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DAB辣根過氧化物酶顯色試劑盒(20×)
產(chǎn)品貨號:T15131
產(chǎn)品規(guī)格:2×10ml/2×50ml
產(chǎn)品簡介:
DAB辣根過氧化物酶顯色液(DAB Horseradish Peroxidase Color Development Kit)是一種依據(jù)辣根過氧化物酶(HRP)結(jié)合顯色,用于免疫組化顯色、原位雜交顯色或Western、Southern、Northern、EMSA等膜顯色的試劑盒。DAB即3,3N-Diaminobenzidine Tertrahydrochloride, 是辣根過氧化物酶的常用底物。
尚寶生物 DAB辣根過氧化物酶顯色試劑盒可以用于細胞或組織在免疫組化或原位雜交時結(jié)合的辣根過氧化物酶顯色,也可用于Western等結(jié)合有辣根過氧化物酶的膜的顯色檢測以及細胞或組織內(nèi)源性的辣根過氧化物酶顯色。該試劑僅用于科研領(lǐng)域,不宜用于臨床診斷或其他用途。
產(chǎn)品組成:
試劑名稱 | 2×10ml | 2×50ml | 保存條件 |
試劑(A):DAB顯色液A | 10ml | 50ml | -20℃,避光 |
試劑(B):DAB顯色液B | 10ml | 50ml | -20℃,避光 |
操作步驟(僅供參考):
1. 常規(guī)組織切片、細胞樣品、膜與辣根過氧化物酶標記的抗體或其它形式的探針孵育后,用適當洗滌液洗滌3~5次,每次3~5min。對于檢測內(nèi)源性辣根過氧化物酶的組織或細胞樣品,在適當固定后,也可用洗滌液洗滌3~5次,每次3~5min。
2. 按(A):試劑(B):蒸餾水=的比例混合, 即為DAB顯色工作液,即配即用。
3. 洗滌過組織后,去除洗滌液,加入適量DAB顯色工作液,確保覆蓋樣品。
4. 室溫避光孵育或更長時間,直至顯色至預期深淺。
5. 去除DAB顯色工作液,用蒸餾水清洗1~2次即可終止顯色反應。
6. 對組織切片或細胞樣品,反應終止后,如有必要可用中性紅染色液染色,便于觀察。對于膜染色,反終止后可室溫晾干避光保存。
注意事項:
1. DAB是致癌物,請注意適當防護。
2. 試劑(A)、試劑(B)避免反復凍融,以免效率下降。
3. 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
常見問題及可能原因:
1. 背景顯色太深
1) 在進行含內(nèi)源性過氧化氫酶的免疫組化時,如果背景顯色太深,需注意滅活內(nèi)源性過氧化氫酶。可以在4體積甲醇中加入1體積3%過氧化氫,混勻后用于內(nèi)源性過氧化氫酶的滅活。
2) 可以考慮縮短顯色時間,或降低二抗?jié)舛取?/span>
3) _x0001_選擇適當強度的洗滌液,或延長洗滌時間。
2. 沒有顯色或顯色太弱
1) 當提高一抗或二抗的濃度。檢測二抗效果,滴一滴稀釋二抗在膜上,檢測二抗是否可以被正常顯色。
2) 考慮使用更加靈敏的放大檢測體系,例如使用生物素檢測體系。
3) 適當延長顯色時間,另外確定抗原修復是否對于使用的一抗是必需的。
有效期: 12個月有效。
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