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SNL-101-22RV1(人前列腺癌細(xì)胞)
  • SNL-101-22RV1(人前列腺癌細(xì)胞)

貨物所在地:湖北武漢市

地: 武漢市尚恩生物技術(shù)有限公司

更新時(shí)間:2024-11-22 21:00:06

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22RV1(人前列腺癌細(xì)胞)是來自異種移植(在閹割引起前列腺癌衰退又在其父親的雄性激素信賴型CWR22嫁接后復(fù)發(fā)的小鼠中連續(xù)傳代)的人前列腺癌上皮細(xì)胞系;22RV1細(xì)胞系表達(dá)前列腺特異抗原。二羥基睪丸脂酮輕微刺激22RV1細(xì)胞生長(zhǎng),經(jīng)Western Blot檢測(cè)溶解產(chǎn)物與抗雄性激素受體抗體起免疫反應(yīng);EGF刺激22RV1細(xì)胞生長(zhǎng),但TGFB-1不能抑制細(xì)胞生長(zhǎng);22RV1可在裸鼠中成瘤。
一、細(xì)胞基本屬性
細(xì)胞名稱人前列腺癌細(xì)胞
細(xì)胞別稱22RV1; 22Rv-1; 22rV1; CWR22-Rv1; CWR22R-V1; CWR22-R1; CWR22Rv1; CWR22R
細(xì)胞貨號(hào)SNL-101
細(xì)胞種屬
生長(zhǎng)情況貼壁
培養(yǎng)條件1640+10%FBS+1%雙抗
培養(yǎng)環(huán)境air, 95%; carbon dioxide (CO2), 5%
二、細(xì)胞培養(yǎng)操作
換液周期2-3天
培養(yǎng)基體積T25瓶10-12ml;10cm皿12-15ml
傳代比例1:2-1:4(具體情況視細(xì)胞生長(zhǎng)速度及密度決定)
傳代方法1.盡量吸干凈T25瓶原培養(yǎng)基;
2.加3-4ml 常溫PBS輕輕潤(rùn)洗細(xì)胞10-20s,吸走潤(rùn)洗的PBS;
3.T25瓶加1ml左右胰酶,輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)瓶以使胰酶鋪勻瓶底細(xì)胞層;
4.將培養(yǎng)瓶放入37度培養(yǎng)箱消化;
5.消化到細(xì)胞間隙變大,但未*脫落時(shí)加2-3ml*培養(yǎng)基終止胰酶消化;
6.混勻細(xì)胞,900rpm離心3-5min,棄上清;
7.加新的*培養(yǎng)基輕輕重懸細(xì)胞,均勻分到新的培養(yǎng)瓶里;
8.補(bǔ)足*培養(yǎng)基,將培養(yǎng)瓶放回培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng);
注意事項(xiàng)不同品牌胰酶消化時(shí)間差別較大,注意嚴(yán)格控制消化時(shí)間
消化傳代細(xì)胞時(shí)吹打細(xì)胞注意盡量輕柔,不要產(chǎn)生過多氣泡以免影響細(xì)胞狀態(tài)。
三、細(xì)胞凍存操作
凍存液配方92%FBS+8%DMSO(新手推薦)或92%*培養(yǎng)基+8%DMSO(高手推薦);
凍存規(guī)格200-300萬(wàn)/ml,1ml每管
凍存方法1.消化并離心獲得細(xì)胞沉淀后,加配置好的凍存液輕輕重懸細(xì)胞;
2.將細(xì)胞懸液盡快移入已經(jīng)做好標(biāo)記的凍存管;
3.將凍存管轉(zhuǎn)入程序凍存盒,放入-80度冰箱過夜,第二天轉(zhuǎn)入液氮保存;沒有程序凍存盒的實(shí)驗(yàn)室,加入細(xì)胞后可以將凍存管放在泡沫盒中4度靜置5-10min,再-20度靜置2h后轉(zhuǎn)入-80度過夜,第二天轉(zhuǎn)入液氮保存
注意事項(xiàng)凍存細(xì)胞轉(zhuǎn)入液氮后及時(shí)復(fù)蘇一管檢查細(xì)胞凍存活性,若有異常,及時(shí)調(diào)整實(shí)驗(yàn)方案

Tips:
1.細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)黑點(diǎn)可能會(huì)比較多,具體原因參見培養(yǎng)操作說明2、3條;

我們推薦使用尚恩生物22RV1(人前列腺癌細(xì)胞)zhuan用*培養(yǎng)基(產(chǎn)品貨號(hào):SNLM-101)作為體外培養(yǎng)22RV1(人前列腺癌細(xì)胞)的培養(yǎng)基。

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