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大鼠腎小管上皮細(xì)胞
  • 大鼠腎小管上皮細(xì)胞
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規(guī)格

屬性

供貨周期:現(xiàn)貨 規(guī)格:T25瓶 貨號(hào):SNP-R046 應(yīng)用領(lǐng)域:生物產(chǎn)業(yè) 主要用途:實(shí)驗(yàn)

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更新時(shí)間:2023-04-20 10:57:13瀏覽次數(shù):506評(píng)價(jià)

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供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 T25瓶
貨號(hào) SNP-R046 應(yīng)用領(lǐng)域 生物產(chǎn)業(yè)
主要用途 實(shí)驗(yàn)
尚恩生物依托國(guó)際化的*技術(shù)及多年專業(yè)化的原代細(xì)胞分離培養(yǎng)經(jīng)驗(yàn),能夠?yàn)槟峁└咂焚|(zhì)的原代細(xì)胞、原代細(xì)胞提取物定制服務(wù)。集結(jié)豐富經(jīng)驗(yàn)的人才,并配備了整套實(shí)驗(yàn)設(shè)備,全程自主研發(fā),嚴(yán)控開(kāi)發(fā)流程,保障產(chǎn)品質(zhì)量,緊抓售后服務(wù),可以提供高質(zhì)量的大鼠腎小管上皮細(xì)胞。已與國(guó)內(nèi)外多家科研單位、藥企、以及醫(yī)院等建立了良好的合作關(guān)系,成為生物醫(yī)藥行業(yè)的誠(chéng)信伙伴和堅(jiān)強(qiáng)后盾。

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一、細(xì)胞基本屬性

貨號(hào):SNP-R046

產(chǎn)品名稱:大鼠腎小管上皮細(xì)胞

物種:大鼠

組織來(lái)源:腎組織

細(xì)胞簡(jiǎn)介:該細(xì)胞分離自腎組織;腎臟是機(jī)體的重要器官,它的基本功能是生成尿液,借以清除體內(nèi)代謝產(chǎn)物及某些廢物、毒物,同時(shí)經(jīng)重吸收功能保留水份及其他有用物質(zhì),如葡萄糖、蛋白質(zhì)、氨基酸、鈉離子、鉀離子、碳酸氫鈉等,以調(diào)節(jié)水、電解質(zhì)平衡及維護(hù)酸堿平衡。腎臟同時(shí)還有內(nèi)分泌功能,生成腎素、促紅細(xì)胞生成素、前列腺素、激肽等,又為機(jī)體部分內(nèi)分泌激素的降解場(chǎng)所和腎外激素的靶器官。腎臟的這些功能,保證了機(jī)體內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定,使新陳代謝得以正常進(jìn)行。腎小管是機(jī)體腎臟器官上與腎小囊壁層相連的一條細(xì)長(zhǎng)上皮性小管,具有重吸收(reabsorption)和排泌作用。腎小管按不同的形態(tài)結(jié)構(gòu)、分布位置和功能分成近端小管、髓袢和遠(yuǎn)端小管三部分;近端小管可分為直部和曲部,曲部也稱為近曲小管,位于皮質(zhì)迷路內(nèi),于腎小體附近高度蟠曲;遠(yuǎn)端小管曲部也稱為遠(yuǎn)曲小管,位于皮質(zhì)迷路內(nèi)。腎小管上皮細(xì)胞是腎小管外面的一層細(xì)胞,腎小管上皮細(xì)胞的分離、培養(yǎng)是研究腎臟疾病的一項(xiàng)重要技術(shù),目前該細(xì)胞分離方法有酶分離法、化學(xué)分離法篩網(wǎng)分離法、顯微解剖分離法、流式細(xì)胞儀分離法等。腎小管上皮細(xì)胞主要功能:①腎小管上皮細(xì)胞重吸收原尿中幾乎全部的葡萄糖和氨基酸;②排泌非營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)進(jìn)入終尿;③細(xì)胞能分泌炎癥介質(zhì)如細(xì)胞因子和趨化因子,通過(guò)產(chǎn)生IL-8或直接趨化白細(xì)胞參與急性炎癥反應(yīng);④移植腎炎癥和新月體腎炎中PTEpiC表達(dá)IL-2R和MHC-Ⅱ類抗原,這說(shuō)明腎小管上皮細(xì)胞參與腎免疫損傷的發(fā)生。隨著對(duì)腎間質(zhì)纖維化機(jī)制研究的日漸加深,腎小管上皮細(xì)胞(RTECs)在其中的作用日益被人們重視。因此,提供良好的腎小管上皮細(xì)胞模型,在腎小管間質(zhì)疾病的發(fā)病機(jī)制和治療藥物篩選的研究中是非常重要的。

