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細(xì)胞中液泡系活體染色

時(shí)間:2023/1/12閱讀:1667
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簡(jiǎn)介

細(xì)胞中液泡系活體染色實(shí)驗(yàn)是利用中性紅(neutrol red)是液泡系的專一性活體染色劑的特性,在細(xì)胞處于生活狀態(tài)時(shí),只將液泡系染成紅色,細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核不被染色。

原理

細(xì)胞中液泡系活體染色實(shí)驗(yàn)的基本原理是動(dòng)物細(xì)胞內(nèi)由單層膜包裹的小泡都屬于液泡系,包括高爾基復(fù)合體、溶酶體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、轉(zhuǎn)運(yùn)泡、吞噬泡等。軟骨細(xì)胞內(nèi)含有較多的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和發(fā)達(dá)的高爾基復(fù)合體,能合成與分泌軟骨黏蛋白及膠原纖維等,因而液泡系發(fā)達(dá)。中性紅(neutrol red)是液泡系的專一性活體染色劑,在細(xì)胞處于生活狀態(tài)時(shí),只將液泡系染成紅色,細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核不被染色。

材料與儀器

器材:
解剖器材、蠟盤、載玻片、蓋片、吸管、吸水濾紙、普通光學(xué)顯微鏡、蟾蜍。
試劑:

① 1/3000 中性紅;

② 0.65% Ringer 液(兩棲動(dòng)物用)(氯化鈉,0.65 g;氯-化-鉀,0.042 g;氯化鈣,0.025 g;蒸餾水,100 ml。)

步驟

細(xì)胞中液泡系活體染色實(shí)驗(yàn)的基本過(guò)程可分為如下幾步:
A 取蟾蜍 1 只,搗毀脊髓法處死,將其腹面朝上固定于蠟盤上,剪開(kāi)腹腔,取胸骨劍突軟骨最薄部分的一小片,置于載片上。
B 滴加 1/3000 中性紅,染色 15 min。
C 濾紙吸去染液。
D 滴加 0.65% Ringer 液,蓋上蓋片,用濾紙從蓋片側(cè)面吸取多余液體。
E 鏡下觀察。

注意事項(xiàng)

1 為便于觀察,在取胸骨劍突時(shí),盡量取較薄部位。

2 本實(shí)驗(yàn)因是活體染色,在實(shí)驗(yàn)的整個(gè)過(guò)程中,應(yīng)注意保持標(biāo)本的活體狀態(tài),特別在取材時(shí)應(yīng)做到準(zhǔn)確、快速。


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安培生物科技有限公司介紹:

安培生物堅(jiān)持為生命科學(xué)研究、活體動(dòng)物轉(zhuǎn)染、大規(guī)模生物生產(chǎn)、基因和細(xì)胞治療領(lǐng)域客戶,提供*細(xì)胞體內(nèi)可代謝的核酸轉(zhuǎn)染試劑;inviCELL™Platelet lysate無(wú)動(dòng)物血清產(chǎn)品旨在支持廣泛的細(xì)胞擴(kuò)增和生產(chǎn),包括培養(yǎng)間充質(zhì)干細(xì)胞和多種免疫細(xì)胞系等,為制藥公司或者生物技術(shù)公司提供無(wú)血清細(xì)胞培養(yǎng)規(guī)模生產(chǎn)服務(wù);提供以植物生物為平臺(tái)基因序列全人源化、*的細(xì)胞培養(yǎng)可分解3D基質(zhì)膠產(chǎn)品;提供內(nèi)毒素≦ 1.0 EU/mL、對(duì)細(xì)胞無(wú)毒性影響、高純度的一型膠原蛋白產(chǎn)品。安培生物專注為生物醫(yī)藥領(lǐng)域提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品和技術(shù)服務(wù),努力發(fā)展為基因治療、細(xì)胞治療的生物科技企業(yè)。



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