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總抗氧化能力(T-AOC)檢測(cè)試劑盒

參  考  價(jià):面議
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
  • 型號(hào)

    BA1467-50

  • 品牌

    其他品牌

  • 廠商性質(zhì)

    生產(chǎn)商

  • 所在地

    上海市

更新時(shí)間:2021-11-18 16:19:10瀏覽次數(shù):226次

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供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 50管/48樣
貨號(hào) BA1467-50 應(yīng)用領(lǐng)域 化工,生物產(chǎn)業(yè)
總抗氧化能力(T-AOC)檢測(cè)試劑盒(可見分光光度法)
測(cè)定對(duì)象中各種抗氧化物質(zhì)和抗氧化酶等構(gòu)成總抗氧化水平。在生物學(xué)、醫(yī)學(xué)和藥學(xué)研究中常常檢測(cè)血漿、血清、唾液、尿液等各種體液,細(xì)胞或組織等裂解液、植物或中草藥抽提液及各種抗氧化物(antioxidant)溶液的總抗氧化能力。

在酸性環(huán)境下,還原Fe3+-三吡啶三吖嗪(Fe3+-TPTZ)產(chǎn)生藍(lán)色的Fe2+-TPTZ 的能力反映了總抗氧化能力。

總抗氧化能力(T-AOC)檢測(cè)試劑盒(可見分光光度法)

正式測(cè)定前務(wù)必取2-3個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定。

產(chǎn)品貨號(hào):BA1467

 

產(chǎn)品規(guī)格:50/48

 

產(chǎn)品內(nèi)容:

提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存,使用前預(yù)冷。

試劑一:液體35mL×1瓶,4℃保存。

試劑二:液體20mL×1瓶,4℃避光保存。

試劑三:液體5mL×1瓶,4℃避光保存。

標(biāo)準(zhǔn)品:粉劑×1支,10mgFeSO4·7H2O4℃保存。臨用前加入1.75ml蒸餾水,滴加1滴濃硫酸,制備20µmol/mL FeSO4標(biāo)準(zhǔn)溶液。

混合液(現(xiàn)配現(xiàn)用):將試劑一、試劑二、試劑三按7:1:1的比例混合,使用前預(yù)溫至37℃

 

產(chǎn)品說(shuō)明:

測(cè)定對(duì)象中各種抗氧化物質(zhì)和抗氧化酶等構(gòu)成總抗氧化水平。在生物學(xué)、醫(yī)學(xué)和藥學(xué)研究中常常檢測(cè)血漿、血清、唾液、尿液等各種體液,細(xì)胞或組織等裂解液、植物或中草藥抽提液及各種抗氧化物(antioxidant)溶液的總抗氧化能力。

在酸性環(huán)境下,還原Fe3+-三吡啶三吖嗪(Fe3+-TPTZ)產(chǎn)生藍(lán)色的Fe2+-TPTZ 的能力反映了總抗氧化能力。

 

需自備的儀器和用品:

可見分光光度計(jì)、恒溫水浴鍋、低溫離心機(jī)、1mL 玻璃比色皿和蒸餾水。

 

操作步驟:

一、樣品的制備:

(1) 血清、血漿、唾液或尿液樣品

血漿(制備時(shí)可以使用肝素或檸檬酸鈉抗凝,不宜使用EDTA抗凝)5000r/min離心10min,取上清待測(cè)。血清、唾液或尿液樣品直接用于測(cè)定,也可以-80℃凍存(不宜超過30 d)后再測(cè)定。

(2) 細(xì)胞或組織樣品收集約100-200萬(wàn)個(gè)細(xì)胞或者約0.1g組織,加入1.0mL預(yù)冷的提取液,勻漿或超聲以充分破碎

細(xì)胞并釋放其中的抗氧化物,4℃10000r/min 離心5分鐘,取上清待測(cè)。需測(cè)定蛋白濃度。

二測(cè)定步驟

1、標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制:

20μmol/mL FeSO4標(biāo)準(zhǔn)溶液稀釋至 0.20.1、0.050.025、0.01250.00625、0.0031250.00156μmol/mL,分別取500μL標(biāo)準(zhǔn)溶液(蒸餾水作空白)加入500μL試劑二,充分混勻,反應(yīng)10min,雙蒸水調(diào)零,1cm光徑,測(cè)定A593,計(jì)算ΔA=A標(biāo)準(zhǔn)-A空白,此時(shí)Fe2+終濃度為 0.1、0.05、 0.025、0.01250.00625、0.003125、0.00156、0.00078μmol/mL。

2、分光光度計(jì)預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至593nm,蒸餾水調(diào)零。

3、操作表

試劑名稱(μL

空白管(μL

測(cè)定管(μL

混合液

900

900

樣本


30

雙蒸水

120

90

充分混勻,反應(yīng)10min,雙蒸水調(diào)零,1cm光徑,測(cè)定A593,計(jì)算△Aˊ=A測(cè)定-A空白管。(注:空白管只需測(cè)定一次)

 

三、總抗氧化能力計(jì)算

1、標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制

Fe2+終濃度為橫坐標(biāo),以△A為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,得到線性回歸方程y=kx+b,將△Aˊ帶入方程求得 x(μmol/mL)。

2、計(jì)算公式:

單位定義:樣品的抗氧化能力以達(dá)到同樣吸光度變化值(△A)所需的標(biāo)準(zhǔn)液離子濃度表示。

1)按蛋白濃度計(jì)算

總抗氧化能力(U/mg prot=x×V反總÷(V樣×Cpr=34×x÷ Cpr

2)按樣品質(zhì)量計(jì)算

總抗氧化能力(U/g鮮重)=x×V反總÷(V樣÷V樣總×W=34×x÷ W

3)按細(xì)胞數(shù)量計(jì)算

總抗氧化能力(U/104cell= x×V反總÷(V樣÷V樣總×細(xì)胞數(shù)量)= 34×x÷細(xì)胞數(shù)量

4)按液體體積計(jì)算

總抗氧化能力(U/mL=x×V反總÷V=34×x

V樣總:加入提取液體積,1mLV反總:反應(yīng)總體積,1.02mLV樣:反應(yīng)中樣品體積,0.03mL;W:樣品質(zhì)量,gCpr:樣本蛋白濃度,mg/mL;細(xì)胞數(shù)量:以104為單位,萬(wàn)個(gè)。

 

注意事項(xiàng):

1.        試劑二對(duì)人體有刺激性,請(qǐng)采取適當(dāng)?shù)姆雷o(hù)措施。為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴乳膠手套操作。

2.        盡量避免使用在酸性條件下呈藍(lán)色或接近藍(lán)色的樣本,否則對(duì)本試劑盒的檢測(cè)結(jié)果產(chǎn)生干擾。

3.        樣品中不宜添加Tween、TritonNP-40等去垢劑和 DTT、巰基乙醇等影響氧化還原反應(yīng)的還原劑。

4.        如果樣品測(cè)定出來(lái)的吸光值在標(biāo)準(zhǔn)曲線范圍以外,需把樣品適當(dāng)稀釋或濃縮后再進(jìn)行測(cè)定。

5.        試劑盒2-8℃保存。

 

 


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