1.實(shí)驗(yàn)原理
典型的生長(zhǎng)曲線(xiàn)即可分為潛伏期、指數(shù)生長(zhǎng)期、平頂期及退化衰老四個(gè)部分，其中的三個(gè)不同生長(zhǎng)時(shí)期（潛伏期、指數(shù)生長(zhǎng)期和平頂期）是每個(gè)細(xì)胞系所共有的特征。通過(guò)測(cè)定生長(zhǎng)曲線(xiàn),不僅可以了解培養(yǎng)細(xì)胞生物學(xué)特性的基本參數(shù)、測(cè)定細(xì)胞絕對(duì)生長(zhǎng)數(shù)、判斷細(xì)胞活力，而且也可用于測(cè)定藥物等外來(lái)因素對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)的影響。本實(shí)驗(yàn)采用計(jì)數(shù)法測(cè)定細(xì)胞生長(zhǎng)曲線(xiàn)，通過(guò)連續(xù)對(duì)細(xì)胞計(jì)數(shù)（通常為10天，一般應(yīng)每次計(jì)數(shù)3孔細(xì)胞取平均值），然后以存活細(xì)胞數(shù)對(duì)培養(yǎng)時(shí)間作圖，即得該種細(xì)胞的生長(zhǎng)曲線(xiàn)。
2.實(shí)驗(yàn)材料
①小鼠胚胎成纖維細(xì)胞或雞胚成纖維細(xì)胞,DMEM*培養(yǎng)基。
3.操作步驟
① 細(xì)胞接種濃度不能過(guò)多也不能過(guò)少，在合適的濃度下細(xì)胞在7~10天內(nèi)能長(zhǎng)滿(mǎn)而不發(fā)生生長(zhǎng)抑制；細(xì)胞數(shù)量太少，細(xì)胞適應(yīng)期太長(zhǎng)；數(shù)量太多，細(xì)胞將很快進(jìn)入增值穩(wěn)定期，在一段時(shí)間內(nèi)需進(jìn)行傳代，曲線(xiàn)不能準(zhǔn)確反映細(xì)胞生長(zhǎng)情況。同種細(xì)胞的生長(zhǎng)曲線(xiàn)先后測(cè)定要采用同一接種密度，這樣才能做縱向比較；不同的細(xì)胞也要接種細(xì)胞數(shù)相同，才能進(jìn)行比較。
② 細(xì)胞生長(zhǎng)曲線(xiàn)是觀察細(xì)胞生長(zhǎng)基本規(guī)律的重要方法。只有具備自身穩(wěn)定性生長(zhǎng)特性的細(xì)胞才適合在觀察細(xì)胞生長(zhǎng)變化的實(shí)驗(yàn)中應(yīng)用。因而在細(xì)胞系細(xì)胞和非建系細(xì)胞生長(zhǎng)特性觀察中，生長(zhǎng)曲線(xiàn)的測(cè)定是最為基本的指標(biāo)。
③ 細(xì)胞生長(zhǎng)曲線(xiàn)雖然最為常用，但有時(shí)其反映數(shù)值不夠精確，有20% ~ 30%的誤差，需結(jié)合其他指標(biāo)進(jìn)行分析。在生長(zhǎng)曲線(xiàn)上細(xì)胞數(shù)量增加1倍時(shí)間稱(chēng)為細(xì)胞倍增時(shí)間，可以從曲線(xiàn)上換算出。細(xì)胞倍增的時(shí)間區(qū)間即為細(xì)胞對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期，細(xì)胞傳代、冷凍等實(shí)驗(yàn)多應(yīng)在此區(qū)間進(jìn)行。
④ 細(xì)胞在不同培養(yǎng)液中的細(xì)胞生長(zhǎng)曲線(xiàn)和細(xì)胞倍增時(shí)間可以直接反映細(xì)胞在該種培養(yǎng)液內(nèi)的增殖速度，是對(duì)培養(yǎng)液進(jìn)行選擇的主要依據(jù)。通過(guò)個(gè)同培養(yǎng)液內(nèi)細(xì)胞生長(zhǎng)曲線(xiàn)的差異，篩選出對(duì)成纖維細(xì)胞和上皮細(xì)胞適合的培養(yǎng)液。
⑤通過(guò)對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)曲線(xiàn)的繪制，可比較不同的培養(yǎng)液對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)曲線(xiàn)變化的影響。在條件允許的情況下，分析培養(yǎng)液中添加不同的生物活性物質(zhì)（如生長(zhǎng)因子、激素等）對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)的影響，從而篩選出合適的細(xì)胞培養(yǎng)液。
產(chǎn) 品 推 薦
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公 司 簡(jiǎn) 介
武漢尚恩生物技術(shù)有限公司坐落于武漢東湖區(qū)光谷生物城，專(zhuān)注于細(xì)胞及系列產(chǎn)品的研發(fā)、生產(chǎn)和服務(wù)，公司建有標(biāo)準(zhǔn)化GMP實(shí)驗(yàn)室、動(dòng)物房，已整體通過(guò)ISO 9001:2015質(zhì)量管理體系認(rèn)證，獲得企業(yè)、3551人才、瞪羚企業(yè)、科技小巨人等多項(xiàng)榮譽(yù)?！ ?/p>
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