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SNL-050-6T-CEM(人T細(xì)胞白血病細(xì)胞)
  • SNL-050-6T-CEM(人T細(xì)胞白血病細(xì)胞)

貨物所在地:湖北武漢市

地: 武漢市尚恩生物技術(shù)有限公司

更新時間:2024-11-13 21:00:07

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6T-CEM(人T細(xì)胞白血病細(xì)胞)是一個CCRF-CEM[CCRFCEM]的6-硫鳥嘌呤抗性變種; HPRT、HGPRT缺陷并能分泌高滴度的免疫抑制因子。6T-CEM細(xì)胞通常用作T細(xì)胞雜交瘤的融合對象。
一、細(xì)胞基本屬性
細(xì)胞名稱人T細(xì)胞白血病細(xì)胞
細(xì)胞別稱6T-CEM
細(xì)胞貨號SNL-050
細(xì)胞種屬
生長情況懸浮
培養(yǎng)條件1640+10%FBS+1%雙抗
培養(yǎng)環(huán)境air, 95%; carbon dioxide (CO2), 5%
二、細(xì)胞培養(yǎng)操作
換液周期2-3天
培養(yǎng)基體積T25瓶10-12ml;10cm皿12-15ml
傳代比例1:2-1:4(具體情況視細(xì)胞生長速度及密度決定)
傳代方法1.混勻細(xì)胞,收集細(xì)胞培養(yǎng)基,900rpm離心3-5min,棄上清;
2.加新的*培養(yǎng)基輕輕重懸細(xì)胞,均勻分到新的培養(yǎng)瓶里;
3.補(bǔ)足*培養(yǎng)基,將培養(yǎng)瓶放回培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng);
注意事項部分懸浮細(xì)胞會附著瓶底,輕輕晃動培養(yǎng)基或者吹打細(xì)胞面就會脫落,不需要胰酶消化。建議使用培養(yǎng)皿培養(yǎng),更適合吹打細(xì)胞操作,吹打細(xì)胞注意盡量輕柔,不要產(chǎn)生過多氣泡以免影響細(xì)胞狀態(tài)。
三、細(xì)胞凍存操作
凍存液配方92%FBS+8%DMSO(新手推薦)或92%*培養(yǎng)基+8%DMSO(高手推薦);
凍存規(guī)格200-300萬/ml,1ml每管
凍存方法1. 離心獲得細(xì)胞沉淀后,加配置好的凍存液輕輕重懸細(xì)胞;
2. 將細(xì)胞懸液盡快移入已經(jīng)做好標(biāo)記的凍存管;
3. 將凍存管轉(zhuǎn)入程序凍存盒,放入-80度冰箱過夜,第二天轉(zhuǎn)入液氮保存;沒有程序凍存盒的實驗室,加入細(xì)胞后可以將凍存管放在泡沫盒中4度靜置5-10min,再-20度靜置2h后轉(zhuǎn)入-80度過夜,第二天轉(zhuǎn)入液氮保存
注意事項凍存細(xì)胞轉(zhuǎn)入液氮后及時復(fù)蘇一管檢查細(xì)胞凍存活性,若有異常,及時調(diào)整實驗方案

Tips:
1.細(xì)胞懸浮圓形生長,偶有小聚團(tuán);
2.圓形透亮、細(xì)胞膜完整的細(xì)胞是活細(xì)胞,如果無法判斷,可以取少量細(xì)胞用臺盼藍(lán)染色后計數(shù)確定細(xì)胞活率;
3.懸浮細(xì)胞密度維持1E5-5E5/ml之間,密度過低或者過高可能會影響細(xì)胞狀態(tài);

我們推薦使用尚恩生物6T-CEM(人T細(xì)胞白血病細(xì)胞)zhuan用*培養(yǎng)基(產(chǎn)品貨號:SNLM-050)作為體外培養(yǎng)6T-CEM(人T細(xì)胞白血病細(xì)胞)的培養(yǎng)基。

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