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MTT細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測試劑盒(500次)
產(chǎn)品貨號:20311
產(chǎn)品規(guī)格:500次
產(chǎn)品簡介:
MTT細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測試劑盒(MTT Cell Proliferation and Cytotoxicity Assay Kit)被廣泛應(yīng)用于細(xì)胞增殖和細(xì)胞毒性的檢測。MTT可以被線粒體內(nèi)的一些脫氫酶還原生成結(jié)晶狀的深紫色產(chǎn)物Formazan。在特定溶劑存在的情況下,可以被溶解。然后通過酶標(biāo)儀可以測定570nm波長附近的吸光度。細(xì)胞增殖越多越快,則吸光度越高;細(xì)胞毒性越大,則吸光度越低。
本試劑盒采用了的Formazan溶解液配方,無需去除原有的培養(yǎng)液,可以直接加入Formazan溶解液溶解Formazan。從而避免了由于去除培養(yǎng)液時Formazan被部分去除而引起的誤差。
本試劑盒本底低,靈敏度高,線性范圍寬,使用方便。
本試劑盒可以測定500個樣品。
包裝清單:
產(chǎn)品名稱 | 包裝 | 儲存條件 |
MTT溶液 | 10ml | 4℃/長期保存-20℃、避光 |
Formazan溶解液 | 55ml | 4℃、避光 |
操作步驟:
1. 通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100μl 2000個細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100μl 5000個細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。按照實(shí)驗(yàn)需要,進(jìn)行培養(yǎng)并給予0-10μl特定的藥物刺激。
2. 每孔加入20μl MTT溶液,在細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)繼續(xù)孵育4小時。
3. 每孔加入100μl Formanzan溶解液,在細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)再繼續(xù)孵育。直至在普通光學(xué)顯微鏡下觀察發(fā)現(xiàn)Formazan全部溶解。通常37℃孵育4小時左右,紫色結(jié)晶會全部溶解。如果紫色結(jié)晶較小較少,溶解的時間會短一些。如果紫色結(jié)晶較大較多,溶解的時間會長一些,建議室溫或37℃過夜孵育。
4. 在570nm測定吸光度。如無570nm濾光片,可以使用560-600nm的濾光片。
注意事項(xiàng) :
1. 由于使用96孔板進(jìn)行檢測,如果細(xì)胞培養(yǎng)時間較長,一定要注意蒸發(fā)的問題。一方面,由于96孔板周圍一圈最容易蒸發(fā),可以采取棄用周圍一圈的辦法,改加PBS、水或培養(yǎng)液;另一方面,可以把96孔板置于靠近培養(yǎng)箱內(nèi)水源的地方,以緩解蒸發(fā)。
2. MTT溶液在4℃、冰浴等較低溫度情況下會凝固,可以20-25℃水浴溫育片刻至全部融解后使用。
3. Formazan溶解液結(jié)凍或產(chǎn)生沉淀時可以37℃水浴孵育以促進(jìn)溶解,并且必須在全部溶解并混勻后使用。混勻過程請用移液槍輕輕吹勻,勿上下顛倒,避免氣泡。
4. 為了您的安全和健康,請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
MTT細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測試劑盒(500次)
產(chǎn)品貨號:20311
產(chǎn)品規(guī)格:500次
產(chǎn)品簡介:
MTT細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測試劑盒(MTT Cell Proliferation and Cytotoxicity Assay Kit)被廣泛應(yīng)用于細(xì)胞增殖和細(xì)胞毒性的檢測。MTT可以被線粒體內(nèi)的一些脫氫酶還原生成結(jié)晶狀的深紫色產(chǎn)物Formazan。在特定溶劑存在的情況下,可以被溶解。然后通過酶標(biāo)儀可以測定570nm波長附近的吸光度。細(xì)胞增殖越多越快,則吸光度越高;細(xì)胞毒性越大,則吸光度越低。
本試劑盒采用了的Formazan溶解液配方,無需去除原有的培養(yǎng)液,可以直接加入Formazan溶解液溶解Formazan。從而避免了由于去除培養(yǎng)液時Formazan被部分去除而引起的誤差。
本試劑盒本底低,靈敏度高,線性范圍寬,使用方便。
本試劑盒可以測定500個樣品。
包裝清單:
產(chǎn)品名稱 | 包裝 | 儲存條件 |
MTT溶液 | 10ml | 4℃/長期保存-20℃、避光 |
Formazan溶解液 | 55ml | 4℃、避光 |
操作步驟:
1. 通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100μl 2000個細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100μl 5000個細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。按照實(shí)驗(yàn)需要,進(jìn)行培養(yǎng)并給予0-10μl特定的藥物刺激。
2. 每孔加入20μl MTT溶液,在細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)繼續(xù)孵育4小時。
3. 每孔加入100μl Formanzan溶解液,在細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)再繼續(xù)孵育。直至在普通光學(xué)顯微鏡下觀察發(fā)現(xiàn)Formazan全部溶解。通常37℃孵育4小時左右,紫色結(jié)晶會全部溶解。如果紫色結(jié)晶較小較少,溶解的時間會短一些。如果紫色結(jié)晶較大較多,溶解的時間會長一些,建議室溫或37℃過夜孵育。
4. 在570nm測定吸光度。如無570nm濾光片,可以使用560-600nm的濾光片。
注意事項(xiàng) :
1. 由于使用96孔板進(jìn)行檢測,如果細(xì)胞培養(yǎng)時間較長,一定要注意蒸發(fā)的問題。一方面,由于96孔板周圍一圈最容易蒸發(fā),可以采取棄用周圍一圈的辦法,改加PBS、水或培養(yǎng)液;另一方面,可以把96孔板置于靠近培養(yǎng)箱內(nèi)水源的地方,以緩解蒸發(fā)。
2. MTT溶液在4℃、冰浴等較低溫度情況下會凝固,可以20-25℃水浴溫育片刻至全部融解后使用。
3. Formazan溶解液結(jié)凍或產(chǎn)生沉淀時可以37℃水浴孵育以促進(jìn)溶解,并且必須在全部溶解并混勻后使用。混勻過程請用移液槍輕輕吹勻,勿上下顛倒,避免氣泡。
4. 為了您的安全和健康,請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
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