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BA1713-100
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更新時間:2021-11-19 16:58:18瀏覽次數(shù):180次
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貨號 | BA1713-100 | 應用領域 | 化工,生物產業(yè) |
銅檢測試劑盒(Cuprizone微板法)
產品貨號:BA1713
產品規(guī)格:100T
產品簡介:
銅是人體重要的微量元素,是酶的重要組成部分,如銅藍蛋白(亞鐵氧化酶)、超氧化物歧化酶、細胞色素氧化酶等,總含量約為90mg,有90-95%的銅與球蛋白結合,形成銅藍蛋白;5-10%的銅與清蛋白結合,清蛋白可作為血漿銅的載體。銅的檢測方法有分光光度計、原子吸收光譜法、中子活化分析法等。
尚寶生物 銅檢測試劑盒(Cuprizone微板法)檢測原理是在酸性介質中與白蛋白結合的銅從白蛋白中解離出來,經(jīng)沉淀蛋白質后,銅離子與Cuprizone絡合,形成穩(wěn)定的藍色絡合物,通過酶標儀檢測620nm處吸光度,形成的藍色與血清、血漿銅成線性關系,與標準品比較,根據(jù)公式計算出銅含量。該檢測試劑盒在62.8μmol/L以下線性關系良好,特異性高,較為靈敏。本試劑盒僅用于科研領域,不宜用于臨床診斷或其他用途。
產品組成:
產品名稱 | 100T | 保存條件 |
試劑(A): 銅標準(100μg/ml) | 1ml | 4℃,避光 |
試劑(B): 銅標準稀釋液 | 5ml | 室溫 |
試劑(C): Cu酸化液 | 15ml | 室溫 |
試劑(D): Lea蛋白沉淀液 | 25ml | 4℃,避光 |
試劑(E): Cu Assay buffer | 2×10ml | 4℃ |
試劑(F): Cuprizone顯色液 | 1.2ml | 4℃,避光 |
試劑(G): ddH2O | 10ml | 室溫 |
自備材料:
1. 1.5ml離心管或試管
2. 離心機
3. 96孔板
4. 酶標儀
操作步驟 (僅供參考) :
1. 制備銅標準工作液:取適量銅標準(100μg/ml),按銅標準(100μg/ml):銅標準稀釋液=1:49的比例配制銅標準(2μg/ml),即為銅標準工作液。配制好以后,4℃避光保存3個月有效。
2. 制備樣品:血漿、血清按照常規(guī)方法制備,可以直接用于本試劑盒的測定,-20℃凍存,用于Cu的檢測。
3. Cu檢測:最好選用經(jīng)稀鹽酸處理及去離子水清潔的干燥試管或者一次性無菌聚乙烯1.5ml離心管,以及潔凈96孔板,如果無法達到上述要求,應盡量避免使用銅污染的器皿,按下表操作。
加入物 | 空白管/孔 | 標準管/孔 | 測定管/孔 |
ddH2O/μl | 200 | - | - |
銅標準(2μg/ml)/μ | - | 200 | - |
待測樣品/μl | - | - | 200 |
Cu酸化液/μl | 140 | 140 | 140 |
充分混勻,室溫放置10min。 | |||
Lea蛋白沉淀液/μl | 200 | 200 | 200 |
充分混勻,室溫放置10min,3000g離心10min,吸取各管上清液,取96孔板按下列步驟操作。 | |||
上述上清液/μl | 100 | 100 | 100 |
Cu Assay buffer/μl | 140 | 140 | 140 |
Cuprizone 顯色液/μl | 10 | 10 | 10 |
4. 混勻,室溫靜置20min,分光光度計620nm處檢測,以空白孔調零,讀取各孔吸光度,1h內比色完畢。
計算:
血漿、血清銅(μmol/L)=(A測定/A標準 )×31.4
式中:A測定=測定孔的吸光度值
A標準=標準孔的吸光度值
單位換算:銅標準(2μg/ml)=銅標準(31.4μmol/L)
μg/dl=μmol/L/0.157
參考區(qū)間:成年健康人血清銅:男性:10.99~21.98μmol/L(70-140μg/dl)
女性:12.56~23.55μmol/L(80-150μg/dl)
注意事項:
1. 如果樣品濃度過高,應用去離子水稀釋后重測,結果乘以稀釋倍數(shù)。
2. 實驗過程中用到的水,不可用普通的蒸餾水,盡量采用高純度的去離子水。
3. 玻璃器材盡量用10%的鹽酸浸泡24h,取出后用去離子水沖洗后才可以使用。
4. 試驗中儀器、試管、注射器等盡量避免銅污染。
5. 本試劑盒呈色穩(wěn)定,顯色后在4-20℃可穩(wěn)定1h。隨著時間的延長,顏色會慢慢加深,應在1h內比色完畢。
6. Cu Assay buffer應密閉保存,用完立即蓋緊蓋子,防止有效成分揮發(fā)。
有效期:12個月有效。
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