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當(dāng)前位置:上海尚寶生物科技有限公司>>試劑盒>>生化試劑盒>> BA1717-50維生素B2檢測試劑盒(熒光光度法)

維生素B2檢測試劑盒(熒光光度法)

參  考  價:面議
具體成交價以合同協(xié)議為準(zhǔn)
  • 型號

    BA1717-50

  • 品牌

    其他品牌

  • 廠商性質(zhì)

    生產(chǎn)商

  • 所在地

    上海市

更新時間:2021-11-19 16:47:19瀏覽次數(shù):213次

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供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 50T
貨號 BA1717-50 應(yīng)用領(lǐng)域 化工,生物產(chǎn)業(yè)
維生素B2檢測試劑盒(熒光光度法)
維生素B2 (Vitamin B2 )又稱核黃素,是一種異咯嗪衍生物,耐熱、微溶于水,中性水溶液及乙醇溶液呈黃色,具有很強(qiáng)的熒光,在pH6~7的溶液中熒光*,在pH=11時熒光消失。核黃素可被還原性物質(zhì)還原為無色的二氫化物,同時失去熒光,二氫化物在空氣中易重新氧化,恢復(fù)其熒光。

維生素B2檢測試劑盒(熒光光度法)

產(chǎn)品貨號:BA1717

 

產(chǎn)品規(guī)格:50T

 

產(chǎn)品簡介:

維生素B2 (Vitamin B2 )又稱核黃素,是一種異咯嗪衍生物,耐熱、微溶于水,中性水溶液及乙醇溶液呈黃色,具有很強(qiáng)的熒光,在pH6~7的溶液中熒光*,在pH=11時熒光消失。核黃素可被還原性物質(zhì)還原為無色的二氫化物,同時失去熒光,二氫化物在空氣中易重新氧化,恢復(fù)其熒光。

尚寶維生素B2檢測試劑盒(熒光光度法)是利用Vitamin B2水溶液在激發(fā)波長440~500nm(多為460nm),發(fā)射波長范圍約為510~550nm(多為520nm),當(dāng)加入有還原性的亞硫酸鹽時,核黃素被還原為無熒光的物質(zhì),根據(jù)稀核黃素溶液熒光強(qiáng)度的變化即可定量檢測Vitamin B2的含量。本試劑盒僅用于科研領(lǐng)域,不宜用于臨床診斷或其他用途。

 

產(chǎn)品組成:

產(chǎn)品名稱

50T

保存條件

試劑(A)Vitamin B2標(biāo)準(zhǔn)(100μg/ml)

2ml

4℃,避光

試劑(B):組織勻漿液(10×)

250ml

室溫

試劑(C):亞硫酸鹽

4×100mg

室溫

 

自備材料:

1.        待測樣品如青菜、水果、牛奶等

2.        蒸餾水

3.        勻漿器

4.        稀鹽酸或稀氫氧化鈉

5.        離心管或試管

6.        熒光光度計

 

操作步驟 (僅供參考)

1.        稀釋組織勻漿液:取適量的組織勻漿液(10×),按組織勻漿液(10×):蒸餾水=19的比例稀釋,獲得組織勻漿液,待用。

2.        樣品準(zhǔn)備:

A)固體樣品:取待測材料如青菜、水果、松針等,清洗擦干,準(zhǔn)確稱量5g置于研磨器內(nèi)研磨,加入少量組織勻漿液,研磨碎,留取上清,再次用組織勻漿液研磨,最后一并倒入50ml離心管,補(bǔ)充組織勻漿液至50ml,用氫氧化鈉或鹽酸調(diào)節(jié)pH值至4.5(如無條件可用pH試紙粗略測定),充分混勻后4000g離心5min或者過濾,上清或濾液定容至50ml,濾液4℃保存?zhèn)溆谩?/span>

B)液體樣品:牛奶、飲料等液體樣品,取10ml牛奶于100ml燒杯中,加入0.1mol/L的稀鹽酸50ml,放入滅菌鍋中處理30min,冷卻后用稀氫氧化鈉調(diào)pH6,再用稀鹽酸調(diào)pH4.5,沉淀雜質(zhì),過濾后將濾液轉(zhuǎn)移至100ml容量瓶中定容,濾液4℃保存?zhèn)溆谩?/span>

