈線性排列，因而可以探針直接與染色體進行...
細胞傳代培養(yǎng)實驗常見問題詳解2021/12/23
01一般拿到細胞后，應(yīng)該注意什么?收到細胞先不開蓋,用酒精將整個細胞瓶外壁進行消毒，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議收細胞時的培...
細胞培養(yǎng)常遇問題集錦（十七）2021/12/23
細胞培養(yǎng)問題集錦第十七期，小編會繼續(xù)收集相關(guān)問題，每期都為大家更新5個細胞培養(yǎng)中遇到的問題并解答~81、▲問：hepg2細胞有很多小球聚集到一起，這是污染還是沒有吹開的細胞？是不是念珠菌感染？出不來形...
細胞培養(yǎng)常遇問題集錦（十六）2021/12/23
細胞培養(yǎng)第十六期來了，今后也會陸續(xù)為大家更新，一起來看看吧~76、▲問：這是酵母菌感染嗎？一般會通過什么途徑污染？答：是酵母菌污染，像圈起來的連體結(jié)構(gòu)就是。一般是環(huán)境和操作等途徑污染。問：用新潔爾滅擦...
細胞培養(yǎng)常遇問題集錦（十五）2021/12/23
本次更新第十五期細胞培養(yǎng)常遇問題集錦，大家一起來看看有沒自己培養(yǎng)細胞時遇到的問題吧~71、問：凍存細胞放在4°最多可以放多久呀？如不小心忘記了大概放4°放了3個小時還可以用嗎？答：問題不大，有復(fù)蘇過這...
細胞培養(yǎng)常遇問題集錦（十四）2021/12/23
本期我們繼續(xù)更新細胞培養(yǎng)常遇問題，看下有沒大家遇到的，讓我們細胞培養(yǎng)做得更好，個個細胞都養(yǎng)得“肥肥白白”~話不多說，以下為大家奉上本期精華~66、問：thp-1誘導貼壁之后，背景比較臟，還隱約看到有東...
內(nèi)質(zhì)網(wǎng)自噬及其特點詳解剖析2021/12/22
內(nèi)質(zhì)網(wǎng)自噬的概念最早于2007年提出，是指內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激誘導酵母發(fā)生針對內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的選擇性的自噬現(xiàn)象，其主要作用是降解多余的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜，控制內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的體積從而維持細胞穩(wěn)態(tài)。近年來隨著對內(nèi)質(zhì)網(wǎng)自噬的研究方法、形成機...
腫瘤免疫治療靶點及相關(guān)小分子抑制劑/激動劑詳解2021/12/22
腫瘤相關(guān)的免疫治療主要包括細胞療法、免疫檢查點抑制劑及腫瘤疫苗三大類。免疫檢查點抑制劑（ICIs）主要是單克隆抗體（mAbs），而抗體類藥物大多存在不能口服、組織滯留時間延長、不能透膜等多種缺陷。因此...
如何快速測量細胞劃痕寬度？2021/12/22
細胞劃痕實驗可謂是性價比高的一個小實驗了?？梢栽诓活~外購買實驗設(shè)備的情況下，一定程度地評價腫瘤細胞或者成纖維細胞的遷移能力。在課題組經(jīng)費的限制下，這個實驗成為很多老板的*。細胞劃痕實驗本身的操作很簡單...
細胞培養(yǎng)常遇問題集錦（十三）2021/12/22
細胞培養(yǎng)常遇問題集錦系列，由于之前小編都在收集一些大家實驗室中常遇到的問題并解答，現(xiàn)在和大家分享下最新的一期，希望這些真實案例可以真切的幫助到童鞋們在細胞實驗中少走彎路和解決問題，話不多說，以下上“正...
如何提升細胞轉(zhuǎn)染實驗效率?2021/12/22
細胞轉(zhuǎn)染是細胞生物學和分子生物學的一種常用的技術(shù)手段。而轉(zhuǎn)染效率低卻是實驗童鞋們經(jīng)常遇到的問題，尤其是原代細胞轉(zhuǎn)染，更是因為難度大，號稱誰碰誰死，而令人談虎色變。不，應(yīng)該是談原代細胞色變。那么，當實驗...
從M13噬菌體模板合成固定長度的單鏈DNA探針2021/12/21
材料與儀器大腸桿菌DNA聚合酶IKlenow片段限制性內(nèi)切核酸酶模板DNA寡核苷酸引物乙酸銨DTTEDTA乙醇NaCl酚氯仿TBE電泳緩沖液Tris-ClKlenow基礎(chǔ)緩沖液dNTP溶液變性聚丙烯酰...
差異顯示PCR2021/12/21
材料與儀器反轉(zhuǎn)錄酶熱穩(wěn)定DNA聚合酶錨定3'-寡核苷酸引物隨機5'-寡核苷酸引物總RNA帶放射標記的dATP擴增緩沖液DD-PCR反轉(zhuǎn)錄緩沖液DTTdNTP貯存液胎盤RNase抑制劑測序膠上樣緩沖液瓊...
cDNA 3'末端的快速擴增（3’-RACE)2021/12/21
原理在用oligo(dT)引物構(gòu)建的cDNA文庫中，偶而發(fā)生部分cDNA克隆缺失了與靶mRNA3'末端互補的序列。這部分序列到底是在cDNA合成過程中還是在分子克隆中怎樣缺失和在哪個環(huán)節(jié)中缺失的尚不清...
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