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SNP-M116-小鼠海綿體內(nèi)皮細(xì)胞
  • SNP-M116-小鼠海綿體內(nèi)皮細(xì)胞

貨物所在地:湖北武漢市

地: 武漢東湖高新區(qū)高新大道光谷生物

更新時間:2024-08-02 21:00:07

瀏覽次數(shù):56

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尚恩生物依托國際化的*技術(shù)及多年專業(yè)化的原代細(xì)胞分離培養(yǎng)經(jīng)驗,能夠為您提供高品質(zhì)的原代細(xì)胞、原代細(xì)胞提取物定制服務(wù)。集結(jié)豐富經(jīng)驗的人才,并配備了整套實驗設(shè)備,全程自主研發(fā),嚴(yán)控開發(fā)流程,保障產(chǎn)品質(zhì)量,緊抓售后服務(wù),可以提供高質(zhì)量的小鼠海綿體內(nèi)皮細(xì)胞。已與國內(nèi)外多家科研單位、藥企、以及醫(yī)院等建立了良好的合作關(guān)系,成為生物醫(yī)藥行業(yè)的誠信伙伴和堅強后盾。

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---尚恩生物 ---

一、細(xì)胞基本屬性

貨號:SNP-M116

產(chǎn)品名稱:小鼠海綿體內(nèi)皮細(xì)胞

物種:小鼠

組織來源:海綿體組織

細(xì)胞簡介:該細(xì)胞分離自海綿體組織;海綿體是由海綿狀的小梁和腔隙構(gòu)成的血竇結(jié)構(gòu),它主要包括海綿體內(nèi)皮細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞和成纖維細(xì)胞3種細(xì)胞成分。其中平滑肌細(xì)胞和成纖維細(xì)胞鑲嵌于海綿體細(xì)胞外基質(zhì)的膠原中,而海綿體內(nèi)皮細(xì)胞則覆蓋于海綿體血竇的腔面,僅占海綿體組織的2.8%。在消化海綿體組織時,膠原酶的作用主要是松解海綿體內(nèi)皮細(xì)胞與基膜的聯(lián)系,破壞海綿體內(nèi)皮細(xì)胞間的緊密連接。如果消化時間延長或膠原酶濃度過大,平滑肌細(xì)胞和成纖維細(xì)胞也將被消化下來,從而影響海綿體內(nèi)皮細(xì)胞的純度。因此,比較篩選合適的膠原酶濃度和消化時間是成功分離海綿體內(nèi)皮細(xì)胞的關(guān)鍵。

方法簡介:采用混合酶消化法結(jié)合機械分離法、并用內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細(xì)胞總量約為5×10^5cells/瓶。

配套體系:內(nèi)皮體系

發(fā)貨形式:T25瓶(1×106左右)

規(guī)格:5×10^5cells/T25瓶

培養(yǎng)條件:具體培養(yǎng)條件詳詢尚恩生物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)專員

培養(yǎng)環(huán)境:37℃,5%二氧化碳

我們推薦使用尚恩生物小鼠海綿體內(nèi)皮細(xì)胞專用*培養(yǎng)基(產(chǎn)品貨號:SNPM-M116)作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。


二、細(xì)胞培養(yǎng)操作

換液周期2-3天
培養(yǎng)基體積T25瓶10-12ml;10cm皿12-15ml
傳代比例1:2-1:4(具體情況視細(xì)胞生長速度及密度決定)
傳代方法1.盡量吸干凈T25瓶原培養(yǎng)基;
2.加3-4ml 常溫PBS輕輕潤洗細(xì)胞10-20s,吸走潤洗的PBS;
3.T25瓶加1ml左右胰酶,輕輕晃動培養(yǎng)瓶以使胰酶鋪勻瓶底細(xì)胞層;
4.將培養(yǎng)瓶放入37度培養(yǎng)箱消化;
5.消化到細(xì)胞間隙變大,但未*脫落時加2-3ml*培養(yǎng)基終止胰酶消化;
6.混勻細(xì)胞,900rpm離心3-5min,棄上清;
7.加新的*培養(yǎng)基輕輕重懸細(xì)胞,均勻分到新的培養(yǎng)瓶里;
8.補足*培養(yǎng)基,將培養(yǎng)瓶放回培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng);
注意事項不同品牌胰酶消化時間差別較大,注意嚴(yán)格控制消化時間

消化傳代細(xì)胞時吹打細(xì)胞注意盡量輕柔,不要產(chǎn)生過多氣泡以免影響細(xì)胞狀態(tài)。


三、細(xì)胞凍存操作
凍存液配方92%FBS+8%DMSO(新手推薦)或92%*培養(yǎng)基+8%DMSO(高手推薦);
凍存規(guī)格200-300萬/ml,1ml每管
凍存方法1.消化并離心獲得細(xì)胞沉淀后,加配置好的凍存液輕輕重懸細(xì)胞;
2.將細(xì)胞懸液盡快移入已經(jīng)做好標(biāo)記的凍存管;
3.將凍存管轉(zhuǎn)入程序凍存盒,放入-80度冰箱過夜,第二天轉(zhuǎn)入液氮保存;沒有程序凍存盒的實驗室,加入細(xì)胞后可以將凍存管放在泡沫盒中4度靜置5-10min,再-20度靜置2h后轉(zhuǎn)入-80度過夜,第二天轉(zhuǎn)入液氮保存

注意事項凍存細(xì)胞轉(zhuǎn)入液氮后及時復(fù)蘇一管檢查細(xì)胞凍存活性,若有異常,及時調(diào)整實驗方案


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