性猛交XXXX乱大交派对,四虎影视WWW在线观看免费 ,137最大但人文艺术摄影,联系附近成熟妇女

上海尚寶生物科技有限公司
初級會員 | 第4年

400-611-0007

ACK紅細胞裂解液(ACK Lysis Buffer) 使用說明書

時間:2022/8/8閱讀:358
分享:

ACK紅細胞裂解液(ACK Lysis Buffer)

產品貨號T10105

產品規(guī)格100ml/500ml

 

產品簡介:

在生物科研領域,經常需要去除紅細胞,去除紅細胞的方法有多種,如ACK Lysis Buffer、Tris-氯化銨紅細胞裂解液、Gey's Lysis Buffer。ACK 紅細胞裂解液(Red Blood Cell Lysis Buffer)也稱 ACK Lysis Buffer,是一種從人、鼠或其他哺乳動物等體內的組織樣品或血液中裂解并去除無核紅細胞的溶液,其主要有效成分為 NH4Cl。

尚寶生物 ACK Lysis Buffer 經過優(yōu)化配方,在裂解無核紅細胞的同時幾乎不損傷淋巴細胞(Lymphocyte)或其它有細胞核的細胞。對于裂解、去除有細胞核紅細胞,例如鳥或禽類的紅細胞,效果不佳,裂解類似細胞時,不建議采用。本裂解液經過濾除菌,經過 ACK Lysis Buffer 處理過的血液或組織細胞樣品可以用于后續(xù)的細胞培養(yǎng)、細胞融合以及核酸或蛋白的提取及各種常規(guī)的分析和檢測。

 

產品組成

產品名稱

規(guī)格

保存條件

ACK Lysis Buffer

100ml/500ml

4

 

自備材料:

1. 胰dan bai酶

2. 離心機

3. PBS、HBSS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液

 

操作步驟(僅供參考)

()組織細胞樣本的常規(guī)操作

1. 制備細胞懸液: 新鮮組織經過胰蛋白酶或膠原酶等消化處理,通過適當方法制備成細胞懸液,離心棄上清。

2. 裂解: 加入35倍細胞沉淀體積的ACK Lysis Buffer,輕柔吹打混勻,裂解12min

本操作步驟在4℃條件下操作更佳,亦可在室溫下操作。

3. 離心: 4℃400500g離心5min,棄紅色上清。如無低溫離心機,本步驟亦可在室溫下操作。

4. 如果發(fā)現紅細胞裂解不*,可以重復上述步驟2和步驟3各一次。

5. 洗滌:根據實驗要求加入適量PBS、HBSS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液,輕柔混勻重懸沉淀。4℃400500g 離心23min,棄上清,該離心步驟亦可在室溫下操作。所加入的PBS、HBSS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液的量一般應大于細胞沉淀體積的5倍以上。

6. 如有必要,重復上述步驟5一次,共洗滌12次。

7. 根據實驗需要用適當溶液重懸細胞沉淀,進行計數、培養(yǎng)等后續(xù)實驗。

()組織細胞樣本的快速操作(無需洗滌)

1. 制備細胞懸液:新鮮組織經過胰蛋白酶或膠原酶等消化處理,通過適當方法制備成細胞懸液,離心棄上清。

2. 裂解:加入細胞5倍細胞沉淀體積的ACK Lysis Buffer,輕柔吹打混勻,裂解12min。

本操作步驟在 4℃條件下操作更佳,亦可在室溫下操作。

3. 加入1520ml PBSHBSS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液,輕柔混勻。

4. 離心:4℃,400500g離心5min,棄紅色上清,本離心步驟亦可在室溫下操作。

5. 如果發(fā)現紅細胞裂解不*,可以重復上述步驟24各一次。

6. 根據實驗需要用適當溶液重懸細胞沉淀,進行計數、培養(yǎng)等后續(xù)實驗。

()血液樣本的常規(guī)操作

1. 取新鮮抗凝血,400500g離心5min,棄上清。

2. 裂解: 加入610倍細胞沉淀體積的ACK Lysis Buffer,輕柔吹打混勻,裂解15min。

本操作步驟在4℃條件下操作更佳,亦可在室溫下操作。(特別提醒:對于鼠的血液,裂解12min已經足夠,對于人的外周血,宜延長裂解時間至45min,并且裂解過程中輕輕搖動以促進紅細胞裂解。)

