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SNP-R002-大鼠肺大動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞
  • SNP-R002-大鼠肺大動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞

貨物所在地:湖北武漢市

地: 武漢東湖高新區(qū)高新大道光谷生物

更新時(shí)間:2024-07-07 21:00:06

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細(xì)胞名稱(chēng):大鼠肺大動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞
細(xì)胞貨號(hào):SNP-R002
細(xì)胞種屬:大鼠
生長(zhǎng)情況:貼壁
本公司提取的內(nèi)皮細(xì)胞經(jīng)過(guò)酶消化法處理,貼壁培養(yǎng)后使用內(nèi)皮細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選而得,經(jīng)CD31免疫熒光檢測(cè),細(xì)胞純度90%以上,細(xì)胞活性良好,且不含細(xì)菌、真菌、支原體、HIV-1、HBV、HCV等污染。

尚恩生物.jpg

---尚恩生物 ---

一、細(xì)胞基本屬性

貨號(hào):SNP-R002

產(chǎn)品名稱(chēng):大鼠肺大動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞

物種:大鼠

組織來(lái)源:肺

發(fā)貨形式:T25瓶(1×106左右)

細(xì)胞簡(jiǎn)介:大鼠肺大動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞分離自肺大動(dòng)脈組織;肺大動(dòng)脈亦稱(chēng)肺動(dòng)脈干。在呼吸空氣的脊椎動(dòng)物中,把靜脈血由心臟導(dǎo)向肺臟的動(dòng)脈。肺大動(dòng)脈起于右心室,在主動(dòng)脈之前向左上后方斜行,在主動(dòng)脈弓下方分為左、右肺動(dòng)脈,經(jīng)肺門(mén)入肺。肺動(dòng)脈干位于心包內(nèi),為一粗短的動(dòng)脈干。起自右心室,在升主動(dòng)脈前方向左后上方斜行,至主動(dòng)脈弓下方分為左、右肺動(dòng)脈。左肺動(dòng)脈較短,在左主支氣管前方橫行,分二支進(jìn)入左肺上、下葉。右肺動(dòng)脈較長(zhǎng)而粗,經(jīng)升主動(dòng)脈和上腔靜脈后方向右橫行,至右肺門(mén)處分為三支進(jìn)入右肺上、中、下葉。肺大動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞是肺血管的重要結(jié)構(gòu)細(xì)胞之一,在調(diào)控肺血管的收縮和舒張功能中有重要作用。肺大動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞原代分離培養(yǎng)3天后,可見(jiàn)細(xì)胞貼壁伸展,細(xì)胞形態(tài)大小不一,呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形,核卵圓形、居中;2周后細(xì)胞匯合,多數(shù)細(xì)胞伸展呈長(zhǎng)梭形,胞漿豐富,有分枝狀突起,細(xì)胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長(zhǎng),高低起伏;細(xì)胞密度低時(shí),常交織成網(wǎng)狀;密度高時(shí),則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細(xì)胞生長(zhǎng)較快,4-6天即可匯合,并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長(zhǎng)特點(diǎn)。肺大動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞的異常是肺動(dòng)脈高壓發(fā)生發(fā)展的重要病理學(xué)特征,其凋亡和增殖失衡是肺血管重塑的關(guān)鍵。研究表明,急性和慢性缺氧均可導(dǎo)致肺動(dòng)脈高壓,即缺氧性肺動(dòng)脈高壓,推斷缺氧可能是通過(guò)促進(jìn)肺大動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞的增殖而參與缺氧性肺動(dòng)脈高壓的發(fā)生發(fā)展。肺大動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞主要功能:①細(xì)胞表面表達(dá)介質(zhì)(ICAM-1和VCAM-1)參與血管壁炎癥反應(yīng);②是多數(shù)重要?jiǎng)用}疾病的靶細(xì)胞。肺大動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞與主要病生理變化:①平滑肌增生易致肺動(dòng)脈高壓;②先天性肺動(dòng)脈狹窄;③肺動(dòng)脈栓塞。

培養(yǎng)條件:具體培養(yǎng)條件詳詢(xún)尚恩生物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)專(zhuān)員

培養(yǎng)環(huán)境:37℃,5%二氧化碳


二、細(xì)胞培養(yǎng)操作

換液周期2-3天
培養(yǎng)基體積T25瓶10-12ml;10cm皿12-15ml
傳代比例1:2-1:4(具體情況視細(xì)胞生長(zhǎng)速度及密度決定)
傳代方法1.盡量吸干凈T25瓶原培養(yǎng)基;
2.加3-4ml 常溫PBS輕輕潤(rùn)洗細(xì)胞10-20s,吸走潤(rùn)洗的PBS;
3.T25瓶加1ml左右胰酶,輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)瓶以使胰酶鋪勻瓶底細(xì)胞層;
4.將培養(yǎng)瓶放入37度培養(yǎng)箱消化;
5.消化到細(xì)胞間隙變大,但未*脫落時(shí)加2-3ml*培養(yǎng)基終止胰酶消化;
6.混勻細(xì)胞,900rpm離心3-5min,棄上清;
7.加新的*培養(yǎng)基輕輕重懸細(xì)胞,均勻分到新的培養(yǎng)瓶里;
8.補(bǔ)足*培養(yǎng)基,將培養(yǎng)瓶放回培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng);
注意事項(xiàng)不同品牌胰酶消化時(shí)間差別較大,注意嚴(yán)格控制消化時(shí)間

消化傳代細(xì)胞時(shí)吹打細(xì)胞注意盡量輕柔,不要產(chǎn)生過(guò)多氣泡以免影響細(xì)胞狀態(tài)。


三、細(xì)胞凍存操作
凍存液配方92%FBS+8%DMSO(新手推薦)或92%*培養(yǎng)基+8%DMSO(高手推薦);
凍存規(guī)格200-300萬(wàn)/ml,1ml每管
凍存方法1.消化并離心獲得細(xì)胞沉淀后,加配置好的凍存液輕輕重懸細(xì)胞;
2.將細(xì)胞懸液盡快移入已經(jīng)做好標(biāo)記的凍存管;
3.將凍存管轉(zhuǎn)入程序凍存盒,放入-80度冰箱過(guò)夜,第二天轉(zhuǎn)入液氮保存;沒(méi)有程序凍存盒的實(shí)驗(yàn)室,加入細(xì)胞后可以將凍存管放在泡沫盒中4度靜置5-10min,再-20度靜置2h后轉(zhuǎn)入-80度過(guò)夜,第二天轉(zhuǎn)入液氮保存

注意事項(xiàng)凍存細(xì)胞轉(zhuǎn)入液氮后及時(shí)復(fù)蘇一管檢查細(xì)胞凍存活性,若有異常,及時(shí)調(diào)整實(shí)驗(yàn)方案


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等.....




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