3.        稀釋標(biāo)準(zhǔn)品:取適量的Vitamin B2標(biāo)準(zhǔn)(100μg/ml),按Vitamin B2標(biāo)準(zhǔn)(100μg/ml)組織勻漿液=19稀釋成Vitamin B2標(biāo)準(zhǔn)(10μg/ml),4℃保存。注意:Vitamin B2標(biāo)準(zhǔn)(100μg/ml)需要充分溶解混勻,否則會導(dǎo)致標(biāo)準(zhǔn)值不準(zhǔn)確。

4.        制備亞硫酸鹽工作液:取一支亞硫酸鹽100mg粉末,充分溶解于2ml蒸餾水,即配制成50mg/ml的亞硫酸鹽工作液,即配即用。

5.        Vitamin B2檢測:選用恰當(dāng)?shù)臑V色片,測定的激發(fā)波長為460nm,發(fā)射波長為520nm。提前預(yù)熱儀器30min,蒸餾水調(diào)零,以下表6號管的Vitamin B2標(biāo)準(zhǔn)(2.5μg/ml)作為參比溶液調(diào)熒光光度計的熒光強(qiáng)度讀數(shù)滿刻度(100%),分別測定其他標(biāo)準(zhǔn)溶液和待測樣品的相對熒光強(qiáng)度,如果熒光強(qiáng)度大于100%,需要稀釋后再行測定。分別測定加入亞硫酸鹽工作液前后的熒光值,記為F0FT 。加入亞硫酸鹽后,應(yīng)充分混勻,及時檢測。

Vitamin B 2 檢測標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制及待測樣品操作表

加入物

1

2

3

4

5

6

樣品

Vitamin B2標(biāo)準(zhǔn)(10μg/ml)

0.125

0.25

0.5

0.75

1.0

1.25

-

蒸餾水

4.875

4.75

4.5

4.25

4.0

3.75

-

待測上清或濾液(ml)

-

-

-

-

-

-

5.0

濃度(μg/ml)

0.25

0.5

1.0

1.5

2.0

2.5

-

含量(μg) 

1.25

2.5

5

7.5

10

12.5


還原前熒光值F0








亞硫酸鹽工作液

0.11

0.11

0.11

0.11

0.11

0.11

0.11

還原后熒光值FT








 

計算:

溶液的熒光強(qiáng)度校準(zhǔn)值:F= F0 -FT

式中:F=校正后的熒光強(qiáng)度

F0=還原前熒光強(qiáng)度

FT=還原后熒光強(qiáng)度

以各管Vitamin B2標(biāo)準(zhǔn)的濃度(μg/ml)或含量(μg)為橫坐標(biāo),以對應(yīng)的校正后的熒光強(qiáng)度(F)為縱坐標(biāo),做出Vitamin B2標(biāo)準(zhǔn)曲線。

根據(jù) Vitamin B2標(biāo)準(zhǔn)曲線及樣品管的校正后的熒光強(qiáng)度 (F)即可計算出待測樣品中Vitamin B2的實際濃度和含量。

100ml液體樣品中VitaminB2含量(μg/100ml)= C×V2 ×100/V1

100g固體樣品中Vitamin B2含量(μg/100g)=C×V3 ×100/m

式中:C=待測樣品中Vitamin B2的濃度(μg/ml)

V1 =檢測體系中加入的濾液體積(ml)=5

V2 =液體樣本濾液的總體積(ml)=100

V3 =固體樣品的上清液總體積(ml)=50

m=固體樣品的質(zhì)量(g)=5

注意事項:

1.        在上述操作中,要嚴(yán)格避免VitaminB2受到陽光直射,否則易分解。

2.        待測樣品如不能及時測定,應(yīng)置于2~8℃避光保存,3天內(nèi)穩(wěn)定。

3.        含核黃素的標(biāo)準(zhǔn)品或樣品一旦加入亞硫酸鹽后會因產(chǎn)生二氫化物失去熒光,但二氫化物在空氣中又易重新氧化,恢復(fù)熒光,因此應(yīng)在10min內(nèi)檢測完畢,而且越快越好。

4.        如果樣品濃度過高,應(yīng)用蒸餾水稀釋后重測,結(jié)果乘以稀釋倍數(shù)。

 

有效期:6個月有效。4℃運輸,4℃保存。


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