人真皮纖維原細胞提取于成人皮膚組織,原代凍存。每管含有細胞數(shù)>5×105cells/ml,此細胞通過Fibronectin免疫熒光染色驗證,經(jīng)測試不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌。細胞可以達到15倍增。
成纖維細胞是來源于中胚層的一種間充質(zhì)細胞。它被廣泛應用于細胞和分子生物學的研究。這主要是因為它是一種較容易培養(yǎng)的,耐受性較好的細胞,可應用于基因轉(zhuǎn)染、顯微注射等多種操作?,F(xiàn)已證明不同部位的成纖維細胞有著本質(zhì)的不同,組織里的成纖維細胞處于一種動態(tài)的平衡之中,這種平衡影響著健康,以及已愈合軟組織的結(jié)構完整性。成纖維細胞分泌一種非剛性細胞外基質(zhì),其中含有I型和III型膠原質(zhì)。此外真皮纖維細胞在炎癥刺激下還能分泌大量透明質(zhì)酸。在創(chuàng)傷愈合過程中,真皮成纖維細胞從遷移、再生表型轉(zhuǎn)變?yōu)榭墒湛s、基質(zhì)聚集表型。
人真皮成纖維細胞分離自真皮組織;真皮,位于表皮深層,向下與皮下組織相連,真皮結(jié)締組織的膠原纖維和彈性纖維互相交織在一起,埋于基質(zhì)內(nèi)。其內(nèi)分布著各種結(jié)締組織細胞和大量的膠原纖維彈性纖維,使皮膚既有彈性,又有韌性。其由兩層組成——乳頭層與網(wǎng)狀層。真皮的結(jié)構組成是膠原蛋白、彈性纖維以及基質(zhì)。
成纖維細胞(Fibroblast)是疏松結(jié)締組織的主要細胞成分,由胚胎時期的間充質(zhì)細胞分化而來。成纖維細胞較大,輪廓清楚,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構,其細胞核呈規(guī)則的卵圓形,核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛,細胞質(zhì)嗜弱堿性,具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動,在一定條件下,它可以實現(xiàn)跟纖維細胞的互相轉(zhuǎn)化;成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復有著十分重要的作用。
剛分離的真皮成纖維細胞呈圓形、折光性良好,懸浮于培養(yǎng)基中。30min細胞貼壁,其中部分開始伸出偽足,表現(xiàn)為小的突起;6h后細胞基本貼壁完全,伸展成梭形,胞核清晰,分布較均勻,散在生長,不聚集成團;細胞生長迅速,5-7天即呈融合狀態(tài),細胞排列緊密,有的交叉重疊生長,平坦、胞體較大,細胞質(zhì)透明,細胞核較大,呈橢圓形,顏色淡。
細胞融合,并彼此連接成網(wǎng)狀;細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。真皮成纖維細胞在生理條件下的主要功能包括:構造和維持組織的正常形態(tài),合成和釋放細胞外基質(zhì)以及組織損傷后及時大量聚集修復損傷組織。