Saint-ZTS-8——細(xì)胞實時定量檢測試劑

產(chǎn)品貨號:ST1010

產(chǎn)品簡介：

Saint-ZTS-8細(xì)胞實時定量檢測試劑根據(jù)專有配方配制，加入培養(yǎng)板/皿后可長時間(1-6天)用于定量檢測細(xì)胞增殖能力。

Saint-ZTS-8細(xì)胞實時定量檢測試劑能夠可逆性的與細(xì)胞內(nèi)的脫氫酶反應(yīng)，剪切后生成具有紅色發(fā)光基團(tuán)的無毒化合物（化合物的生成量與活細(xì)胞的數(shù)量和活力成正比），可用于長時間的細(xì)胞增殖和毒性分析，方法簡便而準(zhǔn)確。

試劑優(yōu)點：

1. 結(jié)果準(zhǔn)確，重現(xiàn)性好  試劑不影響細(xì)胞活力，顯色產(chǎn)物直接溶解于培養(yǎng)液，直接測定OD值或熒光強(qiáng)度即可準(zhǔn)確反應(yīng)細(xì)胞活力。

2. 操作省時簡單  試劑即開即用，無需配制；只需一步操作，即可測定。

3. 安全性好  不含放射性同位素和有害有機(jī)溶劑，使用安全。

4. 靈敏度高  靈敏度高于MTT、XTT、CCK8等終點法試劑。

5. 可長時間實時檢測  加入細(xì)胞后可于1-6天內(nèi)隨時檢測。

使用方法：

1. 使用96孔板，細(xì)胞培養(yǎng)和處理完畢。

2. 迅速加入Saint-ZTS-8試劑，每孔10μl。

3. 培養(yǎng)板放回培養(yǎng)箱，37℃孵育1~4小時。

4. 于570nm處測定OD值；或于酶標(biāo)儀底讀Ex=490/20nm、Em=560/20nm處檢測熒光強(qiáng)度。

5. 結(jié)果分析  

光吸收檢測：將各測試孔的OD值減去對照孔或調(diào)零孔OD值。各平行孔的OD值取平均數(shù)。

細(xì)胞活力% = （加藥細(xì)胞OD570nm-空白OD570nm）/（對照細(xì)胞OD570nm -空白OD570nm）×100%

熒光法檢測：將各測試孔的熒光強(qiáng)度減去對照孔或調(diào)零孔熒光強(qiáng)度。各平行孔的熒光強(qiáng)度取平均數(shù)。

細(xì)胞活力% = （加藥細(xì)胞熒光強(qiáng)度-空白熒光強(qiáng)度）/（對照細(xì)胞熒光強(qiáng)度 - 空白熒光強(qiáng)度）×100%

6. 第一次檢測后可放回培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)1-6天，中間可按實驗需求隨時取出重新讀板檢測。

7. 若使用96孔外的培養(yǎng)板，試劑用量隨培養(yǎng)基體積等比例增減。

注意事項：

1. 使用時，建議先做幾個孔摸索條件，考察接種細(xì)胞的數(shù)量和加入Saint-ZTS-8試劑后的培養(yǎng)時間。

2. 加入試劑速度要快，以避免試劑殘留和加樣速度不一所致反應(yīng)時間不同造成的顯色誤差。有條件的情況下，建議采用多通道移液器，可以減少平行孔間的差異。為避免槍頭上的殘留所帶來的加樣誤差，Saint-ZTS-8試劑可在加樣前用培養(yǎng)基稀釋混勻。

3. 試劑加入后輕輕振搖培養(yǎng)板，使Saint-ZTS-8試劑與培養(yǎng)基充分混勻。

4. 試劑加入后培養(yǎng)時間根據(jù)細(xì)胞種類的不同和每孔細(xì)胞數(shù)量的多少而異。對于貼壁細(xì)胞，加入Saint-ZTS-8的培養(yǎng)時間一般為1~4小時，但在培養(yǎng)30分鐘左右即可取出肉眼觀察顯色程度（根據(jù)細(xì)胞種類而定）。與貼壁細(xì)胞相比，懸浮細(xì)胞較難顯色。對于懸浮細(xì)胞，在加入Saint-ZTS-8培養(yǎng)1~4小時后，可先從培養(yǎng)箱中取出，目測染色程度或用酶標(biāo)儀測定決定。白細(xì)胞較難顯色，因此需要較長的Saint-ZTS-8反應(yīng)時間或增加細(xì)胞數(shù)量（~10⁵個細(xì)胞/孔）。若顯色困難，可以將培養(yǎng)板放回培養(yǎng)箱，繼續(xù)培養(yǎng)數(shù)小時后再確定。注意：Saint-ZTS-8試劑的最佳反應(yīng)時間以具體顯色的最佳時間為準(zhǔn)。

5. Saint-ZTS-8試劑中的發(fā)色化合物會與熒光猝滅劑反應(yīng)，如果實驗中有熒光猝滅劑，需要檢查背景值，即在不含細(xì)胞的培養(yǎng)基中加入藥物，然后加入Saint-ZTS-8試劑在一定時間內(nèi)檢測，和不加藥物的培養(yǎng)基進(jìn)行比較（只加Saint-ZTS-8試劑），如果讀取結(jié)果OD值明顯偏低，則說明有反應(yīng)。

6. 若細(xì)胞培養(yǎng)時間較長導(dǎo)致培養(yǎng)基顏色或pH發(fā)生變化，建議更換新鮮培養(yǎng)基后再加入Saint-ZTS-8試劑。含有酚紅的培養(yǎng)基不影響本試劑的使用。

7. 如果要測定細(xì)胞的具體數(shù)量，需要先做一個標(biāo)準(zhǔn)曲線。

8. 若測得值過高，可酌減鋪板細(xì)胞數(shù)或Saint-ZTS-8試劑用量。

9. 每孔加入10μL Saint-ZTS-8試劑。如果起始的培養(yǎng)體積為200μL，則需加入20μL Saint-ZTS-8試劑，其它情況以此類推。可以用加了相應(yīng)量細(xì)胞培養(yǎng)液和Saint-ZTS-8試劑但沒有加入細(xì)胞的孔作為空白對照。如果擔(dān)心所使用的藥物會干擾檢測，需設(shè)置加了相應(yīng)量細(xì)胞培養(yǎng)液、藥物和Saint-ZTS-8試劑但沒有加入細(xì)胞的孔作為空白對照。

試劑包裝：

100次：1ml×1管；500次：5ml×1瓶。

貯藏條件：

Saint-ZTS-8試劑在避光0~5℃的條件下存放半年，測定效果不變。在-20℃的條件下可以貯存更久。反復(fù)凍融會增加背景值，經(jīng)常使用時請于0~5℃條件下保存。

本產(chǎn)品僅供科研使用。