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使用碘化丙啶PI染色液時(shí)該注意些什么?

時(shí)間:2022/5/12閱讀:2168
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  碘化丙啶PI染色液(1mg/ml)主要由PI和破膜劑組成。常用于檢測(cè)培養(yǎng)的貼壁或懸浮細(xì)胞的細(xì)胞周期和凋亡。還可用于區(qū)分細(xì)胞凋亡和壞死。尚寶生物PI染色液工作濃度為20~50μG/ml,不含RNase,推薦用于RNA染色。細(xì)胞檢測(cè)的內(nèi)容范圍一般為0.1~1×106。
  
  碘化丙啶PI染色液是一種細(xì)胞不可滲透的核酸包埋染料。由于Pi被排除在活細(xì)胞之外,它通常用于選擇性地染色混合的活細(xì)胞和死細(xì)胞群中的死細(xì)胞。PI用作紅色熒光核酸染料;PI與核酸結(jié)合后熒光增強(qiáng)20~30倍;PI在所有類型的細(xì)胞中都具有死細(xì)胞特異性,包括哺乳動(dòng)物細(xì)胞、細(xì)菌和酵母;PI與流式細(xì)胞術(shù)和熒光顯微鏡兼容。PI進(jìn)入細(xì)胞與DNA和RNA結(jié)合后,熒光增強(qiáng)20~30倍。PI可用于流式細(xì)胞術(shù)和熒光顯微鏡。PI也可用作多色熒光成像的雙染色,但核特異性染色需要消化細(xì)胞RNA。
  
  碘化丙啶PI染色液使用注意事項(xiàng):
  
  1、熒光染料存在猝滅問(wèn)題。建議染色后盡快檢測(cè)。
  
  2、為了減緩熒光猝滅,可以使用抗熒光猝滅封閉液。
  
  3、在離心獲得細(xì)胞沉淀的過(guò)程中,對(duì)于特殊細(xì)胞,如果細(xì)胞沉淀不足,可適當(dāng)加大離心力或延長(zhǎng)離心時(shí)間。
  
  4、如果用于檢測(cè)組織的細(xì)胞周期和凋亡,檢測(cè)前必須將組織消化制備成單細(xì)胞懸液。
  
  5、在細(xì)胞凋亡過(guò)程中,細(xì)胞凋亡的標(biāo)志之一是DNA染色能力下降,但這種情況并非絕對(duì)。DNA含量的降低或DNA與染料結(jié)合能力的降低也會(huì)導(dǎo)致DNA染色能力的降低,在分析時(shí)應(yīng)特別注意。
  
  6、PI對(duì)人體有一定的刺激性,請(qǐng)注意適當(dāng)防護(hù)。
  
  7、為了您的安全和健康,請(qǐng)穿戴實(shí)驗(yàn)服和一次性手套。

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