3. 離心: 4℃400500g離心5min,棄紅色上清。如無低溫離心機,本步驟亦可在室溫下操作。

4. 如果發(fā)現紅細胞裂解不*,可以重復上述步驟2和步驟3一次。

5. 洗滌: 根據實驗要求加入適量PBSHBSS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液,輕柔混勻重懸沉淀。4℃,400500g離心23min,棄上清,該離心步驟亦可在室溫下操作。所加入的PBS、HBSS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液的量一般應大于細胞沉淀體積的5倍以上。

6. 根據實驗需要用適當溶液重懸細胞沉淀,進行計數、培養(yǎng)等后續(xù)實驗。

注意: 對于微量或少量的血液樣本,可以不用第1步操作,可直接加入10倍血液體積的ACK Lysis Buffer進行第2步操作,并在4℃或室溫裂解415min。對于鼠的血液,裂解45min已經足夠; 對于人的外周血,宜延長裂解時間至10min,但通常不宜超過15min,并且裂解過程中宜適當搖動以促進紅細胞裂解。

()血液樣本的快速操作(無需洗滌)

1. 新鮮抗凝血中加入10倍體積的ACK Lysis Buffer,輕輕吹打混勻,裂解415min。本操作步驟在4℃條件下操作更佳,亦可在室溫下操作。(特別提醒:對于鼠的血液,裂解45min 已經足夠,對于人的外周血,宜延長裂解時間至10min,但通常不宜超過15min,并且裂解過程中宜適當搖動以促進紅細胞裂解。)

2. 加入 2030ml PBSHBSS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液,輕柔混勻。

3. 400500g離心5min,棄紅色上清。4℃離心效果更佳。

4. 如果發(fā)現紅細胞裂解不*,可以重復上述步驟2和步驟3一次。

5. 根據實驗需要用適當溶液重懸細胞沉淀,進行計數、培養(yǎng)等后續(xù)實驗。

 

注意事項:

1. 制備細胞懸液時應根據實驗需要,不一定要制備成單細胞懸液。

2. 后續(xù)試驗如果是用于細胞培養(yǎng),操作過程中應注意無菌操作,盡量在超凈工作臺內操作。

3. 離心步驟盡量在4℃離心機上操作。

4. 常規(guī)步驟不快速步驟的區(qū)別在于:常規(guī)步驟多了一步洗滌過程的離心,可以節(jié)省洗滌液的用量,并且洗滌效果也更好,不需要大體積的離心管;快速步驟少了一次離心過程,洗滌效果略差一些,同時需要大體積的離心管。

5. 離心洗滌后,通常極微量的紅細胞不會影響后續(xù)的檢測。

6. 如果經過ACK Lysis Buffer處理后的樣品后續(xù)用于總RNA的提取,在處理細胞時不必使用DEPC處理的溶液,即無需在該操作中特意去除 RNase。

7. 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。

 

有效期6個月有效。

 


會員登錄

×

請輸入賬號

請輸入密碼

=請輸驗證碼

收藏該商鋪

X
該信息已收藏!
標簽:
保存成功

(空格分隔,最多3個,單個標簽最多10個字符)

常用:

提示

X
您的留言已提交成功!我們將在第一時間回復您~
撥打電話
在線留言
永仁县| 瑞昌市| 汉源县| 赞皇县| 红桥区| 墨玉县| 拉孜县| 雷山县| 绵阳市| 虹口区| 巴彦淖尔市| 弥渡县| 平潭县| 微博| 澄江县| 牡丹江市| 秦皇岛市| 宜宾市| 平定县| 高唐县| 普定县| 阜宁县| 苍溪县| 岳普湖县| 辉南县| 遂平县| 蒲城县| 固阳县| 义乌市| 仙桃市| 成都市| 岑溪市| 贵阳市| 金堂县| 天门市| 新沂市| 临猗县| 沙坪坝区| 嘉兴市| 峨边| 仁怀市|