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糜蛋白酶活性檢測(cè)試劑盒(紫外分光光度法)

參  考  價(jià):面議
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
  • 型號(hào)

    BA1212-50

  • 品牌

    其他品牌

  • 廠商性質(zhì)

    生產(chǎn)商

  • 所在地

    上海市

更新時(shí)間:2021-11-22 16:59:36瀏覽次數(shù):170次

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供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 50管/48樣
貨號(hào) BA1212-50 應(yīng)用領(lǐng)域 化工,生物產(chǎn)業(yè)
糜蛋白酶活性檢測(cè)試劑盒(紫外分光光度法)
糜蛋白酶,又稱胰凝乳蛋白酶,是胰腺分泌的一種蛋白水解酶,能迅速分解變性蛋白質(zhì)。糜蛋白酶的功能與胰蛋白酶相似,但是具有分解能力強(qiáng)、毒性低和不良反應(yīng)小等優(yōu)點(diǎn)。臨床上糜蛋白酶用于痰液稀化,對(duì)膿性和非膿性痰液均有效;也用于創(chuàng)傷或手術(shù)后傷口愈合,如白內(nèi)障摘除。

糜蛋白酶活性檢測(cè)試劑盒(紫外分光光度法)

注意:正式測(cè)定前務(wù)必取 2-3 個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定。

 

產(chǎn)品貨號(hào):BA1212

 

產(chǎn)品規(guī)格:50/48

 

產(chǎn)品說明:

糜蛋白酶,又稱胰凝乳蛋白酶,是胰腺分泌的一種蛋白水解酶,能迅速分解變性蛋白質(zhì)。糜蛋白酶的功能與胰蛋白酶相似,但是具有分解能力強(qiáng)、毒性低和不良反應(yīng)小等優(yōu)點(diǎn)。臨床上糜蛋白酶用于痰液稀化,對(duì)膿性和非膿性痰液均有效;也用于創(chuàng)傷或手術(shù)后傷口愈合,如白內(nèi)障摘除。

糜蛋白酶催化 BTEE 水解,產(chǎn)物在256nm有特征光吸收;通過測(cè)定256nm光吸收增加速率,來計(jì)算糜蛋白酶活性。

 

產(chǎn)品內(nèi)容:

提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存。

試劑一:液體25mL×1瓶,4℃保存。

試劑二:粉劑×1瓶,-20℃保存。臨用前溶于4mL甲醇中,再用水定容至25mL??煞盅b后-20保存,避免反復(fù)凍融。

試劑三:液體5mL×1瓶,4℃保存。

 

需自備的儀器和用品:

紫外分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、移液器、 1mL 石英比色皿、研缽/勻漿器、冰和蒸餾水。

 

操作步驟:

一、粗酶液提取

1)組織:按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL15-10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL試劑一

進(jìn)行冰浴勻漿。8000g,4℃離心10min,取上清即粗酶液。

2)血清(漿):直接檢測(cè)。

二、測(cè)定操作:

1.  紫外分光光度計(jì)預(yù)熱30 min以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)到256nm,蒸餾水調(diào)零。

2.  試劑一置于25℃水浴中保溫30min。

3.  操作表:

試劑名稱(μL

測(cè)定管

試劑一

450

試劑二

450

試劑三

100

樣品

100

將上述試劑分別加入1mL石英比色皿后充分混勻,于256nm處測(cè)定初始吸光值A1,然后迅速將比色皿連同反應(yīng)液放入25℃水浴鍋中水浴3min,然后迅速拿出擦干測(cè)定3min的吸光A2,計(jì)算△A=A2-A1。

三、糜蛋白酶活性計(jì)算公式:

 

(1) 按蛋白濃度計(jì)算

活性單位定義:25℃每毫克蛋白每分鐘水解1μmol BTEE為一個(gè)酶活單位。

糜蛋白酶活(U/mg prot)= (△A×V反總÷ε÷d)÷(Cpr×V)÷T=3.8×△A÷Cpr。

(2) 按樣本質(zhì)量計(jì)算

活性單位定義:25℃每克樣品每分鐘水解1μmol BTEE為一個(gè)酶活單位。

糜蛋白酶活(U/g 鮮重)=(△A×V反總÷ε÷d)÷(W×V÷V提取)÷T=3.8×△A÷W。

(3) 按血清(漿)體積計(jì)算

活性單位定義:25℃每毫升血清(漿)每分鐘水解1μmol BTEE為一個(gè)酶活單位。

糜蛋白酶活(U/mL )=(△A×V反總÷ε÷d)÷V÷T=3.8×△A

V樣:加入反應(yīng)體系中粗酶液體積,0.02mL;Cpr:粗酶液蛋白濃度,mg/mL,需要另外測(cè)定;W:樣本鮮重,g;V反總:反應(yīng)總體積,0.22 mL;V提?。杭尤胩崛∫后w積,1mL;T:反應(yīng)時(shí)間,3 min;εBTEE消光系數(shù):0.964 mL/μmol/cmd:比色皿光徑,1cm。

 

注意事項(xiàng):

1. 當(dāng)△A大于0.2或者吸光值大于1時(shí),建議將樣品稀釋后測(cè)定。

2. 當(dāng)△A小于0.03時(shí),建議將樣品濃縮或者增加樣品體積進(jìn)行測(cè)定,注意計(jì)算公式除以濃縮倍數(shù)或者改變體積。

 

 

 

 


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