微生物培養(yǎng)步驟：

1.配置不同濃度的營養(yǎng)液稀釋液:取營養(yǎng)液1ml溶于9ml無菌水中,振蕩 5min配成10%的溶液.

2.將容器口靠近(注意不是對(duì)著)酒精燈燈焰用吸管從此溶液中吸取1ml加入到裝有9ml無菌水的試管中.以此類推制成1%,0.1%,0.01%等不同濃度的稀釋液.

3.將試管口靠近(注意不是對(duì)著)酒精燈燈焰,左手拿試管,右手托培養(yǎng)皿(僅露一條小縫,且靠近燈焰).將溶液倒入培養(yǎng)皿中,在各培養(yǎng)皿上標(biāo)上濃度.

4.將有細(xì)菌生長的樣品容器口靠近(注意不是對(duì)著)酒精燈燈焰,用接種環(huán)挑取菌落上的少量菌體加入10%的營養(yǎng)液中.把接種環(huán)放在酒精燈上灼燒滅菌,再次取樣加入盛1%的營養(yǎng)液的培養(yǎng)皿(僅露一條小縫,且靠近燈焰)中.重復(fù)這個(gè)操作,將各濃度的營養(yǎng)液接上種.

5.輕輕搖勻接上種的培養(yǎng)皿,置于恒溫箱內(nèi)37攝氏度保存,3天后就有菌落出現(xiàn).

微生物培養(yǎng)的基本條件：

1、影響微生物生長的因素

微生物的生長，除了受本身的遺傳特性決定外，還受到外界許多因素的影響。影響微生物生長的因素很多，簡要介紹如下。

1） 營養(yǎng)物濃度

細(xì)菌的生長率與營養(yǎng)物的濃度有關(guān):μ=μmax*C/(K C) ，營養(yǎng)物濃度與生長率的關(guān)系曲線是典型的雙曲線。

K值是細(xì)菌生長的很基本的特性常數(shù)。它的數(shù)值很小，表明細(xì)菌所需要的營養(yǎng)濃度非常之低，所以在自然界中，它們到處生長。然而營養(yǎng)太低時(shí)，細(xì)菌生長就會(huì)遇到困難，甚至還會(huì)死亡。這是因?yàn)槌松L需要能量以外，細(xì)菌還需要能量來維持它的生存。這種能量稱為維持能。另一方面，隨著營養(yǎng)物濃度的增加，生長率愈接近最大值。

2）溫度

在一定的溫度范圍內(nèi)，每種微生物都有自已的生長溫度三基點(diǎn)：較低生長溫度、最適生長溫度和最高生長溫度。在生長溫度三基點(diǎn)內(nèi)，微生物都能生長，但生長速率不一樣。微生物只有處于最適生長溫度時(shí)，生長速度才最快，代時(shí)最短。超過較低生長溫度，微生物不會(huì)生長，溫度太低，甚至?xí)劳觥３^最高生長溫度，微生物也要停止生長，溫度過高。也會(huì)死亡。一般情況下，每種微生物的生長溫度三基點(diǎn)是恒定的。但也常受其它環(huán)境條件的影響而發(fā)生變化。

根據(jù)微生物最適生長溫度的不同，可將它們分為三個(gè)類型：

a.嗜冷微生物：其是適生長溫度多數(shù)在-10℃－20℃之間

b.中溫微生物：其適合生長溫度一般在20℃－45℃之間

c.嗜熱微生物：生長溫度在45℃以上。

3）水分

水分是微生物進(jìn)行生長的必要條件。芽孢、孢子萌發(fā)，首先需要水分。微生物是不能脫離水而生存的。但是微生物只能在水溶液中生長，而不能生活在純水中。各種微生物在不能生長發(fā)育的水分活性范圍內(nèi)，均具有狹小的適當(dāng)?shù)乃只钚詤^(qū)域。

4）氧氣

按照微生物對(duì)氧氣的需要情況，可將它們分為以下五個(gè)類型。

a.需氧微生物：這類微生物需要氧氣供呼吸之用。沒有氧氣，便不能生長，但是高濃度的氧氣對(duì)需氧微生物也是有毒的。很多需氧微生物不能在氧氣濃度大于大氣中氧氣濃度的條件下生長。絕大多數(shù)微生物都屬于這個(gè)類型。