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默克密理博Amicon Ultra-15超濾管  UFC900396

使用注意事項

（1）選擇合適的超濾管。通常應(yīng)截留分子量不應(yīng)大于目的蛋白分子量的1/3，比如目的蛋白分子量為35kDa，就可以選擇10kDa截留分子量的超濾管。若目的蛋白分子量為10kD左右，則可以用截留分子量3kD的超濾管。認真閱讀使用說明書，注意超濾膜對各種化學物質(zhì)的耐受程度有所不同。
（2）新買來的超濾是干燥的，使用前加入超純水，水量*過膜，冰浴或冰箱里預(yù)冷幾分鐘。然后將水倒出，即可加入蛋白液，加入的多少，以不超過管頂?shù)陌拙€為準。操作要輕，加入蛋白液前，超濾管需要插在冰上預(yù)冷。
（3）平衡。質(zhì)量和重心二者都要達到平衡。注意轉(zhuǎn)速和加速度不可太快，否則直接損壞超濾膜。開始離心超濾（離心機預(yù)冷至4度）。不同離心機的轉(zhuǎn)速 rpm換算成g之后，有所不同。離心機的加速度調(diào)至zui低檔，減小對膜的壓力。注意，一定要等離心機達到目的轉(zhuǎn)速之后，方可離開離心機，否則離心機出問題時，無法*時間處理。膜與轉(zhuǎn)軸的方向根據(jù)說明書調(diào)整（角轉(zhuǎn)離心機的情況是膜與軸垂直）。在實際使用中，一般轉(zhuǎn)速開的比說明書里的要低，這樣可以延長離心管的使用壽命。
（4）當濃縮到剩下1ml時，取50ul緩沖溶液，加入10ul流穿，看有沒變藍色，以此判斷超濾管是否漏掉蛋白。如果管漏了，將上層和流穿重新倒入新管中開始超濾。要精確判斷是否漏管，用5mgml的BSA離心10min，再取流穿，跑蛋白膠或Bradford粗測，繼續(xù)加入剩下的蛋白液濃縮（在冰上操作，防止蛋白受熱），直到所有濃縮液都加完為止。離心過程中注意是否發(fā)生蛋白沉淀，導致堵管。若發(fā)生沉淀，要確定沉淀的具體原因，是蛋白濃度過高還是Buffer不合適；前者可用多根超濾管同時超濾，降低濃度的辦法解決，后者的方法是換不同的緩沖溶液，直到蛋白不發(fā)生沉淀為止。
（5）前面幾步用以濃縮蛋白，如果要換Buffer，在總蛋白液濃縮至1ml左右的時候，輕輕加入新的Buffer（經(jīng)0.22um超濾膜超濾），再 濃縮至1ml左右，連續(xù)三次，zui后一次的濃縮終體積根據(jù)需要的蛋白濃度而定，一般不多于500ul，也有濃縮至200ul以內(nèi)的情況。按照每次至少10倍左右的體積濃縮算，三次達到1000倍以上，基本上可以達到換buffer的目的。

應(yīng)用
濃縮含有抗原、抗體、酶、核酸（單株或雙株DNA/RNA樣本）、微生物、洗出液和凈化樣本
的生物樣本
凈化組織培養(yǎng)基提取液和細胞溶解液中的大分子成分，從反應(yīng)混合液中去除引物、連接或
分子標記，在HPLC之前去除蛋白質(zhì)
除鹽、更換緩沖液或滲濾

所提供的材料
Amicon? Ultra-4裝置包括一個蓋子、一個過濾器和一個離心管。

所需設(shè)備
帶有擺桶式或定角式轉(zhuǎn)子的離心器以及可以容納17 mm × 124 mm 15 mL錐底試管的
樣本腔/試管座
注意： 為了避免在離心過程中損壞裝置，在旋轉(zhuǎn)前請檢查間隙。
帶有200微升（μL）*的移液管，用于濃縮液回收

適用性
為確保對預(yù)定用途的適用性，建議進行初步的回收和截留試驗。 請參見“如何量化回收"
部分。

裝置儲存與保質(zhì)期
儲存在15–30 °C下。保質(zhì)期自生產(chǎn)之日起3年。密理博3KD超濾管UFC900396

Amicon Ultra系列離心超濾管，可用于生物樣品純化、蛋白質(zhì)濃縮、脫鹽和緩沖液更換，垂直結(jié)構(gòu)的膜減少了濃差極化，快速離心并可直接吸取回收樣本，濃縮倍數(shù)高達80-100 倍，是樣本處理的得力助手。
超濾管分為0.5ml、4ml、15ml三種上樣體積，并有3kd、10kd、30kd、50kd、100kd五種截留分子量。
默克密理博Amicon Ultra-15超濾管  UFC900396

產(chǎn)品訂購信息：
Amicon Ultra-0.5系列（貨號：UFC500396、UFC501096、UFC503096、UFC505096、UFC510096）
Amicon Ultra-4系列（貨號：UFC800396、UFC801096、UFC803096、UFC805096、UFC810096）
Amicon Ultra-15系列（貨號：UFC900396、UFC901096、UFC903096、UFC905096、UFC910096）