尚恩生物致力于為廣大藥物研發(fā),疫苗研發(fā)企業(yè),醫(yī)院,高校等科研機(jī)構(gòu)工作者提供常用實驗細(xì)胞系、腫瘤細(xì)胞、正常細(xì)胞、耐藥細(xì)胞、細(xì)胞株等。傳代次數(shù)5代以內(nèi),代次低,狀態(tài)好,活性高。選擇尚恩生物Ana-1(小鼠巨噬細(xì)胞)享受進(jìn)口品質(zhì),國產(chǎn)價格,性價比*。細(xì)胞系現(xiàn)貨發(fā)貨,并全程免費(fèi)提供專業(yè)的技術(shù)指導(dǎo),保您售后無憂。
一、細(xì)胞基本屬性
細(xì)胞名稱:Ana-1(小鼠巨噬細(xì)胞)
細(xì)胞別稱:Ana-1; ANA1
細(xì)胞貨號:SNL-020
細(xì)胞種屬:小鼠
生長情況:懸浮
培養(yǎng)條件:1640+10%FBS+1%雙抗
培養(yǎng)環(huán)境:air, 95%; carbon dioxide (CO2), 5%
二、細(xì)胞培養(yǎng)操作
換液周期:2-3天
培養(yǎng)基體積:T25瓶10-12ml;10cm皿12-15ml
傳代比例:1:2-1:4(具體情況視細(xì)胞生長速度及密度決定)
傳代方法:
1.混勻細(xì)胞,收集細(xì)胞培養(yǎng)基,900rpm離心3-5min,棄上清;
2.加新的*培養(yǎng)基輕輕重懸細(xì)胞,均勻分到新的培養(yǎng)瓶里;
3.補(bǔ)足*培養(yǎng)基,將培養(yǎng)瓶放回培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng);
注意事項:部分懸浮細(xì)胞會附著瓶底,輕輕晃動培養(yǎng)基或者吹打細(xì)胞面就會脫落,不需要胰酶消化。建議使用培養(yǎng)皿培養(yǎng),更適合吹打細(xì)胞操作,吹打細(xì)胞注意盡量輕柔,不要產(chǎn)生過多氣泡以免影響細(xì)胞狀態(tài)。
三、細(xì)胞凍存操作
凍存液配方:92%FBS+8%DMSO(新手推薦)或92%*培養(yǎng)基+8%DMSO(高手推薦);
凍存規(guī)格:200-300萬/ml,1ml每管
凍存方法:
1. 離心獲得細(xì)胞沉淀后,加配置好的凍存液輕輕重懸細(xì)胞;
2. 將細(xì)胞懸液盡快移入已經(jīng)做好標(biāo)記的凍存管;
3. 將凍存管轉(zhuǎn)入程序凍存盒,放入-80度冰箱過夜,第二天轉(zhuǎn)入液氮保存;沒有程序凍存盒的實驗室,加入細(xì)胞后可以將凍存管放在泡沫盒中4度靜置5-10min,再-20度靜置2h后轉(zhuǎn)入-80度過夜,第二天轉(zhuǎn)入液氮保存
注意事項 凍存細(xì)胞轉(zhuǎn)入液氮后及時復(fù)蘇一管檢查細(xì)胞凍存活性,若有異常,及時調(diào)整實驗方案
Tips:
1.細(xì)胞懸浮圓形生長,偶有小聚團(tuán),部分細(xì)胞附著瓶底;
2.圓形透亮、細(xì)胞膜完整的細(xì)胞是活細(xì)胞,如果無法判斷,可以取少量細(xì)胞用臺盼藍(lán)染色后計數(shù)確定細(xì)胞活率;
3.懸浮細(xì)胞密度維持1E5-5E5/ml之間,密度過低或者過高可能會影響細(xì)胞狀態(tài);
我們推薦使用尚恩生物Ana-1(小鼠巨噬細(xì)胞)*培養(yǎng)基(產(chǎn)品貨號:SNLM-020)作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。