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SNP-M194-小鼠視網(wǎng)膜muller細(xì)胞
  • SNP-M194-小鼠視網(wǎng)膜muller細(xì)胞

貨物所在地:湖北武漢市

地: 武漢東湖高新區(qū)高新大道光谷生物

更新時(shí)間:2024-08-06 21:00:06

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尚恩生物依托國際化的*技術(shù)及多年專業(yè)化的原代細(xì)胞分離培養(yǎng)經(jīng)驗(yàn),能夠?yàn)槟峁└咂焚|(zhì)的原代細(xì)胞、原代細(xì)胞提取物定制服務(wù)。集結(jié)豐富經(jīng)驗(yàn)的人才,并配備了整套實(shí)驗(yàn)設(shè)備,全程自主研發(fā),嚴(yán)控開發(fā)流程,保障產(chǎn)品質(zhì)量,緊抓售后服務(wù),可以提供高質(zhì)量的小鼠視網(wǎng)膜muller細(xì)胞。已與國內(nèi)外多家科研單位、藥企、以及醫(yī)院等建立了良好的合作關(guān)系,成為生物醫(yī)藥行業(yè)的誠信伙伴和堅(jiān)強(qiáng)后盾。

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一、細(xì)胞基本屬性

貨號(hào):SNP-M194

產(chǎn)品名稱:小鼠視網(wǎng)膜muller細(xì)胞

物種:小鼠

組織來源:視網(wǎng)膜組織

細(xì)胞簡介:該細(xì)胞分離自視網(wǎng)膜組織;視網(wǎng)膜居于眼球壁的內(nèi)層,是一層透明的薄膜。視網(wǎng)膜由色素上皮層和視網(wǎng)膜感覺層組成,兩層間在病理情況下可分開,稱為視網(wǎng)膜脫離。色素上皮層與脈絡(luò)膜緊密相連,由色素上皮細(xì)胞組成,它們具有支持和營養(yǎng)光感受器細(xì)胞、遮光、散熱以及再生和修復(fù)等作用。組織學(xué)上視網(wǎng)膜分為10層,由外向內(nèi)分別為:色素上皮層、視錐、視桿細(xì)胞層、外界膜、外顆粒層、外叢狀層、內(nèi)顆粒層、內(nèi)叢狀層、神經(jīng)節(jié)細(xì)胞層、神經(jīng)纖維層、內(nèi)界膜。視網(wǎng)膜內(nèi)層為襯于血管膜內(nèi)面的一層薄膜,有感光作用;后部鼻側(cè)有一視神經(jīng)乳頭。視網(wǎng)膜上的感覺層是由三個(gè)神經(jīng)元組成。第一神經(jīng)元是視細(xì)胞層,專司感光,它包括錐細(xì)胞和桿細(xì)胞。視桿細(xì)胞主要在離中心凹較遠(yuǎn)的視網(wǎng)膜上,而視錐細(xì)胞則在中心凹處最多。第二層叫雙節(jié)細(xì)胞,約有10到數(shù)百個(gè)視細(xì)胞通過雙節(jié)細(xì)胞與一個(gè)神經(jīng)節(jié)細(xì)胞相聯(lián)系,負(fù)責(zé)聯(lián)絡(luò)作用。第三層叫節(jié)細(xì)胞層,專管傳導(dǎo)。視網(wǎng)膜是一層菲薄的但又非常復(fù)雜的結(jié)構(gòu),它貼于眼球的后壁部,傳遞來自視網(wǎng)膜感受器沖動(dòng)的神經(jīng)纖維跨越視網(wǎng)膜表面,經(jīng)由視神經(jīng)到達(dá)出口。視網(wǎng)膜的分辨力是不均勻的,在黃斑區(qū),其分辨能力*。視網(wǎng)膜Muller細(xì)胞作為視網(wǎng)膜中的主要膠質(zhì)細(xì)胞,大約占視網(wǎng)膜膠質(zhì)細(xì)胞的90%,因而在視網(wǎng)膜疾病中起著何種作用也受到越來越多的關(guān)注。在超微結(jié)構(gòu)水平上,Muller細(xì)胞的胞質(zhì)似乎比臨近的其他細(xì)胞更高的電子密度,更發(fā)達(dá)的內(nèi)質(zhì)網(wǎng),細(xì)胞核是典型的卵圓形或多角形。但在不同物種中或同一物種中的不同部位,Muller細(xì)胞形態(tài)也會(huì)有所差異的。視網(wǎng)膜Muller細(xì)胞是一種特化的神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞,不僅具有維持視網(wǎng)膜的正常結(jié)構(gòu)和功能的作用,并調(diào)制視網(wǎng)膜神經(jīng)元活動(dòng),還能參與多種病理過程,尤其是眼底增殖性病變,如增生性玻璃體視網(wǎng)膜病變、增生性糖尿病視網(wǎng)膜病變等,體外培養(yǎng)Muller細(xì)胞是研究這些增殖性病變途徑之一。

