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上海尚寶生物科技有限公司
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AB-PAS染色液使用說明書

時間:2022/8/8閱讀:526
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AB-PAS染色液

產(chǎn)品貨號:R22021

 

產(chǎn)品規(guī)格:6×50ml/6×100ml

 

產(chǎn)品簡介:

糖原染色是病理學(xué)中常規(guī)的染色方法之一,McManus1946年最先使用高碘酸-雪夫技術(shù)顯示黏蛋白,該法常用來顯示糖原和其他多糖,該技術(shù)不僅能顯示糖原,還能顯示中性黏液性物質(zhì)和某些酸性物質(zhì)。

阿利新藍(又稱阿爾辛藍、愛先藍等)PAS技術(shù)聯(lián)合使用可鑒別同一組織切片中的中性黏蛋白和酸性黏蛋白。這種技術(shù)也常用作廣泛檢測黏蛋白的手段,切片先經(jīng)標準阿利新藍(pH=2.5)染色再使用PAS技術(shù)。阿利新藍可將唾液黏蛋白、硫黏蛋白和蛋白多糖染成藍色。PAS技術(shù)可將中性黏蛋白染成深紅或紅紫色,同時將既含中性黏蛋白又含酸性黏蛋白的組織和細胞染成深淺不同的紫色,這是由于阿利新藍與Schiff試劑結(jié)合并發(fā)生反應(yīng)。上述染色常可出現(xiàn)在含有中性黏蛋白和唾液黏蛋白的小腸杯狀細胞中。阿利新藍的染色原理在于是類銅鈦花青染料,這種陽離子染料與酸性基團結(jié)合,也即阿利新藍與組織內(nèi)含有的陰離子基團如羧基和硫酸根形成不溶性復(fù)合物。分子中帶正電荷的鹽鍵與酸性黏多糖物質(zhì)中帶負電荷的酸性基團結(jié)合形成不溶性的復(fù)合物而呈藍色,再與PAS進行復(fù)合染色,就能顯示三種不同黏液物質(zhì)成分。

尚寶生物 AB-PAS染色液核心成分為阿利新藍染色液和Schiff Reagent,多用于黏液物質(zhì)染色,糖原、中性黏蛋白、各種糖蛋白呈紫紅色,其余呈藍色。

 

產(chǎn)品組成:

試劑名稱

6×50ml

6×100ml

保存條件

試劑(A)阿利新藍染色液

50ml

100ml

4℃,避光

試劑(B)過碘酸溶液

50ml

100ml

4℃,避光

試劑(C)Schiff Reagent

50ml

100ml

4℃,避光

試劑(D):蘇木素染色液

50ml

100ml

室溫,避光

試劑(E):酸性分化液

50ml

100ml

室溫

試劑(F)Scott 藍化液

50ml

100ml

室溫

 

自備材料:

1. 系列乙醇

2. 蒸餾水

 

操作步驟(僅供參考):

1. 脫蠟至水,蒸餾水洗2min

2. 入阿利新藍染色液,染色1020min。

3. 蒸餾水洗3次,每次12min

4. 入過碘酸溶液,氧化5min。

5. Schiff Reagent,浸染1020min。

6. 傾去Schiff Reagent,流水沖洗10min

7. (可選)入蘇木素染色液,染核12min。

8. 用酸性分化液分化25s,水洗。

9. Scott藍化液返藍,水洗3min。

10. 逐級常規(guī)乙醇脫水。二甲苯透明,中性樹膠封固。

 

染色結(jié)果:

糖原、中性黏蛋白、各種糖蛋白            紫紅色

酸性黏蛋白(硫黏蛋白和唾液黏蛋白)         藍色

蛋白多糖和透明質(zhì)酸                      藍色

備注:含有中性黏蛋白和酸性黏蛋白的細胞或組織可染成不同程度的藍紫色至紫色。

 

注意事項

1. 切片脫蠟應(yīng)盡量干凈,否則影響染色效果。

2. 過碘酸氧化時間不宜過久,氧化時的溫度以1822℃最佳。

3. 阿利新藍染色液、過碘酸溶液、Schiff Reagent均應(yīng)置于4℃密閉保存,使用時避免接觸過多陽光和空氣。使用前最好提前30min取出恢復(fù)至室溫,避光暗處使用。

4. 酸性分化液 應(yīng)經(jīng)常更換新液,分化時間應(yīng)該依據(jù)切片厚薄、組織類別和酸性分化液的新舊而定,另外分化后自來水沖洗時間應(yīng)該足夠。

5. 切片在過碘酸溶液和Schiff Reagent中作用時間非常重要,該依據(jù)切片厚薄、組織類別等決定。

6. 尚寶生物 蘇木素染色液復(fù)染細胞核時應(yīng)淡染,以免影響陽性物質(zhì)AB的觀察。目的是防止胞漿或黏蛋白著色而掩蓋阿利新藍的顏色。

7. 阿利新藍-PAS聯(lián)合技術(shù)的染色順序可影響最終結(jié)果。PAS技術(shù)在阿爾辛藍染色之前時,中性黏蛋白和糖原可染成紫色。與此相反,阿利新藍染色在PAS技術(shù)之前時,則可將這些物質(zhì)染成預(yù)期的紫紅色。

8. 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。

 

保質(zhì)期6個月有效。

 


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