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SNP-M178-小鼠骺軟骨細胞
  • SNP-M178-小鼠骺軟骨細胞

貨物所在地:湖北武漢市

地: 武漢東湖高新區(qū)高新大道光谷生物

更新時間:2024-08-05 21:00:06

瀏覽次數(shù):48

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尚恩生物依托國際化的*技術及多年專業(yè)化的原代細胞分離培養(yǎng)經(jīng)驗,能夠為您提供高品質(zhì)的原代細胞、原代細胞提取物定制服務。集結(jié)豐富經(jīng)驗的人才,并配備了整套實驗設備,全程自主研發(fā),嚴控開發(fā)流程,保障產(chǎn)品質(zhì)量,緊抓售后服務,可以提供高質(zhì)量的小鼠骺軟骨細胞。已與國內(nèi)外多家科研單位、藥企、以及醫(yī)院等建立了良好的合作關系,成為生物醫(yī)藥行業(yè)的誠信伙伴和堅強后盾。

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一、細胞基本屬性

貨號:SNP-M178

產(chǎn)品名稱:小鼠骺軟骨細胞

物種:小鼠

組織來源:生長板組織

細胞簡介:該細胞分離自骨骺生長板;骨骺生長板位于長骨兩端骨骺和骨干之間的軟骨組織,其中的骺軟骨細胞可分裂、成熟、肥大,最終被骨組織所替換,對于長骨生長具有重要作用。幼稚的骺軟骨細胞位于軟骨組織的表層,單個分布、體積較小、呈橢圓形,長軸與軟骨表面平行,越向深層的骺軟骨細胞體積之間增大呈圓形,細胞核圓形或卵圓形,染色淺,細胞質(zhì)弱嗜堿性,常見數(shù)量不一的脂滴。成熟的骺軟骨細胞多2-8個成群分布于軟骨陷窩內(nèi),這些骺軟骨細胞由同一個母細胞分裂增殖而成,稱為同源細胞群。電鏡下,骺軟骨細胞有突起和皺褶,細胞質(zhì)內(nèi)有大量的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和發(fā)達的高爾基復合體及少量的線粒體。在組織切片中,骺軟骨細胞收縮為不規(guī)則形,在軟骨囊和細胞之間出現(xiàn)較大的腔隙。體外培養(yǎng)的骺軟骨細胞對于研究其生理功能、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義。

方法簡介:采用膠原酶-中性蛋白酶聯(lián)合消化并軟骨細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細胞總量約為5×10^5cells/瓶。

配套體系:軟骨體系

發(fā)貨形式:T25瓶(1×106左右)

規(guī)格:5×10^5cells/T25瓶

培養(yǎng)條件:具體培養(yǎng)條件詳詢尚恩生物細胞培養(yǎng)技術專員

培養(yǎng)環(huán)境:37℃,5%二氧化碳

我們推薦使用尚恩生物小鼠骺軟骨細胞專用*培養(yǎng)基(產(chǎn)品貨號:SNPM-M178)作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。


二、細胞培養(yǎng)操作

換液周期2-3天
培養(yǎng)基體積T25瓶10-12ml;10cm皿12-15ml
傳代比例1:2-1:4(具體情況視細胞生長速度及密度決定)
傳代方法1.盡量吸干凈T25瓶原培養(yǎng)基;
2.加3-4ml 常溫PBS輕輕潤洗細胞10-20s,吸走潤洗的PBS;
3.T25瓶加1ml左右胰酶,輕輕晃動培養(yǎng)瓶以使胰酶鋪勻瓶底細胞層;
4.將培養(yǎng)瓶放入37度培養(yǎng)箱消化;
5.消化到細胞間隙變大,但未*脫落時加2-3ml*培養(yǎng)基終止胰酶消化;
6.混勻細胞,900rpm離心3-5min,棄上清;
7.加新的*培養(yǎng)基輕輕重懸細胞,均勻分到新的培養(yǎng)瓶里;
8.補足*培養(yǎng)基,將培養(yǎng)瓶放回培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng);
注意事項不同品牌胰酶消化時間差別較大,注意嚴格控制消化時間

消化傳代細胞時吹打細胞注意盡量輕柔,不要產(chǎn)生過多氣泡以免影響細胞狀態(tài)。


三、細胞凍存操作
凍存液配方92%FBS+8%DMSO(新手推薦)或92%*培養(yǎng)基+8%DMSO(高手推薦);
凍存規(guī)格200-300萬/ml,1ml每管
凍存方法1.消化并離心獲得細胞沉淀后,加配置好的凍存液輕輕重懸細胞;
2.將細胞懸液盡快移入已經(jīng)做好標記的凍存管;
3.將凍存管轉(zhuǎn)入程序凍存盒,放入-80度冰箱過夜,第二天轉(zhuǎn)入液氮保存;沒有程序凍存盒的實驗室,加入細胞后可以將凍存管放在泡沫盒中4度靜置5-10min,再-20度靜置2h后轉(zhuǎn)入-80度過夜,第二天轉(zhuǎn)入液氮保存

注意事項凍存細胞轉(zhuǎn)入液氮后及時復蘇一管檢查細胞凍存活性,若有異常,及時調(diào)整實驗方案


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