Precellys:從受感染的組織中提取病毒RNA
本篇應(yīng)用出自比利時勒芬大學(xué)的一個實驗室,該實驗室主要研究抗病毒化學(xué)治療。為了評估發(fā)現(xiàn)的抗病毒化合物的活性,用抗病毒化合物處理受到病毒感染的老鼠,并提取了特定病毒復(fù)制的組織,做下一步研究。
實驗材料
Precellys 24組織研磨器或Precellys Evolution+Cryolys制冷系統(tǒng);
2ml Precellys裂解管CK28(2.8mm陶瓷珠,P000911-LYSK0-A.0);
30-75mg老鼠胰腺;
Buffer:將體積調(diào)節(jié)至重量體積比為5%。
實驗程序
Precellys 24參數(shù)為轉(zhuǎn)速6500rpm,研磨3個循環(huán),每個循環(huán)5s,間歇10s;
Precellys Evolution+Cryolys制冷參數(shù)為轉(zhuǎn)速7500rpm,研磨3個循環(huán),每個循環(huán)5s,間歇10s,溫度設(shè)定為4°C。
實驗結(jié)果
研磨老鼠胰腺之后,勒芬大學(xué)實驗室做了以下研究:1.首先加入RLT裂解液,之后從上清液中提取病毒RNA;圖一為經(jīng)過病毒誘導(dǎo)的老鼠胰腺里病毒RNA的含量變化,是提取總RNA之后實時定量PCR的結(jié)果;
圖一
圖二為傳染性的病毒復(fù)制過程,把研磨之后的勻質(zhì)液加入到生長介質(zhì)中,使用生理鹽水處理,上清液被滴定到細(xì)胞培養(yǎng)板(96孔板,傳染性的病毒效價表示為“-log CCID50/ml”,其中CCID50代表細(xì)胞培養(yǎng)感染劑量50%,是表達(dá)病毒庫效價的一種度量)。
圖二
結(jié)論:Precellys 24組織研磨器可以幫助我們評估新發(fā)現(xiàn)的抗病毒化合物的活性,我們也可以使用Precellys組織研磨器來提取病毒RNA和傳染性的病毒。
Precellys生物樣品研磨器:
超快速: up to 10 000 rpm
超靈活: 0.5, 2, 7和 15mL研磨管
超高效: 強(qiáng)力3D振動
超保護(hù): Cryolys Evolution新型冷卻技術(shù),無需液氮和壓縮空氣