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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 50T /100T |
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貨號 | BA1684 | 應用領域 | 化工,生物產業(yè) |
葡萄糖檢測試劑盒(鄰甲苯胺比色法)
產品規(guī)格:50T/100T
產品簡介:
葡萄糖(Glucose,Dextrose,Glu)又稱玉米葡糖,簡稱葡糖,化學式C6H12O6,分子量為180.16,是自然界分布*、最重要的一種單糖,屬于多羥基醛。用酶學方法測定葡萄糖是生化檢測中的常用方法,常用的有葡萄糖氧化酶法、己糖激酶法。
葡萄糖檢測試劑盒(鄰甲苯胺比色法)檢測原理是在酸性條件下,葡萄糖醛基與鄰甲苯胺反應,產生希夫式堿(Schiff base),經分子重排生成藍綠色化合物,其顏色深淺與葡萄糖濃度成正比,分光光度計505nm進行比色測定。本試劑盒專門用于血清、血漿、腦脊液、清亮的胸腹水葡萄糖檢測,尤其適用嚴重黃疸、溶血、乳糜樣血清樣本的葡萄糖含量定量測定。
產品組成:
試劑名稱 | 50T | 100T | 保存條件 |
試劑(A): Glu標準(5mmol/L) | 1ml | 2ml | -20℃,避光 |
試劑(B): 蛋白沉淀液 | 100ml | 200ml | 室溫,避光 |
試劑(C): 鄰甲苯胺顯色液 | 250ml | 500ml | 4℃,避光 |
操作步驟(僅供參考):
1、普通樣本處理:
①血清、血漿、腦脊液、清亮的胸腹水樣本:從待測樣本中分理出的血清或血漿不應有溶血,直接檢測,如超過線性范圍,用PBS稀釋后檢測。
②細胞樣本:
a、取適量的細胞(一般推薦>106以上),1000g離心10min,棄上清,留取沉淀。
b、用PBS清洗1~2次,1000g離心10min,棄上清,留取沉淀。
c、加入200~300μl的PBS勻漿,冰浴條件下超聲破碎細胞,間隔,重復3~5次。③組織樣本:準確稱取適量組織樣本,按質量(g):PBS(ml)=1:9的比例,加入PBS,冰浴條件下手動或機械勻漿。2500~3000g離心10min,取上清待用。
2、特殊樣本處理:嚴重黃疸、溶血、乳糜樣(脂濁)血清屬于特殊樣本,應使用蛋白沉淀液以制備無蛋白濾液。
3、普通樣本Glu測定操作:
①按小表依次加樣:
加入物(ml) | 空白管 | 標準管 | 待測管 |
蒸餾水 | 0.1 | - | - |
Glu標準(5mmol/L) | - | 0.1 | - |
普通樣本 | - | - | 0.1 |
領甲苯胺顯色液 | 3.0 | 3.0 | 3.0 |
②充分混勻,沸水中煮沸,置于冷水中冷卻。
③分光光度計測定630波長處吸光度,以空白管調零,讀取標準管和各待測管的吸光度。
4、特殊樣本Glu測定操作:
①按小表依次加樣:
加入物(ml) | 空白管 | 標準管 | 待測管 |
蛋白沉淀液 | 1.0 | 0.9 | - |
Glu標準(5mmol/L) | - | 0.1 | - |
溶血、黃疸、脂濁樣本 | - | - | 0.1 |
領甲苯胺顯色液 | 5.0 | 5.0 | 5.0 |
②充分混勻,沸水中煮沸,置于冷水中冷卻。
③分光光度計測定630波長處吸光度,以空白管調零,讀取標準管和各待測管的吸光度。
計算:
葡萄糖(mmol/L)=(測定管吸光度/標準管吸光度)×5mmol/L
參考區(qū)間:
健康成年人空腹葡萄糖:3.89~6.11mmol/L(70~110mg/dl)
備注:Glu標準(5mmol/L)=90mg/dl
注意事項:
1、上述低溫試劑避免反復凍融,以免失效或效率下降。
2、待測樣本如不能及時測定,應置于2~8℃保存,3天內穩(wěn)定。
3、本法線性范圍可達25mmol/L,如果樣本葡萄糖濃度過高,結果可能呈假性降低。應用生理鹽水稀釋后重測,結果乘以稀釋倍數。
4、沸水一定要蓋過管內的液面,否則溫度不均勻,影響顯色結果。
5、本法受比色時間、煮沸時間等因素的影響,不宜以校正曲線法進行計算,每次檢測均應同時做標準管。
6、最終反應偶爾會產生渾濁,較常見原因是血液中脂肪含量過高或冷水浴溫度過低。可向3ml鄰甲苯胺顯色液中加入1.5ml異丙醇,所測系廣東乘以1.5即可。
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