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貨物所在地:湖北武漢市
所在地: 武漢市尚恩生物技術(shù)有限公司
更新時(shí)間:2024-11-13 21:00:07
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一、細(xì)胞基本屬性 | |
細(xì)胞名稱 | 昆蟲卵巢細(xì)胞 |
細(xì)胞別稱 | SF9; sf9; SF-9; Sf-9; sf-9; Sf 9; Spodoptera frugiperda clone 9; Sf clone 9; IPLB-Sf-9AE; IPLB-SF-9AE; IPLB-SF-9; IPLB-Sf-9; IPLB-Sf9 |
細(xì)胞貨號 | SNL-170 |
細(xì)胞種屬 | 草地貪夜蛾 |
生長情況 | 半貼壁 |
培養(yǎng)條件 | Grace’s Insect Medium+10%FBS+1%雙抗 |
培養(yǎng)環(huán)境 | air, *;28℃ |
二、細(xì)胞培養(yǎng)操作 | |
換液周期 | 2-3天 |
培養(yǎng)基體積 | T25瓶10-12ml;10cm皿12-15ml |
傳代比例 | 1:2-1:4(具體情況視細(xì)胞生長速度及密度決定) |
傳代方法 | 1.輕輕吸走培養(yǎng)上清,留2-3ml培養(yǎng)基輕輕吹打細(xì)胞面吹下細(xì)胞; 2.混勻細(xì)胞,收集細(xì)胞培養(yǎng)基,900rpm離心3-5min,棄上清; 3.加新的*培養(yǎng)基輕輕重懸細(xì)胞,均勻分到新的培養(yǎng)瓶里; 4.補(bǔ)足*培養(yǎng)基,將培養(yǎng)瓶放回培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng); |
注意事項(xiàng) | 半貼壁細(xì)胞會附著瓶底,但貼壁不緊,輕輕吸取培養(yǎng)基輕輕吹打細(xì)胞面就會脫落,不需要胰酶消化。建議使用培養(yǎng)皿培養(yǎng),更適合吹打細(xì)胞操作,吹打細(xì)胞注意盡量輕柔,不要產(chǎn)生過多氣泡以免影響細(xì)胞狀態(tài)。 |
三、細(xì)胞凍存操作 | |
凍存液配方 | 92%FBS+8%DMSO(新手推薦)或92%*培養(yǎng)基+8%DMSO(高手推薦); |
凍存規(guī)格 | 200-300萬/ml,1ml每管 |
凍存方法 | 1.離心獲得細(xì)胞沉淀后,加配置好的凍存液輕輕重懸細(xì)胞; 2.將細(xì)胞懸液盡快移入已經(jīng)做好標(biāo)記的凍存管; 3.將凍存管轉(zhuǎn)入程序凍存盒,放入-80度冰箱過夜,第二天轉(zhuǎn)入液氮保存;沒有程序凍存盒的實(shí)驗(yàn)室,加入細(xì)胞后可以將凍存管放在泡沫盒中4度靜置5-10min,再-20度靜置2h后轉(zhuǎn)入-80度過夜,第二天轉(zhuǎn)入液氮保存 |
注意事項(xiàng) | 凍存細(xì)胞轉(zhuǎn)入液氮后及時(shí)復(fù)蘇一管檢查細(xì)胞凍存活性,若有異常,及時(shí)調(diào)整實(shí)驗(yàn)方案 |
Tips:
1.細(xì)胞半貼壁圓形或多角形生長,部分懸浮圓形,傳代時(shí)均可收集培養(yǎng),換液時(shí)將懸浮細(xì)胞離心收集后重新接回原瓶,若貼壁細(xì)胞較多活性較好時(shí)可以不要懸浮的細(xì)胞;
2.該細(xì)胞對胰酶比較敏感,胰酶消化后細(xì)胞形態(tài)會更多梭形,貼壁變緊,傳代不建議使用胰酶消化該細(xì)胞;
3.該細(xì)胞28度培養(yǎng),建議27.5-28度之間,超過28度細(xì)胞狀態(tài)會受損無法恢復(fù),低于27度細(xì)胞生長速度會變慢,但恢復(fù)溫度后可以恢復(fù)生長。
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