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冰凍切片和石蠟切片各自的優(yōu)劣之處
1、從一抗的選擇方面來看。有的一抗既能做石蠟切片又能做冰凍切片,而有的一抗只能做冰凍切片,關(guān)鍵取決于所要檢測(cè)的抗原穩(wěn)定性,有的抗原不穩(wěn)定,經(jīng)過組織固定,脫水、透明、浸蠟、包埋、脫蠟等一系列的做石蠟切片的步驟,所檢測(cè)的抗原易被破壞,這時(shí)只能用冰凍切片來做,檢測(cè)這類抗原的一抗只能做冰凍切片,而那些穩(wěn)定的抗原,能經(jīng)受住石蠟切片的的考驗(yàn),一般來講也可以用冰凍切片來做,總得來講,對(duì)于既可以用冰凍切片也可以用石蠟切片檢測(cè)的抗原,用石蠟切片檢測(cè)的染色效果要比冰凍切片好一些。
2、從研究目的來看。石蠟切片對(duì)組織細(xì)胞的定位很準(zhǔn)確,而長(zhǎng)期凍存組織的冰凍切片可能因冰晶的形成破壞組織細(xì)胞形態(tài)的結(jié)構(gòu),并造成抗原的彌散,從而定位不準(zhǔn)確。
3、從抗原的保真性來看。冰凍切片對(duì)抗原的保真很好,而石蠟切片在組織固定,脫水、透明、浸蠟、包埋、脫蠟等過程中可能會(huì)對(duì)抗原的性質(zhì)造成影響。
4、從操作步驟的繁瑣程度看。染色過程冰凍切片簡(jiǎn)單,而石蠟切片要求脫蠟入水、抗原修復(fù)等過程,比較繁瑣。
5、總之,石蠟切片對(duì)標(biāo)本的長(zhǎng)期保存較合適,且組織細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)保持好;而冰凍切片適合對(duì)新鮮組織的制片,然后立即固定、染色效果較好,且免疫熒光中可以相對(duì)避免石蠟自發(fā)熒光的干擾。
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