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中級(jí)會(huì)員 | 第4年

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大鼠肝細(xì)胞分離實(shí)驗(yàn)2022/12/5
原理經(jīng)肝門(mén)靜脈或肝門(mén)靜脈分支插管，用無(wú)鈣緩沖液灌洗肝15min，再用酶溶液灌洗15min。收集和洗滌細(xì)胞，計(jì)數(shù)有活力的肝細(xì)胞。材料與儀器L-15Leibovitz培養(yǎng)液HamF12培養(yǎng)液胞培養(yǎng)液HMM...
蛋白質(zhì)合成實(shí)驗(yàn)2022/12/5
材料與儀器步驟材料無(wú)菌細(xì)胞培養(yǎng)，如1X104～1X106個(gè)細(xì)胞，24孔板3H-亮氨酸。無(wú)血淸培養(yǎng)基中2MBq/ml(～50uCi/ml)(特異活性并不重要，因?yàn)樗鼘⒂膳囵B(yǎng)基中的亮氨酸濃度決定）非無(wú)菌S...
分離ARVM細(xì)胞2022/12/5
材料與儀器鼠KH緩沖液混合氣體對(duì)流工作臺(tái)或?qū)恿魇匠瑑襞_(tái)乙酉迷罩冷凝器循環(huán)水浴和水浴搖床圈型架蠕動(dòng)泵臺(tái)式醫(yī)用離心機(jī)無(wú)菌燒杯ColorpHastpH試紙步驟一、ARVM細(xì)胞分離的準(zhǔn)備工作1.準(zhǔn)備如下設(shè)備及...
分離雞胚背根神經(jīng)節(jié)2022/12/2
材料與儀器酶溶液DRG離心管培養(yǎng)皿解剖顯微鏡步驟解剖前在15ml離心管中配制酶溶液，置37℃水浴特用。2.解剖胚胎，解剖全過(guò)程保持組織濕潤(rùn)。(1)殺死胚胎，去腿，放于100mm培養(yǎng)皿。(2)用鈍頭剪刀...
分離培養(yǎng)細(xì)胞2022/12/2
原理骨豁肌源性成肌細(xì)胞能夠培養(yǎng)從幾種成年動(dòng)物骨骼肌分離的成肌細(xì)胞。在培養(yǎng)條件下，成肌細(xì)胞仍繼續(xù)表達(dá)一些分化特征。成肌細(xì)胞稱(chēng)衛(wèi)星細(xì)胞，分化早期的步驟與骨骼肌很相似。成肌細(xì)胞在培養(yǎng)底物上增殖和遷移，然后成...
E玫瑰花環(huán)形成試驗(yàn)2022/12/2
原理正常人外周血中T細(xì)胞在體外能直接和綿羊紅細(xì)胞（SRBC）結(jié)合形成玫瑰花樣細(xì)胞團(tuán)。這是因?yàn)槿说腡細(xì)胞膜上具有能和SRBC膜上的糖蛋白相結(jié)合的受體，稱(chēng)為E受體。已證實(shí)E受體是人T細(xì)胞所*的表面標(biāo)志，因...
多潛能干細(xì)胞的誘導(dǎo)2022/12/2
簡(jiǎn)介多潛能干細(xì)胞（in-ducedpluripotentstemcells，iPS）技術(shù)不僅可以解決胚胎干細(xì)胞來(lái)源引起的倫理問(wèn)題，而且自體iPS細(xì)胞可以避免異體來(lái)源胚胎干細(xì)胞移植引起的免疫排斥反應(yīng)。目...
大鼠肝癌模型法2022/12/2
原理1.Wnt/β-catenin信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路是一條在生物進(jìn)化中極為保守的通路。在正常的體細(xì)胞中，β-catenin只是作為一種細(xì)胞骨架蛋白在胞膜處與E-cadherin形成復(fù)合體對(duì)維持同型細(xì)胞的黏附...
端粒顯示實(shí)驗(yàn)2022/12/1
簡(jiǎn)介端粒（telomere）是真核細(xì)胞染色體末端的DNA重復(fù)序列，它與多種端粒結(jié)合蛋白結(jié)合在一起，發(fā)揮重要的生物學(xué)功能，在細(xì)胞分裂的過(guò)程中，盡管端粒也會(huì)不斷的縮短，但可以通過(guò)端粒酶的催化，以自身RNA...
蛋白質(zhì)分離實(shí)驗(yàn)2022/12/1
簡(jiǎn)介蛋白質(zhì)分離的方法主要有3種：SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳法分離蛋白質(zhì)、免疫沉淀法分離蛋白質(zhì)和雙向聚丙烯酰胺凝膠電泳法分離蛋白質(zhì)。原理SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳法分離蛋白質(zhì)的基本原理是蛋白質(zhì)在SDS和巰基...
EB病毒轉(zhuǎn)化成淋巴細(xì)胞2022/12/1
材料與儀器全血刀豆凝集素ARPMI生長(zhǎng)培養(yǎng)基離心管步驟混合10ml全血和10mlRPMI生長(zhǎng)培養(yǎng)基。生長(zhǎng)培養(yǎng)基（RPMI1640800ml，F(xiàn)BS200ml，2mmol/L-谷氨酰胺，5μg/ml兩性...
多能ES細(xì)胞的培養(yǎng)2022/12/1
材料與儀器PBS胰酶溶液MEF滋養(yǎng)板巴斯德吸管ES生長(zhǎng)培養(yǎng)基步驟1.準(zhǔn)備下列試劑和材料：60mmMEF滋養(yǎng)板（接種不能超過(guò)7天）帶棉塞無(wú)菌巴斯德吸管無(wú)Ca2+和Mg2+PBSES生長(zhǎng)培養(yǎng)基胰酶溶液2....
DAPI染DNA的原理及使用方法2022/12/1
材料與儀器DAPI即4',6-二脒基-2-苯基吲哚(4',6-diamidino-2-phenylindole)，分子式為C16H15N5·2C3H6O3，分子量457.48。DAPI是一種能夠與DN...
測(cè)定蛋白含量都有哪些方法？2022/11/1
蛋白的含量的測(cè)定方法主要有紫外分光光度法、Lowry法、BCA法等。紫外分光光度法原理蛋白質(zhì)中的酪氨酸和色氨酸殘基的苯環(huán)在275~280mm有一紫外吸收峰。在一定濃度范圍內(nèi)，其在280mm的吸光度與蛋...
如何才能把細(xì)胞培養(yǎng)好？2022/11/1
一、細(xì)胞培養(yǎng)的基本概念（1）基本概念細(xì)胞培養(yǎng)：狹義的細(xì)胞培養(yǎng)主要是指分離（散）細(xì)胞培養(yǎng)，廣義的細(xì)胞培養(yǎng)還包括單（個(gè)）細(xì)胞培養(yǎng)又稱(chēng)克隆（clone），是指單個(gè)細(xì)胞通過(guò)有絲分裂形成的細(xì)胞群體。一個(gè)細(xì)胞克隆...
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