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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 50管/48樣 |
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貨號 | BA1411-50 | 應用領域 | 化工,生物產業(yè) |
血清總鐵結合能力(TIBC)檢測試劑盒(可見分光光度法)
正式測定前務必取2-3個預期差異較大的樣本做預測定。
產品貨號:BA1411
產品規(guī)格:50管/48樣
產品內容:
試劑一:液體50mL×1瓶,4℃保存。
試劑二:液體5mL×1瓶,4℃避光保存。
試劑三A:液體2.5mL×1瓶,4℃避光保存。
試劑三B:液體2.5mL×1瓶,4℃避光保存。(臨用前根據(jù)用量將A液和B液按1:1混合)
試劑四:液體15mL×1瓶,4℃保存。
標準品:粉劑×1 支,4℃保存。臨用前加入1.8mL蒸餾水溶解,得到20μmol/mL FeSO4•7H2O溶液。然后蒸餾水稀釋至0.5μmol/mL備用。
產品說明:
血清總鐵結合能力指血清轉鐵蛋白可結合鐵的能力,其含量高低與缺鐵性貧血、急性肝炎等疾病的發(fā)生密切相關。
Fe2+與菲洛嗪反應形成紫紅色化合物,在562nm處有特征吸收峰。堿性條件下,血清轉鐵蛋白可以Fe3+結合,剩余未結合的Fe3+可以被還原成Fe2+,此時吸光度A1與未結合Fe3+數(shù)量正相關;酸化后,轉鐵蛋白結合的Fe3+釋放,并且進一步被還原成Fe2+,此時吸光度A2與總Fe3+數(shù)量正相關。A2減A1與TIBC呈正比。
需自備的儀器和用品:
可見分光光度計、水浴鍋、臺式離心機、1mL 玻璃比色皿、蒸餾水。
操作步驟:
1、分光光度計預熱 30min 以上,調節(jié)波長至 562nm,蒸餾水調零。
2、樣本測定(在 EP 管中加入下列試劑)
試劑名稱(μL) | 測定管 | 空白管 | 標準管 |
血清 | 100 | - | - |
0.5μmol/mL 標準液 | - | - | 100 |
蒸餾水 | - | 200 | 100 |
試劑二 | 100 | - | - |
混勻,37℃,10min | |||
試劑一 | 700 | 700 | 700 |
試劑三 | 100 | 100 | 100 |
混勻,37℃,5min,蒸餾水調零,測定562nm處吸光值A1,測完后立即加入試劑四 | |||
試劑四 | 300 | 300 | 300 |
混勻,37℃,5min,蒸餾水調零,測定562nm處吸光值A2。 |
三、血清總鐵結合力計算:
總鐵結合能力定義:37℃條件下,每升血清結合Fe3+的μmol數(shù)。
總鐵結合能力TIBC(μmol/L)=[C標準××V樣-C標準××V樣]
=[500×(A2測-A2空)/(A2標-A2空)-500×(A1測-A1空)/(A1標-A1空)]
C標準:標準液濃度,0.5μmol/mL;V樣:加入血清樣本體積,0.1mL=100×10-6L。
注意事項:
1. OD值大于0.8,樣品適當稀釋再測定,注意計算公式里乘以稀釋倍數(shù)。
2. 試劑二、試劑三有一定的毒性,操作時請做好防護措施。
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