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5×蛋白上樣緩沖液(含巰基還原劑)
產(chǎn)品貨號(hào):T15258
產(chǎn)品規(guī)格:10ml
產(chǎn)品簡介:
本產(chǎn)品適用于SDS-PAGE(SDS 變性聚丙烯酰胺凝膠電泳)時(shí)作蛋白質(zhì)上樣用。其主要成份為SDS,巰基還原劑,溴酚藍(lán),緩沖鹽溶液等。SDS可與蛋白質(zhì)結(jié)合使蛋白質(zhì)-SDS復(fù)合物上帶有大量的負(fù)電荷,這時(shí)蛋白質(zhì)本身的電荷*被SDS掩蓋,消除了各種蛋白質(zhì)本身電荷的差異,SDS還可以斷開分子內(nèi)和分子間的氫鍵,破壞蛋白質(zhì)分子的二級(jí)和三級(jí)結(jié)構(gòu),β-巰基乙醇可以斷開半胱氨酸殘基之間的二硫鍵,破壞蛋白質(zhì)的四級(jí)結(jié)構(gòu),消除了蛋白結(jié)構(gòu)之間的差異。最終無電荷及結(jié)構(gòu)上差異的蛋白(亞單位),電泳速度只是與其分子量大小有關(guān)。溴酚藍(lán)用作電泳時(shí)的指示劑,可大概指示電泳結(jié)束的時(shí)間。
操作步驟(僅供參考):
1. 請按每40μL蛋白樣品加入10μL上樣緩沖液的比例(5倍稀釋)來使用。如果蛋白濃度過高,可用雙蒸水稀釋。
2. 混勻后,100℃水浴加熱3-5分鐘,使蛋白變性。
3. 冷卻到室溫后,10000-14000rpm離心2-5分鐘,取上清直接上樣電泳即可。
注意事項(xiàng):
1. 聚丙烯酰胺凝膠濃度為8%時(shí)溴酚藍(lán)指示條帶的位置大概在30kd左右,膠濃度12%時(shí),約在20kd 左右,膠濃度15%時(shí),大概在10kd。請根據(jù)自己目標(biāo)條帶來判斷結(jié)果電泳時(shí)間。
2. 本試劑因含巰基還原劑,有一定的毒性,為了您的安全和健康,請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
保存條件:2-8℃保存,自發(fā)貨之日起至少3個(gè)月有效。
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