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BA1684
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更新時(shí)間:2021-11-22 16:30:13瀏覽次數(shù):197次
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貨號(hào) | BA1684 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工,生物產(chǎn)業(yè) |
葡萄糖檢測(cè)試劑盒(鄰甲苯胺比色法)
產(chǎn)品規(guī)格:50T/100T
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
葡萄糖(Glucose,Dextrose,Glu)又稱(chēng)玉米葡糖,簡(jiǎn)稱(chēng)葡糖,化學(xué)式C6H12O6,分子量為180.16,是自然界分布*、最重要的一種單糖,屬于多羥基醛。用酶學(xué)方法測(cè)定葡萄糖是生化檢測(cè)中的常用方法,常用的有葡萄糖氧化酶法、己糖激酶法。
葡萄糖檢測(cè)試劑盒(鄰甲苯胺比色法)檢測(cè)原理是在酸性條件下,葡萄糖醛基與鄰甲苯胺反應(yīng),產(chǎn)生希夫式堿(Schiff base),經(jīng)分子重排生成藍(lán)綠色化合物,其顏色深淺與葡萄糖濃度成正比,分光光度計(jì)505nm進(jìn)行比色測(cè)定。本試劑盒專(zhuān)門(mén)用于血清、血漿、腦脊液、清亮的胸腹水葡萄糖檢測(cè),尤其適用嚴(yán)重黃疸、溶血、乳糜樣血清樣本的葡萄糖含量定量測(cè)定。
產(chǎn)品組成:
試劑名稱(chēng) | 50T | 100T | 保存條件 |
試劑(A): Glu標(biāo)準(zhǔn)(5mmol/L) | 1ml | 2ml | -20℃,避光 |
試劑(B): 蛋白沉淀液 | 100ml | 200ml | 室溫,避光 |
試劑(C): 鄰甲苯胺顯色液 | 250ml | 500ml | 4℃,避光 |
操作步驟(僅供參考):
1、普通樣本處理:
①血清、血漿、腦脊液、清亮的胸腹水樣本:從待測(cè)樣本中分理出的血清或血漿不應(yīng)有溶血,直接檢測(cè),如超過(guò)線(xiàn)性范圍,用PBS稀釋后檢測(cè)。
②細(xì)胞樣本:
a、取適量的細(xì)胞(一般推薦>106以上),1000g離心10min,棄上清,留取沉淀。
b、用PBS清洗1~2次,1000g離心10min,棄上清,留取沉淀。
c、加入200~300μl的PBS勻漿,冰浴條件下超聲破碎細(xì)胞,間隔,重復(fù)3~5次。③組織樣本:準(zhǔn)確稱(chēng)取適量組織樣本,按質(zhì)量(g):PBS(ml)=1:9的比例,加入PBS,冰浴條件下手動(dòng)或機(jī)械勻漿。2500~3000g離心10min,取上清待用。
2、特殊樣本處理:嚴(yán)重黃疸、溶血、乳糜樣(脂濁)血清屬于特殊樣本,應(yīng)使用蛋白沉淀液以制備無(wú)蛋白濾液。
3、普通樣本Glu測(cè)定操作:
①按小表依次加樣:
加入物(ml) | 空白管 | 標(biāo)準(zhǔn)管 | 待測(cè)管 |
蒸餾水 | 0.1 | - | - |
Glu標(biāo)準(zhǔn)(5mmol/L) | - | 0.1 | - |
普通樣本 | - | - | 0.1 |
領(lǐng)甲苯胺顯色液 | 3.0 | 3.0 | 3.0 |
②充分混勻,沸水中煮沸,置于冷水中冷卻。
③分光光度計(jì)測(cè)定630波長(zhǎng)處吸光度,以空白管調(diào)零,讀取標(biāo)準(zhǔn)管和各待測(cè)管的吸光度。
4、特殊樣本Glu測(cè)定操作:
①按小表依次加樣:
加入物(ml) | 空白管 | 標(biāo)準(zhǔn)管 | 待測(cè)管 |
蛋白沉淀液 | 1.0 | 0.9 | - |
Glu標(biāo)準(zhǔn)(5mmol/L) | - | 0.1 | - |
溶血、黃疸、脂濁樣本 | - | - | 0.1 |
領(lǐng)甲苯胺顯色液 | 5.0 | 5.0 | 5.0 |
②充分混勻,沸水中煮沸,置于冷水中冷卻。
③分光光度計(jì)測(cè)定630波長(zhǎng)處吸光度,以空白管調(diào)零,讀取標(biāo)準(zhǔn)管和各待測(cè)管的吸光度。
計(jì)算:
葡萄糖(mmol/L)=(測(cè)定管吸光度/標(biāo)準(zhǔn)管吸光度)×5mmol/L
參考區(qū)間:
健康成年人空腹葡萄糖:3.89~6.11mmol/L(70~110mg/dl)
備注:Glu標(biāo)準(zhǔn)(5mmol/L)=90mg/dl
注意事項(xiàng):
1、上述低溫試劑避免反復(fù)凍融,以免失效或效率下降。
2、待測(cè)樣本如不能及時(shí)測(cè)定,應(yīng)置于2~8℃保存,3天內(nèi)穩(wěn)定。
3、本法線(xiàn)性范圍可達(dá)25mmol/L,如果樣本葡萄糖濃度過(guò)高,結(jié)果可能呈假性降低。應(yīng)用生理鹽水稀釋后重測(cè),結(jié)果乘以稀釋倍數(shù)。
4、沸水一定要蓋過(guò)管內(nèi)的液面,否則溫度不均勻,影響顯色結(jié)果。
5、本法受比色時(shí)間、煮沸時(shí)間等因素的影響,不宜以校正曲線(xiàn)法進(jìn)行計(jì)算,每次檢測(cè)均應(yīng)同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)管。
6、最終反應(yīng)偶爾會(huì)產(chǎn)生渾濁,較常見(jiàn)原因是血液中脂肪含量過(guò)高或冷水浴溫度過(guò)低。可向3ml鄰甲苯胺顯色液中加入1.5ml異丙醇,所測(cè)系廣東乘以1.5即可。
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