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AB-PAS染色液
產(chǎn)品貨號(hào):R22021
產(chǎn)品規(guī)格:6×50ml/6×100ml
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
糖原染色是病理學(xué)中常規(guī)的染色方法之一,McManus在1946年最先使用高碘酸-雪夫技術(shù)顯示黏蛋白,該法常用來顯示糖原和其他多糖,該技術(shù)不僅能顯示糖原,還能顯示中性黏液性物質(zhì)和某些酸性物質(zhì)。
阿利新藍(lán)(又稱阿爾辛藍(lán)、愛先藍(lán)等)和PAS技術(shù)聯(lián)合使用可鑒別同一組織切片中的中性黏蛋白和酸性黏蛋白。這種技術(shù)也常用作廣泛檢測(cè)黏蛋白的手段,切片先經(jīng)標(biāo)準(zhǔn)阿利新藍(lán)(pH=2.5)染色再使用PAS技術(shù)。阿利新藍(lán)可將唾液黏蛋白、硫黏蛋白和蛋白多糖染成藍(lán)色。PAS技術(shù)可將中性黏蛋白染成深紅或紅紫色,同時(shí)將既含中性黏蛋白又含酸性黏蛋白的組織和細(xì)胞染成深淺不同的紫色,這是由于阿利新藍(lán)與Schiff試劑結(jié)合并發(fā)生反應(yīng)。上述染色??沙霈F(xiàn)在含有中性黏蛋白和唾液黏蛋白的小腸杯狀細(xì)胞中。阿利新藍(lán)的染色原理在于是類銅鈦花青染料,這種陽(yáng)離子染料與酸性基團(tuán)結(jié)合,也即阿利新藍(lán)與組織內(nèi)含有的陰離子基團(tuán)如羧基和硫酸根形成不溶性復(fù)合物。分子中帶正電荷的鹽鍵與酸性黏多糖物質(zhì)中帶負(fù)電荷的酸性基團(tuán)結(jié)合形成不溶性的復(fù)合物而呈藍(lán)色,再與PAS進(jìn)行復(fù)合染色,就能顯示三種不同黏液物質(zhì)成分。
尚寶生物 AB-PAS染色液核心成分為阿利新藍(lán)染色液和Schiff Reagent,多用于黏液物質(zhì)染色,糖原、中性黏蛋白、各種糖蛋白呈紫紅色,其余呈藍(lán)色。
產(chǎn)品組成:
試劑名稱 | 6×50ml | 6×100ml | 保存條件 |
試劑(A):阿利新藍(lán)染色液 | 50ml | 100ml | 4℃,避光 |
試劑(B):過碘酸溶液 | 50ml | 100ml | 4℃,避光 |
試劑(C):Schiff Reagent | 50ml | 100ml | 4℃,避光 |
試劑(D):蘇木素染色液 | 50ml | 100ml | 室溫,避光 |
試劑(E):酸性分化液 | 50ml | 100ml | 室溫 |
試劑(F):Scott 藍(lán)化液 | 50ml | 100ml | 室溫 |
自備材料:
1. 系列乙醇
2. 蒸餾水
操作步驟(僅供參考):
1. 脫蠟至水,蒸餾水洗2min。
2. 入阿利新藍(lán)染色液,染色10~20min。
3. 蒸餾水洗3次,每次1~2min。
4. 入過碘酸溶液,氧化5min。
5. 入Schiff Reagent,浸染10~20min。
6. 傾去Schiff Reagent,流水沖洗10min。
7. (可選)入蘇木素染色液,染核1~2min。
8. 用酸性分化液分化2~5s,水洗。
9. 用Scott藍(lán)化液返藍(lán),水洗3min。
10. 逐級(jí)常規(guī)乙醇脫水。二甲苯透明,中性樹膠封固。
染色結(jié)果:
糖原、中性黏蛋白、各種糖蛋白 紫紅色
酸性黏蛋白(硫黏蛋白和唾液黏蛋白) 藍(lán)色
蛋白多糖和透明質(zhì)酸 藍(lán)色
備注:含有中性黏蛋白和酸性黏蛋白的細(xì)胞或組織可染成不同程度的藍(lán)紫色至紫色。
注意事項(xiàng):
1. 切片脫蠟應(yīng)盡量干凈,否則影響染色效果。
2. 過碘酸氧化時(shí)間不宜過久,氧化時(shí)的溫度以18~22℃最佳。
3. 阿利新藍(lán)染色液、過碘酸溶液、Schiff Reagent均應(yīng)置于4℃密閉保存,使用時(shí)避免接觸過多陽(yáng)光和空氣。使用前最好提前30min取出恢復(fù)至室溫,避光暗處使用。
4. 酸性分化液 應(yīng)經(jīng)常更換新液,分化時(shí)間應(yīng)該依據(jù)切片厚薄、組織類別和酸性分化液的新舊而定,另外分化后自來水沖洗時(shí)間應(yīng)該足夠。
5. 切片在過碘酸溶液和Schiff Reagent中作用時(shí)間非常重要,該依據(jù)切片厚薄、組織類別等決定。
6. 用尚寶生物 蘇木素染色液復(fù)染細(xì)胞核時(shí)應(yīng)淡染,以免影響陽(yáng)性物質(zhì)AB的觀察。目的是防止胞漿或黏蛋白著色而掩蓋阿利新藍(lán)的顏色。
7. 阿利新藍(lán)-PAS聯(lián)合技術(shù)的染色順序可影響最終結(jié)果。PAS技術(shù)在阿爾辛藍(lán)染色之前時(shí),中性黏蛋白和糖原可染成紫色。與此相反,阿利新藍(lán)染色在PAS技術(shù)之前時(shí),則可將這些物質(zhì)染成預(yù)期的紫紅色。
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保質(zhì)期:6個(gè)月有效。
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