谷草轉(zhuǎn)氨酶（GOT）活性檢測(cè)試劑盒（可見(jiàn)分光光度法）

注意：正式測(cè)定前務(wù)必取 2-3 個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定。

產(chǎn)品貨號(hào)：BA1113

產(chǎn)品規(guī)格：50管/24樣

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

GOT（ 2.6.1.1）廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中，催化可逆轉(zhuǎn)氨基反應(yīng)，是氨基酸代謝的重要酶。此外，GOT在心肌細(xì)胞中含量最高，臨床上一般常作為心肌梗塞和心肌炎的輔助檢查。肝臟損害時(shí)其血清濃度也可升高。

GOT催化α-酮戊二酸和天門(mén)冬氨酸發(fā)生轉(zhuǎn)氨基反應(yīng)，生成谷氨酸和草酰乙酸，草酰乙酸進(jìn)一步自行脫羧生成丙酮酸；丙酮酸可與2,4-二硝基苯肼反應(yīng)生成2,4-二硝基苯腙，在堿性條件下顯棕紅色；測(cè)定505nm吸光度的變化，即可計(jì)算GOT酶活力。

產(chǎn)品內(nèi)容：

提取液：液體30mL×1瓶，4℃保存；

試劑一：液體5mL×1瓶， 4℃保存；

試劑二：液體5mL×1瓶， 4℃保存；

試劑三：液體50mL×1瓶，4℃保存。

需自備的儀器和用品：

可見(jiàn)分光光度計(jì)、水浴鍋、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1 mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。

操作步驟：

一、樣品測(cè)定的準(zhǔn)備

1.        細(xì)菌、細(xì)胞或組織樣品的制備：

細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞：先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量（10⁴個(gè)）：提取液體積（mL）為500~1000：1的比例（建議500萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL提取液），超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復(fù)30次）；8000g4℃離心10min，取上清，置冰上待測(cè)。

組織：按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱(chēng)取約0.1g組織，加入1mL提取液），進(jìn)行冰浴勻漿。8000g4℃離心10min，取上清，置冰上待測(cè)。

2.        血清（漿）樣品：直接檢測(cè)。

二、測(cè)定操作表

1.        分光光度計(jì)預(yù)熱30min以上，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至505nm，蒸餾水調(diào)零。

2.        在EP管中加入下列試劑：

三、計(jì)算：

1.        以相對(duì)吸光值（A測(cè)定管-A對(duì)照管）為橫坐標(biāo)，相應(yīng)酶活力單位（U/L）為縱坐標(biāo)。

作標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)為：y=（605.07χ2+192.86χ+0.1392）×0.482

2.        血清中GOT活力(U/L)=0.482×（605.07χ2+192.86χ+0.1392）。

χ為A測(cè)定管-A對(duì)照管。

3.        微生物、細(xì)胞或組織中GOT活力(U/g蛋白)=0.482×（605.07χ2+192.86χ+0.1392）÷待測(cè)勻漿蛋白濃度（g/L）。

χ為A測(cè)定管-A對(duì)照管。