Bradford蛋白濃度測定試劑盒

產(chǎn)品貨號：16005

產(chǎn)品規(guī)格：500次/1000次

產(chǎn)品簡介：

Bradford蛋白濃度測定試劑盒(Bradford Protein Assay Kit)是根據(jù)的兩種蛋白濃度檢測方法之一Bradford法研制而成，實(shí)現(xiàn)了蛋白濃度測定的快速，穩(wěn)定和高靈敏度。檢測速度極快，10-20個(gè)樣品只需不足10分鐘即可完成。靈敏度高，檢測濃度下限達(dá)到25μg/ml，最小檢測蛋白量達(dá)到0.5μg，待測樣品體積為1-20μl。在50-1000μg/ml濃度范圍內(nèi)有較好的線性關(guān)系。

Bradford法測定蛋白濃度不受絕大部分樣品中的化學(xué)物質(zhì)的影響。樣品中β-巰基乙醇的濃度可高達(dá)1M，二硫蘇糖醇的濃度可高達(dá)5mM。但受略高濃度的去垢劑影響。需確保SDS低于0.01%，Triton X-100低于0.05%，Tween 20,60,80低于0.015%。含去垢劑的樣品推薦使用BCA蛋白濃度測定試劑盒。

包裝清單：

操作步驟：

1. 蛋白標(biāo)準(zhǔn)品的準(zhǔn)備

融化蛋白標(biāo)準(zhǔn)品，取10μl稀釋至100μl，使終濃度為0.5mg/ml。蛋白樣品在什么溶液中，標(biāo)準(zhǔn)品也宜用什么溶液稀釋。但是為了簡便起見，也可以用0.9%NaCl或PBS稀釋標(biāo)準(zhǔn)品。

2. 蛋白濃度測定

   a. 將標(biāo)準(zhǔn)品按0、1、2、4、8、12、16、20μl加到96孔板的標(biāo)準(zhǔn)品孔中，加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液補(bǔ)足到20μl，  相當(dāng)于標(biāo)準(zhǔn)品濃度分別為0、0.025、0.05、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5mg/ml。

   b. 加適當(dāng)體積樣品到96孔板的樣品孔中。如果樣品不足20μl，需加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液補(bǔ)足到20μl。請注意記錄樣品體積。

   c. 各孔加入200μl Bradford溶液，室溫放置3-5分鐘。

   d. 用酶標(biāo)儀測定A595，或560-610nm之間的其它波長的吸光度。

   e. 根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線和使用的樣品體積計(jì)算出樣品中的蛋白濃度。

注意事項(xiàng)：

1. Bradford溶液使用前請顛倒3-5次，混勻。

2. 蛋白標(biāo)準(zhǔn)請?jiān)谌咳芙夂笙然靹?，再稀釋成一系列不同濃度的蛋白?biāo)準(zhǔn)。

3. 將Bradford溶液恢復(fù)到室溫再使用，有利于提高檢測的靈敏度。

4. 需可檢測560-610nm之間波長的酶標(biāo)儀一臺，最佳檢測波長為595nm。并需96孔板。

5. 為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

保存條件： 

     Bradford溶液4℃保存，蛋白標(biāo)準(zhǔn)-20℃保存，本試劑盒自訂購之日起12個(gè)月內(nèi)有效。