您好, 歡迎來(lái)到化工儀器網(wǎng)！ 登錄| 免費(fèi)注冊(cè)| 產(chǎn)品展廳| 收藏商鋪|
您好, 歡迎來(lái)到化工儀器網(wǎng)！ 登錄| 免費(fèi)注冊(cè)| 產(chǎn)品展廳| 收藏商鋪|
19126518388
當(dāng)前位置：深圳市安培生物科技有限公司>>技術(shù)文章>>如何從擬南芥菜中分離葉綠體？
葉組織
研磨懸浮緩沖液
燒杯 Polytron 勻漿器
1. 組織勻漿
(1) 收集 10 g 葉組織，放進(jìn)一 400 ml 的燒杯中。
(2) 加入 200 ml 冰冷的研磨懸浮緩沖液。在 4℃ 的房間中，用 Polytron 勻漿器進(jìn)行 6~7 個(gè) 3 秒鐘脈沖勻漿葉組織。
研磨重懸緩沖液：
10 mmol/L EDTA
50 mmol/L HEPES-KOH，pH 8.0
0.33 mol/L 甘露醇
0.5 g/L BSA ( 無(wú)脂肪酸）
5 mmol/L 抗壞血酸鹽（用前添加）
(3) 用網(wǎng)層米拉布（Calbiochem) 過(guò)濾勻漿，濾液倒進(jìn) 4 個(gè) 50 ml 離心管中。
2. 勻漿在 8000 g（Sorvall HB-4 轉(zhuǎn)頭，7000 r/min）離心一分鐘。
3. 小心地傾去上清。加 1 ml 1x SH。用駝毛刷重新懸浮葉綠體，動(dòng)作要輕。
4. 吸 2 ml 含 35% Pecoll 的 1x SH 到一個(gè) 15 ml 的離心管中作為緩沖層：其上覆蓋重懸浮的葉綠體。13000 g（Sorvall HB-4 轉(zhuǎn)頭，10000 r/min）離心 3 分鐘。
5. 棄去上清，沉淀用 15 ml 1x SH 洗兩次，再用適當(dāng)體積的 1x SH 重新懸浮。
請(qǐng)輸入賬號(hào)
請(qǐng)輸入密碼
請(qǐng)輸驗(yàn)證碼
以上信息由企業(yè)自行提供，信息內(nèi)容的真實(shí)性、準(zhǔn)確性和合法性由相關(guān)企業(yè)負(fù)責(zé)，化工儀器網(wǎng)對(duì)此不承擔(dān)任何保證責(zé)任。
溫馨提示：為規(guī)避購(gòu)買風(fēng)險(xiǎn)，建議您在購(gòu)買產(chǎn)品前務(wù)必確認(rèn)供應(yīng)商資質(zhì)及產(chǎn)品質(zhì)量。
