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葡萄糖氧化酶(GOD)活性檢測(cè)試劑盒

參  考  價(jià):面議
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
  • 型號(hào)

    BA1245-100

  • 品牌

    其他品牌

  • 廠商性質(zhì)

    生產(chǎn)商

  • 所在地

    上海市

更新時(shí)間:2021-11-22 16:44:20瀏覽次數(shù):241次

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供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 100管/96樣
貨號(hào) BA1245-100 應(yīng)用領(lǐng)域 化工,生物產(chǎn)業(yè)
葡萄糖氧化酶(GOD)活性檢測(cè)試劑盒
GOD(EC 1.1.3.4)廣泛存在于動(dòng)物和植物中,催化葡萄糖氧化生成葡萄糖酸,并產(chǎn)生H2O2,是生物體中產(chǎn)生活性氧的代謝途徑之一。

GOD催化葡萄糖產(chǎn)生H2O2,過(guò)氧化物酶在有氧存在時(shí)催化H2O2分解產(chǎn)生的氧又將鄰聯(lián)茴香胺氧化生成有色物質(zhì),顏色深淺與葡萄糖氧化酶活性成線性關(guān)系。

葡萄糖氧化酶(GOD)活性檢測(cè)試劑盒(微量法)

注意:正式測(cè)定前務(wù)必取 2-3 個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定。

 

產(chǎn)品貨號(hào):BA1245

 

產(chǎn)品規(guī)格:100/96

                                        

產(chǎn)品簡(jiǎn)介:

GODEC 1.1.3.4)廣泛存在于動(dòng)物和植物中,催化葡萄糖氧化生成葡萄糖酸,并產(chǎn)生H2O2,是生物體中產(chǎn)生活性氧的代謝途徑之一。

GOD催化葡萄糖產(chǎn)生H2O2,過(guò)氧化物酶在有氧存在時(shí)催化H2O2分解產(chǎn)生的氧又將鄰聯(lián)茴香胺氧化生成有色物質(zhì),顏色深淺與葡萄糖氧化酶活性成線性關(guān)系。

 

產(chǎn)品內(nèi)容:

提取液:液體100mL×1瓶,4℃保存;

試劑一:液體15mL×1瓶,4℃保存;

試劑二:液體3mL×1瓶,4℃保存;

試劑三:液體1mL×1支,-20℃保存,融化后可分裝保存。

 

需自備的儀器和用品:

可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、水浴鍋、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、微量比色皿/96 孔板、研缽、冰和蒸餾水

 

操作步驟:

一、樣品測(cè)定的準(zhǔn)備

1、組織處理:稱(chēng)取約0.1g組織,加入1mL提取液進(jìn)行冰浴勻漿;8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。

2、血清(漿):直接檢測(cè)。

二、測(cè)定步驟

1、分光光度計(jì)或酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至500nm,蒸餾水調(diào)零。

2GOD工作液的配制:取15mL試劑一加3mL試劑二混勻(現(xiàn)配現(xiàn)用)。

3、加樣表:

試劑名稱(chēng)(μL

測(cè)定管

GOD工作液

174

試劑三

6

混勻,37℃(哺乳動(dòng)物)或25℃(其它物種)水浴5min

樣本

120

樣品測(cè)定前將GOD工作液與試劑三放入37℃水浴中保溫,然后將上述試劑按順序加入微量比色皿/96孔板中,加樣本的同時(shí)開(kāi)始計(jì)時(shí);在500 nm波長(zhǎng)下記錄20秒時(shí)的初始吸光度A1120秒時(shí)的吸光度A2。計(jì)算?A=A2-A1。

三、GOD活力單位的計(jì)算

a.用微量玻璃比色皿測(cè)定的計(jì)算公式如下

1、動(dòng)物組織 GOD 活力的計(jì)算

1)按蛋白濃度計(jì)算

單位的定義:每mg組織蛋白在反應(yīng)體系中每分鐘催化產(chǎn)生1µmol氧化型鄰聯(lián)茴香胺定義為一個(gè)酶活力單位。

GODU/mg prot=?A÷(ε×d)×V反總÷(Cpr×V)÷T=1333×?A÷Cpr

2)按樣本鮮重計(jì)算

單位的定義:每g組織在反應(yīng)體系中每分鐘催化產(chǎn)生1µmol氧化型鄰聯(lián)茴香胺定義為一個(gè)酶活力單位。

GODU/g鮮重)=?A÷(ε×d)×V反總÷(W÷V提取×V)÷T=1333×?A÷W

2、血清(漿)GOD 活力的計(jì)算

單位的定義:每mL血清(漿)在反應(yīng)體系中每分鐘催化產(chǎn)生1µmol 氧化型鄰聯(lián)茴香胺定義為一個(gè)酶活力單位。

GODU/mL=?A÷(ε×d)×V反總÷T÷V樣本=1333×?A

V反總:反應(yīng)總體積,0.2mL;V樣本:加入樣本體積,0.02mL;V提取,加入提取液體積,1mL;cpr:樣本蛋白濃度,mg/mL;W:樣本鮮重,gd:光徑,1cm;ε:氧化型鄰聯(lián)茴香胺消光系數(shù),7.5×10-3mL/µmol/cmT:反應(yīng)時(shí)間,1min

b.96孔板測(cè)定的計(jì)算公式如下

1、動(dòng)物組織GOD活力的計(jì)算

1)按蛋白濃度計(jì)算

單位的定義:每mg組織蛋白在反應(yīng)體系中每分鐘催化產(chǎn)生1µmol氧化型鄰聯(lián)茴香胺定義為一個(gè)酶活力單位。

GODU/mg prot=?A÷(ε×d)×V反總÷(Cpr×V)÷T=2222×?A÷Cpr

2)按樣本鮮重計(jì)算

單位的定義:每g組織在反應(yīng)體系中每分鐘催化產(chǎn)生1µmol氧化型鄰聯(lián)茴香胺定義為一個(gè)酶活力單位。

GODU/g 鮮重)=?A÷(ε×d)×V反總÷(W÷V提取×V)÷T=2222×?A÷W

2、血清(漿)GOD 活力的計(jì)算

單位的定義:每mL血清(漿)在反應(yīng)體系中每分鐘催化產(chǎn)生1µmol氧化型鄰聯(lián)茴香胺定義為一個(gè)酶活力單位。

GODU/mL=?A÷(ε×d)×V反總÷T÷V樣本=2222×?A

V反總:反應(yīng)總體積,0.2mLV樣本:加入樣本體積,0.02mLcpr:樣本蛋白濃度,mg/mLW:樣本鮮重,g;d:光徑,0.6cm;ε:氧化型鄰聯(lián)茴香胺消光系數(shù),7.5×10-3mL/µmol/cm;T:反應(yīng)時(shí)間,1min

 

注意事項(xiàng):

1、不同勻漿組織中GOD活力不一樣,做正式試驗(yàn)之前請(qǐng)做1-2只預(yù)試,若A2-A1>1, 則說(shuō)明組織活力太高,必須用提取液稀釋成適當(dāng)濃度勻漿上清液,使A2-A1<1,以提高檢測(cè)靈敏度。

實(shí)驗(yàn)過(guò)程中若出現(xiàn)A1> A2現(xiàn)象請(qǐng)將樣本用提取液稀釋成適當(dāng)濃度.

2、最好兩個(gè)人同時(shí)做此實(shí)驗(yàn),一個(gè)人比色,一個(gè)人計(jì)時(shí),以保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。

3、此試劑盒僅適用于動(dòng)物組織和動(dòng)物血清(漿)。

 


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