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NCI-H2126人肺癌細(xì)胞
細(xì)胞介紹
人肺癌細(xì)胞,腺癌,非小細(xì)胞肺癌,來源于胸腔積液轉(zhuǎn)移灶。
細(xì)胞特性
來源:人,男性,65 歲 肺
形態(tài):上皮細(xì)胞樣,貼壁生長。
含量:>1x10^6 細(xì)胞數(shù)
規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝
用途:僅供科研使用。
NCI-H2126人肺癌細(xì)胞
運輸和保存
干冰運輸及復(fù)蘇好存活細(xì)胞
(1)1mL凍存管包裝干冰運輸,收到后-80度冰箱保存過夜后轉(zhuǎn)入液氮或直接復(fù)蘇,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染,請立即與我們聯(lián)系。
(2)T25瓶復(fù)蘇的存活細(xì)胞常溫發(fā)貨,收到后按照細(xì)胞接收后的處理方法操作。
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1) 準(zhǔn)備RPMI-1640(推薦0002)培養(yǎng)基;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%;2mM L-谷氨酰胺;1mM丙酮酸鈉;雙抗,1%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
參考傳代周期:4-6 天 參考換液頻率:每周 2 次
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。
二.細(xì)胞處理:
1) 凍存細(xì)胞的復(fù)蘇:
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入到含4-6mL*培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,*培養(yǎng)基重懸細(xì)胞。然后將細(xì)胞懸液加入含6-8ml*培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶(或皿)中37℃培養(yǎng)過夜。第二天顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況和細(xì)胞密度。
2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。