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當(dāng)前位置:上海尚寶生物科技有限公司>>試劑盒>>生化試劑盒>> BA1722-50維生素C檢測(cè)試劑盒(菲咯啉比色法)
BA1722-50
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更新時(shí)間:2021-11-19 16:42:51瀏覽次數(shù):208次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來自 化工儀器網(wǎng)供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 50T |
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貨號(hào) | BA1722-50 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工,生物產(chǎn)業(yè) |
維生素C檢測(cè)試劑盒(菲咯啉比色法)
產(chǎn)品貨號(hào):BA1722
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
維生素C(Vitamin C)又稱L-抗壞血酸,是高等靈長(zhǎng)類動(dòng)物與其他少數(shù)生物的必需營(yíng)養(yǎng)素。在生物體內(nèi),維生素C是一種抗氧化劑,為酸性己糖衍生物,是稀醇式己糖酸內(nèi)酯,保護(hù)身體免于自由基的威脅,同時(shí)也是一種輔酶,其廣泛的食物來源為各類新鮮蔬果。Vc有L-型和D-型兩種異構(gòu)體,只有L-型的才具有生理功能,還原型和氧化型都有生理活性。
尚寶生物 維生素C檢測(cè)試劑盒(菲咯啉比色法)檢測(cè)原理是在酸性條件下,維生素C把三價(jià)鐵離子還原成亞鐵離子,后者與菲咯啉形成穩(wěn)定的紅色螯合物,以分光光度計(jì)534nm處檢測(cè)吸光度,在一定濃度范圍(樣品濃度控制在10~250μ g/ml)吸光度與維生素C含量呈線性關(guān)系,獲得Vitamin C含量。該試劑盒主要用于植物組織中的維生素C(抗壞血酸)的檢測(cè),其優(yōu)點(diǎn)是:1、反應(yīng)穩(wěn)定,不易褪色;2、操作簡(jiǎn)便;3、還原糖及其他常見的還原物質(zhì)對(duì)實(shí)驗(yàn)沒有干擾,因此專一性好;4、靈敏度高。本試劑盒僅用于科研領(lǐng)域,不宜用于臨床診斷或其他用途。
產(chǎn)品組成:
產(chǎn)品名稱 | 50T | 儲(chǔ)存條件 |
試劑(A): Vitamin C標(biāo)準(zhǔn)(250μg/ml) | 5ml | 4℃,避光 |
試劑(B): 組織勻漿液(5×) | 500ml | 室溫,避光 |
試劑(C): 酸性緩沖液 | 30ml | 室溫 |
試劑(D): Vitamin C Assay buffer | 30ml | 室溫,避光 |
試劑(E): 菲咯啉顯色液 | 60ml | 4℃,避光 |
自備材料:
1. 蒸餾水
2. 無水乙醇
3. 研缽或勻漿器
4. 離心管或試管
5. 離心機(jī)
6. 比色杯
7. 分光光度計(jì)
操作步驟:
1. 稀釋組織勻漿液:按組織勻漿液(5×):蒸餾水=4:1的比例稀釋,獲得1×組織勻漿液,待用。
2. 準(zhǔn)備樣品:取待測(cè)材料如青菜、水果、松針等,清洗擦干,準(zhǔn)確稱量5g,加入研磨器內(nèi)。加入少量1×組織勻漿液,研磨碎,留取上清,再次用1×組織勻漿液研磨,最后一并倒入50ml離心管,補(bǔ)充1×組織勻漿液至45ml。充分混勻后,4000g離心5min,上清液即為待測(cè)液。
3. 配制系列Vitamin C標(biāo)準(zhǔn):取干凈離心管或試管,按下表進(jìn)行操作,依次稀釋。
加入物(ml) | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 |
Vitamin C標(biāo)準(zhǔn)(250μg/ml) | 0.04 | 0.08 | 0.16 | 0.24 | 0.32 | 0.4 |
蒸餾水 | 0.96 | 0.92 | 0.84 | 0.76 | 0.68 | 0.6 |
相當(dāng)于Vitamin C含量(μg) | 10 | 20 | 40 | 60 | 80 | 100 |
4. Vitamin C加樣:按照下表設(shè)置空白管、標(biāo)準(zhǔn)管、測(cè)定管,溶液應(yīng)按照順序依次加入,并注意避免產(chǎn)生氣泡。如果樣品中的 Vitamin C 含量過高,可以減少樣品用量或適當(dāng)稀釋后再進(jìn)行測(cè)定。樣品的檢測(cè)最好能設(shè)置2平行管,求平均值。
加入物 | 空白管 | 標(biāo)準(zhǔn)管 | 測(cè)定管 |
1×組織勻漿液 | 1.0 | - | - |
系列Vitamin C標(biāo)準(zhǔn)(1-6號(hào)) | - | 1.0 | - |
待測(cè)液 | - | - | 1.0 |
無水乙醇 | 0.5 | 0.5 | 0.5 |
酸性緩沖液 | 0.25 | 0.25 | 0.25 |
Vitamin C Assay buffer | 0.25 | 0.25 | 0.25 |
菲咯啉顯色液 | 0.5 | 0.5 | 0.5 |
5. Vitamin C測(cè)定:立即混勻,以空白調(diào)零,比色光徑1cm,以分光光度計(jì)測(cè)定534nm處系列標(biāo)準(zhǔn)管、測(cè)定管的吸光度。
計(jì)算:
以系列標(biāo)準(zhǔn)Vitamin C (10、20、40、60、80、100μg)為橫坐標(biāo),以對(duì)應(yīng)的吸光度為縱坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,求得回歸方程。以測(cè)定管吸光度代入回歸方程求得維生素C含量。
維生素C含量(mg/100g)=(m0×V T×100)/(m1×VS×1000)
式中:m0 =根據(jù)待測(cè)樣品的吸光度在標(biāo)準(zhǔn)曲線求得的維生素C的質(zhì)量(μg)
VT =待測(cè)液的總體積(ml)
m1 =樣品質(zhì)量(g)
VS =測(cè)定時(shí)取樣體積(ml)
100=100g
注意事項(xiàng):
1. 上述低溫試劑避免反復(fù)凍融,以免失效或效率下降。
2. 組織勻漿液(5×)久置或低溫保存,容易產(chǎn)生乳白色渾濁。如果白色渾濁不明顯,可以直接使用,不影響效果;如果白色渾濁較多,應(yīng)棄用。
3. 待測(cè)樣本如不能及時(shí)測(cè)定,應(yīng)置于2~8℃保存,3天內(nèi)穩(wěn)定。
4. 如果樣品濃度過高,應(yīng)用蒸餾水稀釋后重測(cè),結(jié)果乘以稀釋倍數(shù)。
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