ACHN(人腎細胞腺癌細胞):人干擾素可抑制ACHN細胞生長;ACHN細胞能用于人干擾素、干擾素誘導(dǎo)因子的抗腫瘤活性研究。
一、細胞基本屬性
細胞名稱: 人腎細胞腺癌細胞
細胞別稱 :ACHN
細胞貨號: SNL-079
細胞種屬 :人
生長情況: 貼壁
培養(yǎng)條件 :H-DMEM+10%FBS+1%雙抗
培養(yǎng)環(huán)境 :air, 95%; carbon dioxide (CO2), 5%
二、細胞培養(yǎng)操作
換液周期 :2-3天
培養(yǎng)基體積: T25瓶10-12ml;10cm皿12-15ml
傳代比例: 1:2-1:4(具體情況視細胞生長速度及密度決定)
傳代方法:
1.盡量吸干凈T25瓶原培養(yǎng)基;
2.加3-4ml 常溫PBS輕輕潤洗細胞10-20s,吸走潤洗的PBS;
3.T25瓶加1ml左右胰酶,輕輕晃動培養(yǎng)瓶以使胰酶鋪勻瓶底細胞層;
4.將培養(yǎng)瓶放入37度培養(yǎng)箱消化;
5.消化到細胞間隙變大,但未*脫落時加2-3ml*培養(yǎng)基終止胰酶消化;
6.混勻細胞,900rpm離心3-5min,棄上清;
7.加新的*培養(yǎng)基輕輕重懸細胞,均勻分到新的培養(yǎng)瓶里;
8.補足*培養(yǎng)基,將培養(yǎng)瓶放回培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng);
注意事項 :不同品牌胰酶消化時間差別較大,注意嚴(yán)格控制消化時間
消化傳代細胞時吹打細胞注意盡量輕柔,不要產(chǎn)生過多氣泡以免影響細胞狀態(tài)。
三、細胞凍存操作
凍存液配方: 92%FBS+8%DMSO(新手推薦)或92%*培養(yǎng)基+8%DMSO(高手推薦);
凍存規(guī)格: 200-300萬/ml,1ml每管
凍存方法:
1. 離心獲得細胞沉淀后,加配置好的凍存液輕輕重懸細胞;
2. 將細胞懸液盡快移入已經(jīng)做好標(biāo)記的凍存管;
3. 將凍存管轉(zhuǎn)入程序凍存盒,放入-80度冰箱過夜,第二天轉(zhuǎn)入液氮保存;沒有程序凍存盒的實驗室,加入細胞后可以將凍存管放在泡沫盒中4度靜置5-10min,再-20度靜置2h后轉(zhuǎn)入-80度過夜,第二天轉(zhuǎn)入液氮保存
注意事項: 凍存細胞轉(zhuǎn)入液氮后及時復(fù)蘇一管檢查細胞凍存活性,若有異常,及時調(diào)整實驗方案
我們推薦使用尚恩生物ACHN(人腎細胞腺癌細胞)zhuan用*培養(yǎng)基(產(chǎn)品貨號:SNLM-079)作為體外培養(yǎng)ACHN(人腎細胞腺癌細胞)的培養(yǎng)基。