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詳細(xì)說說TBE緩沖溶液的應(yīng)用和注意事項(xiàng)

時(shí)間:2021/9/15閱讀:9078
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  TBE緩沖溶液常用于DNA電泳緩沖液,也可用于瓊脂糖凝膠。當(dāng)分辨率要求不高時(shí),可以使用TAE和tbe;當(dāng)分辨率要求較高時(shí),較低濃度的膠水有利于提高高分子量核酸的分辨率。這時(shí)候應(yīng)該用Tae;較高的膠濃度有利于提高小分子核酸的分辨率。這時(shí)候就應(yīng)該使用tbe。Tbe(5x)濃縮了5倍。使用前必須根據(jù)具體實(shí)驗(yàn)要求用蒸餾水或去離子水稀釋成1x或0.5x。
  1、核酸分子瓊脂糖凝膠和聚丙烯酰胺凝膠電泳。
  2、同時(shí)用電泳緩沖液和凝膠制備緩沖液。
  3、它用于電泳分離小于1500bps的RNA和DNA。
  4、它不應(yīng)用于恢復(fù)電泳。
  TBE緩沖溶液使用注意事項(xiàng):
  1、使用新鮮的0.5×Tbe緩沖液進(jìn)行凝膠制備和電泳。
  2、零點(diǎn)五×Tbe緩沖液制備:50ml50×將tbe與950ml去離子水充分混合。
  3、雙鏈線性核酸分子在tbe緩沖液中的遷移速度比在Tae中慢10%。
  TBE緩沖溶液一般以儲(chǔ)存液的形式配制,濃度為N10×,工作時(shí)稀釋N10倍,濃度為1×,Tbe儲(chǔ)存液長(zhǎng)期存放容易沉淀,會(huì)影響電泳結(jié)果。因此,將其配制成10×,工作濃度為0.5×。為保持電泳所需的離子強(qiáng)度和pH值,應(yīng)經(jīng)常更換電泳緩沖液。使用時(shí),如用于瓊脂糖電泳,可稀釋10倍至0.5倍使用。如果用于頁面,添加量為1/5(2ml用10ml膠水),0.5仍可用于電泳×本產(chǎn)品也可配成10×,但配制后不穩(wěn)定,溶液產(chǎn)生沉淀。

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