一、常見(jiàn)的分光光度計(jì)的用途 (1)可見(jiàn)分光光度計(jì)
用來(lái)測(cè)量待測(cè)物質(zhì)對(duì)可見(jiàn)光(400~760nm)的吸光度并進(jìn)行定量分析的儀器,稱(chēng)為可見(jiàn)分光光度計(jì)??稍?00nm測(cè)定細(xì)菌細(xì)胞密度。
(2)紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)
紫外可見(jiàn)光譜儀用來(lái)測(cè)量待測(cè)物質(zhì)對(duì)可見(jiàn)光或紫外光(200~760nm)的吸光度并進(jìn)行定量分析的儀器。可以測(cè)定核酸和蛋白的濃度,也可以測(cè)定細(xì)菌細(xì)胞密度,紫外分光光度計(jì)又可分為單光束,假雙光束,雙光束。它們的用途又有區(qū)別。
單光束:適于在給定波長(zhǎng)處測(cè)量吸光度或透光度,一般不能作全波段光譜掃描,要求光源和檢測(cè)器具有很高的穩(wěn)定性。
雙光束:自動(dòng)記錄,快速全波段掃描??上庠床环€(wěn)定、檢測(cè)器靈敏度變化等因素的影響,特別適合于結(jié)構(gòu)分析。儀器復(fù)雜,價(jià)格較高。
假雙光束也就是比例雙光束,它的原理是由同一單色器發(fā)出的光被分成兩束,一束直接到達(dá)檢測(cè)器,另一束通過(guò)樣品后到達(dá)另一個(gè)檢測(cè)器。這種儀器的優(yōu)點(diǎn)是可以監(jiān)測(cè)光源變化帶來(lái)的誤差,但是并不能消除參比造成的影響。
(3)紅外分光光度計(jì)
一般的紅外光譜是指大于760nm的紅外光譜,這是研究有機(jī)化合物常用的光譜區(qū)域,能分析各種狀態(tài)(氣、液、固)的試樣,紅外光譜法的特點(diǎn)是:快速、樣品量少(幾微克-幾毫克),特征性強(qiáng)(各種物質(zhì)有其特定的紅外光譜圖)、能分析各種狀態(tài)(氣、液、固)的試樣以及不破壞樣品。
(4)熒光分光光度計(jì)
熒光分光光度計(jì)是用于掃描液相熒光標(biāo)記物所發(fā)出的熒光光譜的一種儀器,應(yīng)用于科研、化工、醫(yī)藥、生化、環(huán)保以及臨床檢驗(yàn)、食品檢驗(yàn)、教學(xué)實(shí)驗(yàn)等領(lǐng)域,通過(guò)對(duì)這些參數(shù)的測(cè)定,不但可以做一般的定量分析,而且還可以推斷分子在各種環(huán)境下的構(gòu)象變化,從而闡明分子結(jié)構(gòu)與功能之間的關(guān)系。
(5)原子吸收分光光度計(jì)
主要適用樣品中微量及痕量組分分析常規(guī)儀器之一,是材料分析及質(zhì)量控制部門(mén)進(jìn)行常量、微量金屬(半金屬)元素分析的有力工具。
二、分光光度計(jì)注意事項(xiàng)
(1)分光光度計(jì)應(yīng)放在干燥的房間內(nèi),使用時(shí)放置在堅(jiān)固平穩(wěn)的工作臺(tái)上,室內(nèi)照明不宜太強(qiáng)。熱天時(shí)不能用電扇直接向儀器吹風(fēng),防止燈泡燈絲發(fā)亮不穩(wěn)定。
(2)分光光度計(jì)使用前,使用者應(yīng)該首先了解本儀器的結(jié)構(gòu)和工作原理,以及各個(gè)操縱旋鈕之功能。在未按通電源之前,應(yīng)該對(duì)儀器的安全性能進(jìn)行檢查,電源接線(xiàn)應(yīng)牢固,通電也要良好,各個(gè)調(diào)節(jié)旋鈕的起始位置應(yīng)該正確,然后再按通電源開(kāi)關(guān)。
(3)分光光度計(jì)在儀器尚未接通電源時(shí),電表指針必須于“0”刻線(xiàn)上,若不是這種情況,則可以用電表上的校正螺絲進(jìn)行調(diào)節(jié)。
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