方法簡介:采用膠原酶消化法和胰蛋白酶反復(fù)消化法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10^5cells/瓶。

配套體系:膠質(zhì)體系

發(fā)貨形式:T25瓶(1×106左右)

規(guī)格:5×10^5cells/T25瓶

培養(yǎng)條件:具體培養(yǎng)條件詳詢尚恩生物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)專員

培養(yǎng)環(huán)境:37℃,5%二氧化碳

我們推薦使用尚恩生物小鼠視網(wǎng)膜muller細(xì)胞專用*培養(yǎng)基(產(chǎn)品貨號(hào):SNPM-M194)作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。


二、細(xì)胞培養(yǎng)操作

換液周期2-3天
培養(yǎng)基體積T25瓶10-12ml;10cm皿12-15ml
傳代比例1:2-1:4(具體情況視細(xì)胞生長速度及密度決定)
傳代方法1.盡量吸干凈T25瓶原培養(yǎng)基;
2.加3-4ml 常溫PBS輕輕潤洗細(xì)胞10-20s,吸走潤洗的PBS;
3.T25瓶加1ml左右胰酶,輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)瓶以使胰酶鋪勻瓶底細(xì)胞層;
4.將培養(yǎng)瓶放入37度培養(yǎng)箱消化;
5.消化到細(xì)胞間隙變大,但未*脫落時(shí)加2-3ml*培養(yǎng)基終止胰酶消化;
6.混勻細(xì)胞,900rpm離心3-5min,棄上清;
7.加新的*培養(yǎng)基輕輕重懸細(xì)胞,均勻分到新的培養(yǎng)瓶里;
8.補(bǔ)足*培養(yǎng)基,將培養(yǎng)瓶放回培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng);
注意事項(xiàng)不同品牌胰酶消化時(shí)間差別較大,注意嚴(yán)格控制消化時(shí)間

消化傳代細(xì)胞時(shí)吹打細(xì)胞注意盡量輕柔,不要產(chǎn)生過多氣泡以免影響細(xì)胞狀態(tài)。


三、細(xì)胞凍存操作
凍存液配方92%FBS+8%DMSO(新手推薦)或92%*培養(yǎng)基+8%DMSO(高手推薦);
凍存規(guī)格200-300萬/ml,1ml每管
凍存方法1.消化并離心獲得細(xì)胞沉淀后,加配置好的凍存液輕輕重懸細(xì)胞;
2.將細(xì)胞懸液盡快移入已經(jīng)做好標(biāo)記的凍存管;
3.將凍存管轉(zhuǎn)入程序凍存盒,放入-80度冰箱過夜,第二天轉(zhuǎn)入液氮保存;沒有程序凍存盒的實(shí)驗(yàn)室,加入細(xì)胞后可以將凍存管放在泡沫盒中4度靜置5-10min,再-20度靜置2h后轉(zhuǎn)入-80度過夜,第二天轉(zhuǎn)入液氮保存

注意事項(xiàng)凍存細(xì)胞轉(zhuǎn)入液氮后及時(shí)復(fù)蘇一管檢查細(xì)胞凍存活性,若有異常,及時(shí)調(diào)整實(shí)驗(yàn)方案


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