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生物實(shí)驗(yàn)中瓊脂粉常見(jiàn)問(wèn)題解答
問(wèn)題1:使用瓊脂粉配置的MS培養(yǎng)基顏色明顯變黃?影響實(shí)驗(yàn)?
產(chǎn)品批次不一樣,有些批次的瓊脂粉就是顯黃色,不是質(zhì)量問(wèn)題,不影響使用。
進(jìn)口產(chǎn)品也有直接指出瓊脂粉是黃色為正?,F(xiàn)象。
問(wèn)題2:凝膠強(qiáng)度?
答:凝膠強(qiáng)度(1.5%)≥
1.5g瓊脂粉溶于100ml水,溶解凝固后要放置20℃恒溫箱中靜置10小時(shí)以上,再測(cè)定凝膠強(qiáng)度。與溫度,水質(zhì)等有關(guān)。
一般瓊脂粉和卡拉膠,夏季使用濃度要比冬季偏高。夏季溫度高,保存時(shí)間久,可能會(huì)有部分降解,所以要達(dá)到同樣凝膠強(qiáng)度的用量就偏高。
問(wèn)題3:瓊脂粉不凝固
1、培養(yǎng)基PH值過(guò)低 ,偏酸,水解
2、所加瓊脂量不夠 ,增加用量。攪拌不均勻,倒板前沒(méi)有充分搖勻,凝固不均勻。
3、瓊脂質(zhì)量不過(guò)關(guān),瓊脂條在使用時(shí)添加量要稍微高一點(diǎn),瓊脂粉是不是新買的4、滅菌溫度過(guò)高,加熱時(shí)間過(guò)長(zhǎng)。PH改變或破壞了瓊脂的凝固度5、培養(yǎng)基沒(méi)有加熱溶解夠不夠,就沒(méi)有凝固。是不是瓊脂加錯(cuò)了,營(yíng)養(yǎng)瓊脂不會(huì)凝固。
到平板時(shí)可以推薦在超凈臺(tái)內(nèi)吹干晾干,蒸發(fā)過(guò)多水分。
問(wèn)題4:PH與瓊脂粉?
瓊脂粉默認(rèn)使用PH為中性,一般為7左右,PH小于4則無(wú)法凝結(jié),具體的PH與穩(wěn)定性的檢測(cè)沒(méi)有做過(guò),根據(jù)經(jīng)驗(yàn)來(lái)說(shuō) PH偏堿,凝膠后顏色稍白,PH偏酸,凝膠顏色稍暗。
問(wèn)題5:瓊脂粉做碳源測(cè)試,不加碳源細(xì)菌仍然能生長(zhǎng),上一批次的就不能生長(zhǎng)?
答:理論上應(yīng)該不長(zhǎng),一般微生物都不能利用瓊脂粉,但某些雜菌仍可以利用,所以要檢測(cè)到底是瓊脂粉純度問(wèn)題還是染了雜菌。
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