方法簡(jiǎn)介:采用先機(jī)械研磨過(guò)不銹鋼網(wǎng)篩分離得到腎小管、后用膠原酶消化,結(jié)合上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10^5cells/瓶

配套體系:上皮體系

發(fā)貨形式:T25瓶(1×106左右)

規(guī)格:5×10^5cells/T25瓶

培養(yǎng)條件:具體培養(yǎng)條件詳詢尚恩生物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)專員

培養(yǎng)環(huán)境:37℃,5%二氧化碳

我們推薦使用尚恩生物大鼠腎小管上皮細(xì)胞專用*培養(yǎng)基(產(chǎn)品貨號(hào):SNP-R046)作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。


二、細(xì)胞培養(yǎng)操作

換液周期2-3天
培養(yǎng)基體積T25瓶10-12ml;10cm皿12-15ml
傳代比例1:2-1:4(具體情況視細(xì)胞生長(zhǎng)速度及密度決定)
傳代方法1.盡量吸干凈T25瓶原培養(yǎng)基
2.加3-4ml 常溫PBS輕輕潤(rùn)洗細(xì)胞10-20s,吸走潤(rùn)洗的PBS;
3.T25瓶加1ml左右,輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)瓶以使鋪勻瓶底細(xì)胞層;
4.將培養(yǎng)瓶放入37度培養(yǎng)箱消化;
5.消化到細(xì)胞間隙變大,但未*脫落時(shí)加2-3ml*培養(yǎng)基終止消化;
6.混勻細(xì)胞,900rpm離心3-5min,棄上清;
7.加新的*培養(yǎng)基輕輕重懸細(xì)胞,均勻分到新的培養(yǎng)瓶里;
8.補(bǔ)足*培養(yǎng)基,將培養(yǎng)瓶放回培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng);
注意事項(xiàng)不同品牌消化時(shí)間差別較大,注意嚴(yán)格控制消化時(shí)間

消化傳代細(xì)胞時(shí)吹打細(xì)胞注意盡量輕柔,不要產(chǎn)生過(guò)多氣泡以免影響細(xì)胞狀態(tài)。


三、細(xì)胞凍存操作
凍存液配方92%FBS+8%DMSO(新手推薦)或92%*培養(yǎng)基+8%DMSO(高手推薦);
凍存規(guī)格200-300萬(wàn)/ml,1ml每管
凍存方法1.消化并離心獲得細(xì)胞沉淀后,加配置好的凍存液輕輕重懸細(xì)胞;
2.將細(xì)胞懸液盡快移入已經(jīng)做好標(biāo)記的凍存管;
3.將凍存管轉(zhuǎn)入程序凍存盒,放入-80度冰箱過(guò)夜,第二天轉(zhuǎn)入液氮保存;沒(méi)有程序凍存盒的實(shí)驗(yàn)室,加入細(xì)胞后可以將凍存管放在泡沫盒中4度靜置5-10min,再-20度靜置2h后轉(zhuǎn)入-80度過(guò)夜,第二天轉(zhuǎn)入液氮保存

注意事項(xiàng)凍存細(xì)胞轉(zhuǎn)入液氮后及時(shí)復(fù)蘇一管檢查細(xì)胞凍存活性,若有異常,及時(shí)調(diào)整實(shí)驗(yàn)方案


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