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BA1274-50
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更新時(shí)間:2021-11-22 14:34:27瀏覽次數(shù):277次
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貨號(hào) | BA1274-50 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工,生物產(chǎn)業(yè) |
山梨醇含量檢測(cè)試劑盒(可見分光光度法)
注意:正式測(cè)定前務(wù)必取 2-3 個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定。
產(chǎn)品規(guī)格:50管/48樣
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
山梨醇廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中,不僅是糖運(yùn)輸形式之一,而且與生物抗逆性和食物風(fēng)味密切相關(guān)。因此,在糖代謝、抗逆性和食品研究中經(jīng)常需要檢測(cè)山梨醇含量變化。
山梨醇在堿性溶液中與銅離子形成藍(lán)色絡(luò)合物,在655nm波長(zhǎng)有特征吸收峰。
產(chǎn)品內(nèi)容:
試劑一:液體15mL×1瓶,4℃保存;
試劑二:液體15mL×1瓶,4℃保存;
標(biāo)準(zhǔn)品:粉劑10mg×1支,4℃保存。
需自備的儀器和用品:
可見分光光度計(jì)、水浴鍋、移液器、1mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
操作步驟:
一、山梨醇的提?。?/span>
按照組織質(zhì)量(g):蒸餾水體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.2g組織,加入2mL蒸餾水),研磨成勻漿, 95℃水浴10分鐘(蓋緊,以防止水分散失),冷卻后,8000g,25℃離心10min,取上清液待測(cè)。
標(biāo)準(zhǔn)樣品準(zhǔn)備:將標(biāo)準(zhǔn)液用1ml蒸餾水溶解,溶液濃度為10mg/ml,稀釋至2、1、0.5、0.25、0.125、0mg/ml。
二、測(cè)定步驟
1、分光光度計(jì)預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至655nm,蒸餾水調(diào)零。
2、加樣表(在EP管中依次加入下列試劑):
試劑名稱(μL) | 測(cè)定管 | 標(biāo)準(zhǔn)管 |
試劑一 | 150 | 150 |
試劑二 | 140 | 140 |
樣本 | 1000 | |
標(biāo)準(zhǔn)液 | 1000 |
混勻后室溫靜置15min,10000g,常溫離心10min,取上清液測(cè)655nm 下吸光值A。
三、山梨醇含量計(jì)算:
1、根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度和吸光度建立標(biāo)準(zhǔn)曲線; y為標(biāo)準(zhǔn)品濃度(mg/mL),x為吸光值。計(jì)算樣本中山梨醇的含量y值(mg/mL)。
2、按照樣本質(zhì)量計(jì)算
山梨醇含量(mg /g鮮重)=y×V1÷(W×V1÷V2)= 2y÷W
3、按照樣本蛋白濃度計(jì)算
山梨醇含量(mg /mg prot)=y×V1÷(V1×Cpr)=y÷Cpr
V1:加入樣本體積,1mL;V2:加入提取液體積,2mL;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;W:樣本質(zhì)量,g。
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