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DAB辣根過(guò)氧化物酶顯色試劑盒(20×)
產(chǎn)品貨號(hào):T15131
產(chǎn)品規(guī)格:2×10ml/2×50ml
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
DAB辣根過(guò)氧化物酶顯色液(DAB Horseradish Peroxidase Color Development Kit)是一種依據(jù)辣根過(guò)氧化物酶(HRP)結(jié)合顯色,用于免疫組化顯色、原位雜交顯色或Western、Southern、Northern、EMSA等膜顯色的試劑盒。DAB即3,3N-Diaminobenzidine Tertrahydrochloride, 是辣根過(guò)氧化物酶的常用底物。
尚寶生物 DAB辣根過(guò)氧化物酶顯色試劑盒可以用于細(xì)胞或組織在免疫組化或原位雜交時(shí)結(jié)合的辣根過(guò)氧化物酶顯色,也可用于Western等結(jié)合有辣根過(guò)氧化物酶的膜的顯色檢測(cè)以及細(xì)胞或組織內(nèi)源性的辣根過(guò)氧化物酶顯色。該試劑僅用于科研領(lǐng)域,不宜用于臨床診斷或其他用途。
產(chǎn)品組成:
試劑名稱 | 2×10ml | 2×50ml | 保存條件 |
試劑(A):DAB顯色液A | 10ml | 50ml | -20℃,避光 |
試劑(B):DAB顯色液B | 10ml | 50ml | -20℃,避光 |
操作步驟(僅供參考):
1. 常規(guī)組織切片、細(xì)胞樣品、膜與辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的抗體或其它形式的探針?lè)跤?,用適當(dāng)洗滌液洗滌3~5次,每次3~5min。對(duì)于檢測(cè)內(nèi)源性辣根過(guò)氧化物酶的組織或細(xì)胞樣品,在適當(dāng)固定后,也可用洗滌液洗滌3~5次,每次3~5min。
2. 按(A):試劑(B):蒸餾水=的比例混合, 即為DAB顯色工作液,即配即用。
3. 洗滌過(guò)組織后,去除洗滌液,加入適量DAB顯色工作液,確保覆蓋樣品。
4. 室溫避光孵育或更長(zhǎng)時(shí)間,直至顯色至預(yù)期深淺。
5. 去除DAB顯色工作液,用蒸餾水清洗1~2次即可終止顯色反應(yīng)。
6. 對(duì)組織切片或細(xì)胞樣品,反應(yīng)終止后,如有必要可用中性紅染色液染色,便于觀察。對(duì)于膜染色,反終止后可室溫晾干避光保存。
注意事項(xiàng):
1. DAB是致癌物,請(qǐng)注意適當(dāng)防護(hù)。
2. 試劑(A)、試劑(B)避免反復(fù)凍融,以免效率下降。
3. 為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
常見(jiàn)問(wèn)題及可能原因:
1. 背景顯色太深
1) 在進(jìn)行含內(nèi)源性過(guò)氧化氫酶的免疫組化時(shí),如果背景顯色太深,需注意滅活內(nèi)源性過(guò)氧化氫酶??梢栽?/span>4體積甲醇中加入1體積3%過(guò)氧化氫,混勻后用于內(nèi)源性過(guò)氧化氫酶的滅活。
2) 可以考慮縮短顯色時(shí)間,或降低二抗?jié)舛取?/span>
3) _x0001_選擇適當(dāng)強(qiáng)度的洗滌液,或延長(zhǎng)洗滌時(shí)間。
2. 沒(méi)有顯色或顯色太弱
1) 當(dāng)提高一抗或二抗的濃度。檢測(cè)二抗效果,滴一滴稀釋二抗在膜上,檢測(cè)二抗是否可以被正常顯色。
2) 考慮使用更加靈敏的放大檢測(cè)體系,例如使用生物素檢測(cè)體系。
3) 適當(dāng)延長(zhǎng)顯色時(shí)間,另外確定抗原修復(fù)是否對(duì)于使用的一抗是必需的。
有效期: 12個(gè)月有效。
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