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當(dāng)前位置:深圳市安培生物科技有限公司>>技術(shù)文章>>細(xì)胞實(shí)驗(yàn)需要準(zhǔn)備些什么?
1. 常用的吸量管有:
奧氏吸量管、移液管、刻度吸量管
2. 如何正確使用吸量管?
答:(1) 選用原則:就近原則
(2) 吸量管的使用:吸-擦-調(diào)-放
3. 如何正確使用微量加樣器?
答:轉(zhuǎn)-按-吸-擦-按
4. 如何正確使用離心機(jī)?
放置-裝管-平衡-啟動(dòng)-取出
5. 細(xì)胞培養(yǎng)必需設(shè)備有哪些?
答:細(xì)胞培養(yǎng)必需設(shè)備有超凈工作臺(tái)、CO2培養(yǎng)箱、倒置顯微鏡、液氮生物容器、壓力蒸汽消毒器、無(wú)菌過(guò)濾器、電熱干燥箱、離心機(jī)、細(xì)胞計(jì)數(shù)板和冰箱等。
6. 無(wú)菌操作技術(shù)包括哪些內(nèi)容?
答:1. 保持安靜、整潔的無(wú)菌工作區(qū)域; 2. 保持干凈整潔的工作面; 3. 注意個(gè)人衛(wèi)生;4. 在潔凈工作臺(tái)內(nèi)無(wú)菌操作
7.實(shí)驗(yàn)一般貼壁細(xì)胞的傳代培養(yǎng)
7.1.何謂貼壁細(xì)胞?
答:貼壁細(xì)胞又稱錨著依賴性細(xì)胞,是指賴于貼附在培養(yǎng)器皿表面生長(zhǎng)的細(xì)胞,大多數(shù)培養(yǎng)細(xì)胞屬于此類。細(xì)胞附著或貼附于底物表面上,呈現(xiàn)出極性細(xì)胞的典型形態(tài)過(guò)程,稱為貼壁。貼壁是貼附類細(xì)胞生長(zhǎng)增殖的條件之一。
7.2. 貼壁細(xì)胞的傳代培養(yǎng)的實(shí)驗(yàn)原理是什么?
答:細(xì)胞的貼壁是通過(guò)特異的細(xì)胞表面受體與細(xì)胞外基質(zhì)分子結(jié)合而實(shí)現(xiàn)的,細(xì)胞在鋪展之前,細(xì)胞已分泌了細(xì)胞外基質(zhì)和蛋白聚糖。細(xì)胞外基質(zhì)先粘著在帶電荷的培養(yǎng)基質(zhì)上,然后,細(xì)胞再通過(guò)特異的受體附著到基質(zhì)上。蛋白酶可消化細(xì)胞外基質(zhì),甚至通過(guò)降解跨膜蛋白的胞外區(qū)使單層培養(yǎng)的貼壁細(xì)胞彼此分離。上皮細(xì)胞一般不易解離,因?yàn)樗鼈兺ㄟ^(guò)緊密連
接復(fù)合體使細(xì)胞結(jié)合在一起;間充質(zhì)間結(jié)合則更多地依賴基質(zhì)的作用,因此容易分離。
8.細(xì)胞的計(jì)數(shù)方法是什么?
n/4*104 *稀釋倍數(shù)
9.怎樣鑒別死、活細(xì)胞?
臺(tái)盼藍(lán)染色法。
10. 怎樣進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)?
答:低倍鏡下按一定方向逐格計(jì)數(shù)板內(nèi)四個(gè)角的每格大格中的呈透亮的細(xì)胞數(shù)。若細(xì)胞正好壓在格線上,則按數(shù)上不數(shù)下、數(shù)左不數(shù)右的原則計(jì)數(shù)。
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