常聽到一些新手同學(xué)養(yǎng)細(xì)胞，自己總是經(jīng)歷失望-絕望-希望的過(guò)程，現(xiàn)在為了方便一些新手同學(xué)養(yǎng)好細(xì)胞。把幾點(diǎn)注意問(wèn)題跟大家分享一下，希望能夠?qū)π率謧兩杂袔椭?/p>

1. 細(xì)胞不要過(guò)度消化，有些貼壁不牢的如293T，加入胰酶在臺(tái)子里晃晃就可以了，不用放到溫箱中；

2. 傳代時(shí)，細(xì)胞分的稀了或者分的不均勻，形成單細(xì)胞的克隆群，細(xì)胞就會(huì)長(zhǎng)成密密麻麻的一群，如293T會(huì)成為小方塊狀，而不是正常的不規(guī)則形狀，這時(shí)候，即使沒有長(zhǎng)滿盤，也應(yīng)該消化重新鋪板。

3. 貼壁細(xì)胞的上清看起來(lái)清亮、顏色正常時(shí)，即使在鏡下檢測(cè)有些懸浮物，一般不是污染而是死細(xì)胞，尤其是復(fù)蘇的細(xì)胞，由于有死細(xì)胞，會(huì)有很多懸浮物。（以前很多同學(xué)看到有懸浮物就以為污染了，還倒掉了好不容易借來(lái)復(fù)蘇的一盤細(xì)胞）。污染了會(huì)看到明顯的懸濁液。

4. 不能讓培養(yǎng)基變色，稍微變黃就應(yīng)該傳代，如果沒有長(zhǎng)滿，可以換液，但是如果變黃了，細(xì)胞就會(huì)皺縮，或者死亡，大批量的浮起來(lái)。這時(shí)候就別挽救了。

5. 關(guān)于污染，很多新手剛開始做的時(shí)候，無(wú)論怎么小心，還是會(huì)莫名其妙的污染。這個(gè)咱們說(shuō)是人生必經(jīng)階段。到現(xiàn)在我也還是很贊同這個(gè)理論。所以，絕望后別放棄才會(huì)有希望！

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