性猛交XXXX乱大交派对,四虎影视WWW在线观看免费 ,137最大但人文艺术摄影,联系附近成熟妇女

深圳市安培生物科技有限公司
中級會員 | 第4年

19126518388

血清系列
細胞轉染
支原體清除
細胞凍存
實驗耗材
分子試劑
細胞增殖與凋亡
Biozellen系列
培養(yǎng)基
ELISA試劑盒
TOYOBO(東洋紡)
ZYMO RESEARCH
Greiner(格瑞納)
IKA(艾卡)
化學發(fā)光底物(ECL)
PROSPEC系列
Epigentek系列
微生物檢測
細胞生物學
Corning康寧
解離試劑
細胞類-實驗耗材
原代細胞
植物檢測系列試劑盒
SERANA
BSA
細胞系
生化試劑盒
環(huán)境檢測系列試劑盒(AKEN)
類器官培養(yǎng)
緩沖器和解決方案
生物三凝膠基質
細胞因子分子
生物樣本庫

CHO-K1倉鼠卵巢細胞株的培養(yǎng)方法

時間:2024/4/10閱讀:559
分享:

中國倉鼠卵巢(Chinese hamster ovary, CHO)細胞是第一個被美國FDA、歐盟EMA和中國CFDA認可的用于生物制藥領域的生產(chǎn)細胞,已廣泛應用于各種治療性蛋白質藥物的大規(guī)模制備,包括重組抗體、重組單體蛋白質以及重組融合蛋白質等。CHO-K1是未經(jīng)改造的野生型CHO細胞。最原始的CHO-K1細胞是貼壁培養(yǎng),并需要添加血清,由于血清的批間穩(wěn)定性問題,及后來病毒安全性問題,無血清懸浮培養(yǎng)成為趨勢。實驗室常以貼壁的CHO K1細胞構建穩(wěn)轉細胞株。

 

                                圖片


細胞形態(tài):長梭形(10×倍鏡)
培養(yǎng)條件:DMEM/F12培養(yǎng)基,胎牛血清終濃度為10%
培養(yǎng)溫度:37°C

細胞復蘇:


1.在攝氏37度的水浴中輕輕攪動,為防止受到污染,不要把O形環(huán)和蓋子放在外面。解凍應迅速(約2分鐘)。
2.解凍后把凍存管盡快從水中拿出來,用75% 乙醇浸泡或噴灑消毒乙醇。從現(xiàn)在開始所有的操作都應該進行在嚴格的無菌條件下進行。
3.將細胞懸液轉移到含有9 ml(血清)細胞培養(yǎng)基的離心管中,10000 rpm離心5分鐘。
4.棄上清,用(血清)細胞培養(yǎng)基重懸細胞,轉移至T25細胞培養(yǎng)瓶中。
注意:在T25瓶加入細胞之前,可以先將包含(血清)細胞培養(yǎng)基的容器放入培養(yǎng)箱內至少15分鐘,以便培養(yǎng)基達到正常PH(7.0至7.6)。
5.將培養(yǎng)瓶轉移至37℃,5% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。


細胞傳代:


1.棄去培養(yǎng)基,用PBS沖洗兩遍細胞層,以消除所有痕量的血清
2.加入2.0 ~ 3.0 mL  0.25%(w/v)胰蛋白酶溶液消化細胞,在倒置顯微鏡下觀察細胞直到細胞層分散。
注意:為了避免結塊,請不要通過擊打或搖晃瓶子。可在37℃培養(yǎng)箱等待細胞,加快細胞分散的速度。
3.加入6 - 8 mL的(血清)細胞培養(yǎng)基終止消化并反復吹打,轉移至離心管,1000 rpm 5 min。
注意:(血清)細胞培養(yǎng)基里有血清,血清里過量的血清蛋白與胰酶結合,競爭性抑制,使胰酶無法繼續(xù)消化細胞。
4.  棄上清,添加新的培養(yǎng)基重懸細胞,向培養(yǎng)瓶/培養(yǎng)皿中添加適當?shù)募毎麘腋∫海⒀a充新鮮(血清)細胞培養(yǎng)基。
5. 將培養(yǎng)瓶轉移至37℃,5% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
注意:ATCC建議傳代比例為:1:4至1:8。


