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原代細(xì)胞你了解多少呢
原代細(xì)胞(primary culture cell)是指從機(jī)體取出后立即培養(yǎng)的細(xì)胞。有人把培養(yǎng)的*1代細(xì)胞與傳10代以內(nèi)的細(xì)胞統(tǒng)稱為原代細(xì)胞培養(yǎng)。原代細(xì)胞不僅廣泛應(yīng)用于分子、細(xì)胞生物學(xué)和生物醫(yī)學(xué)基礎(chǔ)研究，如蛋白質(zhì)組學(xué)、基因組學(xué)、細(xì)胞株(系)研究、DNA，RNA和遺傳學(xué)研究等，還可應(yīng)用于生物醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)如藥物篩選、藥物代謝和毒理研究、癌癥藥物的研究等。
原代細(xì)胞的培養(yǎng)是指直接從機(jī)體取下細(xì)胞、組織和器官后立即進(jìn)行培養(yǎng)。因此，較為嚴(yán)格地說(shuō)是指成功傳代之前的培養(yǎng)，此時(shí)的細(xì)胞保持原有細(xì)胞的基本性質(zhì)，如果是正常細(xì)胞，仍然保留二倍體數(shù)。但實(shí)際上，通常把第一代至第十代以內(nèi)的培養(yǎng)細(xì)胞統(tǒng)稱為原代細(xì)胞培養(yǎng)。
適當(dāng)分離的原代細(xì)胞應(yīng)具有低傳代和穩(wěn)定性，具有高活力、轉(zhuǎn)染效率和加倍。分離后，這些細(xì)胞可以被膨脹、冷凍、記錄和測(cè)試。研究人員可以從許多人類和動(dòng)物細(xì)胞類型中進(jìn)行選擇，有不同的大小和包裝配置，包括新鮮分離、培養(yǎng)、增殖或低溫保存的細(xì)胞。凍存管、微孔板、燒瓶或易于使用的總試劑盒提供了進(jìn)一步的選擇。組織和細(xì)胞也可以從同一供體中匹配地分離出來(lái)。
原代細(xì)胞與體內(nèi)原組織在形態(tài)結(jié)構(gòu)和功能活動(dòng)上相似性大。由于培養(yǎng)的細(xì)胞剛剛從活體組織分離出來(lái)，故更接近于生物體內(nèi)的生活狀態(tài)。這一方法可為研究生物體細(xì)胞的生長(zhǎng)、代謝、繁殖提供有力的手段。同時(shí)也為以后傳代培養(yǎng)創(chuàng)造條件。
原代培養(yǎng)的過(guò)程指動(dòng)物的組織或器官?gòu)臋C(jī)體取出后，經(jīng)機(jī)械法或各種酶類(常用胰蛋白酶)和鰲合劑(常用EDTA)處理，使之分散成單個(gè)細(xì)胞，加入適量培養(yǎng)基，置于合適的培養(yǎng)容器中，在無(wú)菌、適當(dāng)溫度和一定條件下，使之生存、生長(zhǎng)和繁殖的過(guò)程。