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組織無機磷含量檢測試劑盒(可見分光光度法)

時間:2022/3/28閱讀:338
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組織無機磷含量檢測試劑盒(可見分光光度法)

正式測定前務必取2-3個預期差異較大的樣本做預測定。

產品貨號:BA1481

產品規(guī)格:50/48

產品內容:

試劑一:液體50mL×1瓶,4℃保存。

試劑二:液體10mL×1瓶,4℃保存。

試劑三:粉劑×1瓶,4℃避光保存。臨用前配制,加入20 mL蒸餾水,充分溶解后加入試劑二(全部),混勻。

標準品:液體1mL×1支,1mmol/L無機磷標準液,4℃保存。

產品說明

無機磷主要指磷酸根,參與生物體內多種代謝,包括能量代謝、核酸代謝、蛋白質磷酸化和脫磷酸化等等,此外促進碳水化合物的合成、轉化和轉運。

鉬藍與磷酸根生成660nm有特征吸收峰的物質,通過測定660nm光吸收,即可計算無機磷含量。

需自備的儀器和用品:

可見分光光度計、離心機、水浴鍋、可調式移液槍、1mL玻璃比色皿和蒸餾水。

操作步驟

一、無機磷提取: 

稱取約0.1g組織,加試劑一1.0 mL冰上充分勻漿,4℃10000rpm,離心10min,取上清液,置冰上待測。

二、測定:

1. 分光光度計預熱30min以上,調節(jié)波長到660nm,蒸餾水調零。

2. 打開水浴鍋,調節(jié)溫度到40℃。

2. 測定

試劑名稱(uL

空白管

標準管

測定管

標準液


50


上清液



50

蒸餾水

500

450

450

試劑三

500

500

500

分別混勻后置于40℃水浴保溫10min,室溫冷卻10min后于660nm測定吸光度,分別記為A空白管、A標準管、A測定管。

注意:需在40min內完成比色,空白管和標準管只需測定一次。

三、組織無機磷含量計算: 

無機磷含量(mmol/g 樣本鮮重)= [C標準液×(A測定管-A空白管)÷(A標準管-A空白管)]×V總÷W

=0.001×(A測定管-A空白管)÷(A標準管-A空白管)÷W

C標準液:1mmol/L;V總:上清液總體積,1mL=0.001 L;W:樣品質量,g。

注意事項

1、試劑三需臨用前配制,限當天使用。

2、測定前先用1~2個樣品做預實驗,如吸光值大于0.8,需用蒸餾水做相應稀釋。

 

 


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