細胞凍存:


1.當細胞處于對數(shù)生長期時,可進行細胞凍存。
注意:常見的細胞凍存密度是1-10*10^6 cells/mL。
2.棄去培養(yǎng)基,用PBS沖洗兩遍細胞層,以消除所有痕量的血清和細胞生長過程中產(chǎn)生的廢料。
3.加入2.0 ~ 3.0 mL 0.25%(w/v)胰蛋白酶溶液消化細胞,在倒置顯微鏡下觀察細胞直到細胞層分散。
4.加入適量的(血清)細胞培養(yǎng)基終止消化,槍頭反復吹打混勻后將細胞懸液轉移至離心管,1000 rpm 5 min。
5.棄上清,依次加入700 μL培養(yǎng)基,200 μL胎牛血清重懸細胞,最后添加 10% DMSO 后梯度降溫凍存。

注意:DMSO加到細胞里會迅速放熱,對細胞活力造成損傷,因此可以選擇在最后一步添加,加完迅速轉移至低溫。

以上就是本期的內容,更多資訊,歡迎點擊安培生物網(wǎng)站鏈接了解更多技術與產(chǎn)品資訊。

安培生物致力成為推動生命科學進步值得信賴的合作者

深圳/湛江安培生物科技有限公司,是一家具有核心的技術實力、先進的經(jīng)營管理水平和完善的市場銷售體系的生物高科技企業(yè)??偛吭O在廣東,服務面向全國。安培生物集進口試劑、實驗室耗材銷售、技術服務與合約開發(fā)為一體的專業(yè)化高科技公司,旨在為生命科學的發(fā)展提供較好的產(chǎn)品與服務。本公司建立了涵蓋分子生物學、細胞生物學、免疫學、信號傳導和神經(jīng)科學等領域的產(chǎn)品供應線,在各個領域內向用戶提供較高的水平和質量穩(wěn)定的產(chǎn)品,安培生物致力于為廣大的科研機構、高等院校等客戶提供各種產(chǎn)品、技術支持與服務。


可以在第一時間為用戶提供比較先進的專業(yè)資訊和完備的產(chǎn)品和物流服務。 專業(yè)的技術力量使得我們能夠為廣大用戶提供強大的技術支持,深厚的人脈資源使得我們在全國主要城市擁有眾多的合作伙伴,安培生物非常榮幸能將世界上先進的高科技產(chǎn)品推薦給國內從事生物學領域科研的老師和同仁。作為專業(yè)性的產(chǎn)品供應商,公司出資存?zhèn)淞舜罅楷F(xiàn)貨,配合優(yōu)秀的銷售隊伍以及專業(yè)的技術支持,隨時為客戶提供服務。









會員登錄

×

請輸入賬號

請輸入密碼

=

請輸驗證碼

收藏該商鋪

X
該信息已收藏!
標簽:
保存成功

(空格分隔,最多3個,單個標簽最多10個字符)

常用:

提示

X
您的留言已提交成功!我們將在第一時間回復您~
撥打電話
在線留言
临沭县| 深泽县| 盐津县| 新民市| 山西省| 花莲市| 洛浦县| 定日县| 桃园县| 德阳市| 淄博市| 齐齐哈尔市| 二手房| 渝中区| 石狮市| 尖扎县| 新蔡县| 稻城县| 平谷区| 新巴尔虎右旗| 山阴县| 淄博市| 泌阳县| 乐至县| 禄丰县| 娱乐| 汝南县| 中山市| 奉节县| 千阳县| 古交市| 石嘴山市| 华阴市| 壤塘县| 黄冈市| 乌海市| 石嘴山市| 贺州市| 榆树市| 远安县| 乌什县|