細胞侵襲也是與轉移密不可分的。那么今天要分享的是最為常用的細胞侵襲方法：Transwell侵襲實驗。與細胞劃痕實驗相比，Transwell相對過程復雜一些，下面就一起看看腫瘤細胞Transwell侵襲實驗吧！
首先，為了對腫瘤侵襲和轉移有更加清晰的理解，我們先來了解一下，腫瘤細胞轉移的過程，主要包括以下5個過程：原位侵襲（Local invasion），腫瘤細胞內滲（Intravasation），循環(huán)系統(tǒng)存活（Survival in thecirculation），腫瘤細胞外滲（Extravasation），形成轉移灶（Micrometastasis formation）等。其中細胞侵襲便發(fā)生在第一步，即腫瘤細胞在原位突破基底膜，然后內滲進入血管、淋巴管的過程，后期才開始進行轉移。Trans可譯為轉移，穿過，而well則為小室的意思。外形如同一個小杯子（如下圖），杯底有通透性的膜（孔徑0.1－12.0µm，細胞侵襲一般用8.0、12.0μm）。Transwell原理簡單來說，就是將Transwell小室放入培養(yǎng)板中，并將高營養(yǎng)液與低營養(yǎng)液用一層膜隔開，并在膜上室鋪基質膠，用來模擬體內細胞外基質。腫瘤細胞放在低營養(yǎng)液中，為了獲得更多的營養(yǎng)吃的更飽，這些細胞需先分泌基質金屬蛋白酶（MMPs）將基質膠降解，才能穿過這層膜，進入高營養(yǎng)液，最后通過計數下室的細胞量即可反映腫瘤細胞的侵襲能力。細胞Transwell實驗，可作為一種非常簡便的研究腫瘤細胞遷移、侵襲以及轉移情況的方法。這里所謂的“貼壁"是指細胞穿過膜后，可以附著在膜的下室側而不會掉到下室里面去?？梢酝ㄟ^給細胞染色（如結晶紫染色、臺盼藍染色、Giemsa染色、蘇木精染色、伊紅染色），在鏡下計數細胞。由于某些細胞自身的原因或某些膜的關系，有時細胞在穿過膜后不能附著在膜上，而是掉進下室。這種情況下可以收集下層培養(yǎng)液，用流式細胞儀計數細胞量，也可用細胞計數的方法直接在鏡下計數。間接計數法主要用于穿過細胞過多，而無法通過計數獲得準確的細胞數所采用的方法，通過標記、染色處理（例如MTT法、熒光試劑檢測、結晶紫檢測）后，測量OD值或熒光值，間接反映細胞數量。文章中出現的Transwell侵襲實驗圖一般是這樣的：（小tips：NC 即Negative control，表示陰性對照，siRNA上期剛說過，大家還記得嗎？文章中大家可能還會遇到MOCK組，其實就是空白對照。所謂的空白對照有兩種：一種是什么也不處理，類似陰性對照組；一種是只加轉染試劑，不加轉染的質?；蛘遱iRNA，類似假手術組）這張圖表示的是NC組（對照組）細胞侵襲少于siRNA組（沉默某基因的表達），可以理解為沉默某基因后，可以促進HGC-27細胞的侵襲。當然，這張圖是比較簡單的，復雜一點的無非就是條件多了，數據多了，大家只要理清楚細胞侵襲實驗的原理，知道圖是怎么做出來的，對應著圖注都可以很輕松的理解圖所表達的意思。
以上就是本期的內容，更多資訊，歡迎點擊安培生物網站鏈接了解更多技術與產品資訊。
安培生物科技有限公司介紹：
安培生物堅持為生命科學研究、活體動物轉染、大規(guī)模生物生產、基因和細胞治療領域客戶，提供*細胞體內可代謝的核酸轉染試劑；inviCELL™Platelet lysate無動物血清產品旨在支持廣泛的細胞擴增和生產，包括培養(yǎng)間充質干細胞和多種免疫細胞系等，為制藥公司或者生物技術公司提供無血清細胞培養(yǎng)規(guī)模生產服務；提供以植物生物為平臺基因序列全人源化、*的細胞培養(yǎng)可分解3D基質膠產品；提供內毒素≦ 1.0 EU/mL、對細胞無毒性影響、高純度的一型膠原蛋白產品。安培生物專注為生物醫(yī)藥領域提供優(yōu)質的產品和技術服務，努力發(fā)展為基因治療、細胞治療的生物科技企業(yè)。
