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血清系列
細(xì)胞轉(zhuǎn)染
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生物三凝膠基質(zhì)
細(xì)胞因子分子
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血清沉淀知多少2023/1/10
血清沉淀是什么?血清中經(jīng)常會出現(xiàn)肉眼可見的沉淀,其成分有多種類型,產(chǎn)生的原因有很多,主要有纖維蛋白、磷酸鈣還有一些其它成分。1.纖維蛋白(Fibrin)血清中肉眼可見的沉淀物大多屬于這一類型。由于在生...
T淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化實驗2023/1/10
原理T細(xì)胞在體外培養(yǎng)時,受到非特異性有絲分裂原(如PHA、ConA)刺激后,可出現(xiàn)細(xì)胞體積增大,代謝旺盛,蛋白和核酸合成增加,即向淋巴母細(xì)胞轉(zhuǎn)化。淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率的高低可以反映機體的細(xì)胞免疫水平,因此可...
消除微生物污染2023/1/6
原理通過沖洗單層培養(yǎng)物或通過離心重懸非貼壁細(xì)胞,以高濃度抗生素清洗培養(yǎng)物數(shù)次,然后將培養(yǎng)物傳代,用加抗生素的培養(yǎng)基傳三次,再用不加抗生素的培養(yǎng)基傳三次,每次傳代后都要檢測是否污染。材料與儀器DBSS高...
分離人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞2023/1/6
材料與儀器D-PBSA胰蛋白酶EDTA人臍帶膠原蛋內(nèi)酶H冷的新生小牛血Hank平衡鹽溶液HBSSPSG70%乙醇HUVRC生長培養(yǎng)液培養(yǎng)瓶手術(shù)刀和22號刀片手術(shù)針20ml注射器鱷魚夾動脈夾尖頭剪棉紙鋁...
小鼠胚胎MEF細(xì)胞的提取2023/1/6
小鼠胚胎MEF細(xì)胞的提取步驟:1.將新鮮收獲的胚胎放入10厘米的細(xì)胞培養(yǎng)皿中2.用PBSA覆蓋胚胎,取出胎盤和其他母體組織3.切掉頭頂(眼睛及以上),取出內(nèi)臟4.保存頭部/卵黃囊進(jìn)行DNA分離以進(jìn)行基...
從哺乳動物細(xì)胞中制備核和細(xì)胞質(zhì)提取物2023/1/6
材料與儀器轉(zhuǎn)瓶或單層培養(yǎng)的哺乳動物細(xì)胞(如HeLa細(xì)胞)PBS低滲緩沖液高鹽緩沖液含1.2molLKCl透析緩沖液液氮貝克曼JS4.2轉(zhuǎn)子或相當(dāng)?shù)霓D(zhuǎn)子50mL圓錐形刻度聚丙烯離心管(對較小體積的提取物...
單層細(xì)胞在細(xì)胞瓶中的接種2023/1/6
原理單層生長的細(xì)胞增殖,融合成片,并長滿細(xì)胞瓶表面。有些細(xì)胞靠頻繁地?fù)Q液可維持細(xì)胞在平臺期數(shù)天至數(shù)周;而許多其他細(xì)胞系需要胰蛋白酶處理、傳代培養(yǎng)后才能存活下來,用胰蛋酶處理可將細(xì)胞從生長物表面分離下來...
細(xì)胞凍存實驗2023/1/5
原理傳統(tǒng)上的細(xì)胞凍存(甘油/二甲基亞砜做保護(hù)劑)講求的是:慢凍速溶。細(xì)胞凍存時向培養(yǎng)基中加入的甘油或二甲基亞砜(DMSO),這兩種物質(zhì)能提高細(xì)胞膜對水的通透性,加上緩慢冷凍可使細(xì)胞內(nèi)的水分滲出細(xì)胞外,...
免疫熒光抗體法2023/1/5
原理用人結(jié)腸癌細(xì)胞為免疫原,免疫小鼠,制得鼠抗人結(jié)腸癌細(xì)胞表面抗原(Ag)的單克隆抗體IgG(第一抗體),二者可以發(fā)生特異性的抗原抗體反應(yīng),形成抗原抗體復(fù)合物,再加入市售(也可自制)的熒光標(biāo)記的羊抗鼠...
神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)實驗2023/1/5
材料與儀器大鼠CMF-Hanks液胰蛋白酶DMEMF12水浴鍋培養(yǎng)箱步驟一、原代培養(yǎng)1.選用生后1周的新生大白鼠,用碘酒,酒精棉球消毒,斷頭取其大腦皮層組織。2.解剖顯微鏡下,剝離腦膜,切除大腦髓質(zhì)部...
小鼠肝細(xì)胞培養(yǎng)實驗2023/1/5
原理直接從生物體內(nèi)獲取組織細(xì)胞進(jìn)行的首-次培養(yǎng)稱為原代細(xì)胞培養(yǎng)。原代培養(yǎng)是建立各種細(xì)胞系的第一步,是從事培養(yǎng)工作的人員應(yīng)熟悉和掌握的最基本的技術(shù)。根據(jù)培養(yǎng)方法不同分為組織塊培養(yǎng)法和單層細(xì)胞培養(yǎng)法。材料...
斑馬魚胚胎細(xì)胞的培養(yǎng)2023/1/5
原理收集胚胎,除去絨毛膜,用胰蛋白酶分散胚胎細(xì)胞,然后在胚胎成纖維細(xì)胞飼養(yǎng)層上培養(yǎng)從斑馬魚囊胚和原腸期胚獲得的原代細(xì)胞。材料與儀器鏈酶蛋白酶E用D-PBSA配制1%胰蛋白酶和1mmolLEDTA胚胎成...
原代細(xì)胞怎么永生化2023/1/4
原代細(xì)胞都無法擴增幾輪增殖,這被稱為Hayflick極限,因為每一輪的增殖都會縮短端粒。當(dāng)端粒達(dá)到臨界縮短長度時,DNA損傷被觸發(fā),導(dǎo)致細(xì)胞衰老,如果你試圖培養(yǎng)一個珍-稀原代細(xì)胞群,當(dāng)心它最終會死亡,...
內(nèi)皮細(xì)胞實驗的新秀來啦2023/1/4
內(nèi)皮細(xì)胞實驗的新秀來啦,HECV人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞來啦,HECV細(xì)胞是不-可-多得的永生化內(nèi)皮細(xì)胞株,代次靠前,一周可以傳4-5次,8-12小時可達(dá)到5倍增,遠(yuǎn)遠(yuǎn)超于HMEC-1細(xì)胞株和HUVEC-T1...
收到活細(xì)胞怎么處理?2023/1/4
收到細(xì)胞后,發(fā)現(xiàn)是培養(yǎng)瓶,第一次操作的束手無策,怎么辦?首先我們得弄明白我們得細(xì)胞是貼壁細(xì)胞還是懸浮細(xì)胞或者是半懸浮細(xì)胞,不明白的同學(xué)可以參考下圖哦:貼壁細(xì)胞:SKOV3懸浮細(xì)胞:THP-1半懸浮半貼...

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