您好, 歡迎來到化工儀器網(wǎng)! 登錄| 免費注冊| 產(chǎn)品展廳| 收藏商鋪|
當(dāng)前位置:上海尚寶生物科技有限公司>>試劑盒>>生化試劑盒>> BA1467-50總抗氧化能力(T-AOC)檢測試劑盒
BA1467-50
其他品牌
生產(chǎn)商
上海市
更新時間:2021-11-18 16:19:10瀏覽次數(shù):220次
聯(lián)系我時,請告知來自 化工儀器網(wǎng)供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 50管/48樣 |
---|---|---|---|
貨號 | BA1467-50 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工,生物產(chǎn)業(yè) |
總抗氧化能力(T-AOC)檢測試劑盒(可見分光光度法)
正式測定前務(wù)必取2-3個預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定。
產(chǎn)品貨號:BA1467
產(chǎn)品內(nèi)容:
提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存,使用前預(yù)冷。
試劑一:液體35mL×1瓶,4℃保存。
試劑二:液體20mL×1瓶,4℃避光保存。
試劑三:液體5mL×1瓶,4℃避光保存。
標準品:粉劑×1支,10mgFeSO4·7H2O,4℃保存。臨用前加入1.75ml蒸餾水,滴加1滴濃硫酸,制備20µmol/mL FeSO4標準溶液。
混合液(現(xiàn)配現(xiàn)用):將試劑一、試劑二、試劑三按7:1:1的比例混合,使用前預(yù)溫至37℃。
產(chǎn)品說明:
測定對象中各種抗氧化物質(zhì)和抗氧化酶等構(gòu)成總抗氧化水平。在生物學(xué)、醫(yī)學(xué)和藥學(xué)研究中常常檢測血漿、血清、唾液、尿液等各種體液,細胞或組織等裂解液、植物或中草藥抽提液及各種抗氧化物(antioxidant)溶液的總抗氧化能力。
在酸性環(huán)境下,還原Fe3+-三吡啶三吖嗪(Fe3+-TPTZ)產(chǎn)生藍色的Fe2+-TPTZ 的能力反映了總抗氧化能力。
需自備的儀器和用品:
可見分光光度計、恒溫水浴鍋、低溫離心機、1mL 玻璃比色皿和蒸餾水。
操作步驟:
一、樣品的制備:
(1) 血清、血漿、唾液或尿液樣品
血漿(制備時可以使用肝素或檸檬酸鈉抗凝,不宜使用EDTA抗凝)5000r/min離心10min,取上清待測。血清、唾液或尿液樣品直接用于測定,也可以-80℃凍存(不宜超過30 d)后再測定。
(2) 細胞或組織樣品收集約100-200萬個細胞或者約0.1g組織,加入1.0mL預(yù)冷的提取液,勻漿或超聲以充分破碎
細胞并釋放其中的抗氧化物,4℃、10000r/min 離心5分鐘,取上清待測。需測定蛋白濃度。
二測定步驟
1、標準曲線繪制:
將20μmol/mL FeSO4標準溶液稀釋至 0.2、0.1、0.05、0.025、0.0125、0.00625、0.003125、0.00156μmol/mL,分別取500μL標準溶液(蒸餾水作空白)加入500μL試劑二,充分混勻,反應(yīng)10min,雙蒸水調(diào)零,1cm光徑,測定A593,計算ΔA=A標準-A空白,此時Fe2+終濃度為 0.1、0.05、 0.025、0.0125、0.00625、0.003125、0.00156、0.00078μmol/mL。
2、分光光度計預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至593nm,蒸餾水調(diào)零。
3、操作表
試劑名稱(μL) | 空白管(μL) | 測定管(μL) |
混合液 | 900 | 900 |
樣本 | 30 | |
雙蒸水 | 120 | 90 |
充分混勻,反應(yīng)10min,雙蒸水調(diào)零,1cm光徑,測定A593,計算△Aˊ=A測定-A空白管。(注:空白管只需測定一次) |
三、總抗氧化能力計算
1、標準曲線繪制
以Fe2+終濃度為橫坐標,以△A為縱坐標繪制標準曲線,得到線性回歸方程y=kx+b,將△Aˊ帶入方程求得 x(μmol/mL)。
2、計算公式:
單位定義:樣品的抗氧化能力以達到同樣吸光度變化值(△A)所需的標準液離子濃度表示。
(1)按蛋白濃度計算
總抗氧化能力(U/mg prot)=x×V反總÷(V樣×Cpr)=34×x÷ Cpr
(2)按樣品質(zhì)量計算
總抗氧化能力(U/g鮮重)=x×V反總÷(V樣÷V樣總×W)=34×x÷ W
(3)按細胞數(shù)量計算
總抗氧化能力(U/104cell)= x×V反總÷(V樣÷V樣總×細胞數(shù)量)= 34×x÷細胞數(shù)量
(4)按液體體積計算
總抗氧化能力(U/mL)=x×V反總÷V樣=34×x
V樣總:加入提取液體積,1mL;V反總:反應(yīng)總體積,1.02mL;V樣:反應(yīng)中樣品體積,0.03mL;W:樣品質(zhì)量,g;Cpr:樣本蛋白濃度,mg/mL;細胞數(shù)量:以104為單位,萬個。
注意事項:
1. 試劑二對人體有刺激性,請采取適當(dāng)?shù)姆雷o措施。為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴乳膠手套操作。
2. 盡量避免使用在酸性條件下呈藍色或接近藍色的樣本,否則對本試劑盒的檢測結(jié)果產(chǎn)生干擾。
3. 樣品中不宜添加Tween、Triton和NP-40等去垢劑和 DTT、巰基乙醇等影響氧化還原反應(yīng)的還原劑。
4. 如果樣品測定出來的吸光值在標準曲線范圍以外,需把樣品適當(dāng)稀釋或濃縮后再進行測定。
5. 試劑盒2-8℃保存。
請輸入賬號
請輸入密碼
請輸驗證碼
以上信息由企業(yè)自行提供,信息內(nèi)容的真實性、準確性和合法性由相關(guān)企業(yè)負責(zé),化工儀器網(wǎng)對此不承擔(dān)任何保證責(zé)任。
溫馨提示:為規(guī)避購買風(fēng)險,建議您在購買產(chǎn)品前務(wù)必確認供應(yīng)商資質(zhì)及產(chǎn)品質(zhì)量。