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| 應用領域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,生物產(chǎn)業(yè) |
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小鼠胚胎成骨細胞MC3T3-E1 種屬鑒定
MC3T3-E1是一種小鼠胚胎成骨細胞前體細胞，源自C57BL/6品系的胚胎小鼠顱骨。這種細胞具有分化成為成骨細胞和骨細胞的能力，并能在體外形成鈣化的骨組織。MC3T3-E1細胞系有多個亞克隆株，是研究成骨細胞分化、骨細胞生物學、骨代謝和骨肉瘤等疾病的理想材料，尤其適合研究胞外基質(zhì)（ECM）信號通路的作用。細胞形態(tài)呈成纖維細胞樣，貼壁生長，培養(yǎng)條件為5%CO2和37℃，常用培養(yǎng)液配方為MEMα培養(yǎng)基含核苷和GlutaMAX添加劑，添加10%胎牛血清FBS。傳代周期約為3-4天，傳代比例通常為1:3，換液頻率為每2-3天一次。MC3T3-E1細胞在科研中廣泛應用，用于骨質(zhì)疏松癥、骨肉瘤、牙齒發(fā)育和骨組織工程等領域的研究。細胞檢測結(jié)果顯示，MC3T3-E1不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等污染。
| 小鼠胚胎成骨細胞MC3T3-E1 | |
| l 細胞鑒定 | 種屬鑒定已通過 |
| l 細胞來源 | 國家資源庫 |
| l 細胞背景 | 從胚胎/胎兒 C57BL/6 小鼠的顱骨建立；文獻中描述的分化為成骨細胞并產(chǎn)生膠原蛋白。該細胞有多個亞克隆，可以作為體外研究成骨細胞分化的良好模型。 |
| l 培養(yǎng)條件： | 1） 準備MEMα（推薦awcell-0003）培養(yǎng)基；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%；雙抗，1%。 2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。 |
| l 注意事項：
| 對于貼壁細胞傳代可以參考以下方法： 1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。 2. 加入0.25％（w / v）胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘（難消化的細胞可以適當延長消化時間），然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10?S的培養(yǎng)基來終止消化。 3.輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照說明書要求配置的新的*培養(yǎng)基以保持細胞的生長活力，后續(xù)傳代根據(jù)實際情況按1:2~1:5的比例進行。 3）細胞凍存: 收到細胞后建議在培養(yǎng)前3代時凍存一批細胞種子以備后續(xù)實驗使用。 |
| l 運輸形式： | 低溫：（1）1mL凍存管包裝干冰運輸，收到后-80度冰箱保存過夜后轉(zhuǎn)入液氮或直接復蘇，若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染，請立即與我們聯(lián)系。 常溫（2） T25瓶復蘇的存活細胞常溫發(fā)貨，收到后按照細胞接收后的處理方法操作。 |
| l 生物安全 | 1. 所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級生物安全臺內(nèi)操作，并請注意防護，所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。 2. 建議在復蘇凍存細胞時始終使用防護手套、衣服和戴上防護面罩。注意：凍存管浸沒在液氮中會泄漏，并會慢慢充滿液氮。解凍時，液氮轉(zhuǎn)化成氣相可能導致容器爆炸或用危險力吹掉其蓋子，從而產(chǎn)生飛揚的碎屑造成人員傷害。 |
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